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34Determinationofquinocetoneinfeedcontent—HighperformanceliquidI本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定a)增加方法检出限、定量限；）；）；1饲料中喹烯酮的测定高效液相色谱法本文件规定了饲料中喹烯酮含量的高效液相色谱测本方法检出限为0.5mg/kg，定量限为1.GB/T6682分析实验室用水规格流动相：乙腈-甲醇-（0.025mol/L）磷酸溶液，按体积比25：20：5），）：溶解后，加入甲醇定容至100mL棕色容量瓶，配制成浓度为0.5mg/mL的2b)标准工作溶液：分别吸取储备液(5.9-a))1mL、2mL、5mL、10mL、20mL于100mL棕色容量瓶，用流动相溶液(5.7)定容，标准工作溶液系列浓度分别为5μg/mL、10μg/mL、6仪器和设备6.1高效液相色谱仪：配紫外检测器。6.2分析天平：感量0.1g、0.1mg、0.01mg。6.3离心机：≥8000r/min。6.4超声波仪。6.5分析筛：孔径0.42mm。6.6粉碎机。6.7微孔滤膜：孔径0.45μm有机滤膜。7试样的制备按GB/T20195的规定制备，磨碎，全部通过分析筛(6.5),混匀，装入磨口瓶中备用。8分析步骤8.1试样的提取称取试样适量(配合饲料5.0g、浓缩饲料3.0g、预混合饲料1.0g),精确至0.1g,置于100mL具塞锥形瓶中，准确加入流动相50mL,超声提取30min,移取10mL至离心管，以8000r/min离心10min,取离心上清液过0.45μm有机滤膜，滤液供高效液相色谱仪测定，同时进行平行试验。8.2参考色谱条件色谱柱：色谱柱：Cs柱(250mm×4.6mm,5μm)或相当者；检测波长：260nm;流动相：乙腈-甲醇-(0.025mol/L)磷酸溶液，按体积比25:20:55(v/v);流速：1.0mL/min;柱温：25℃;喹烯酮标准工作溶液和试样溶液分别进样，得到色谱峰面积响应值，在线性范围内，用外标法测定，以保留时间定性，峰面积定量。喹烯酮标准工作溶液色谱图参见附录A中图A.1。8.4结果的计算与表述8.4.1计算公式结果按式(1)计算：3X——试样中喹烯酮含量，单位为毫克每千克（mg/kgC——试液色谱峰对应的喹烯酮浓度，单位为微克每毫升(μg/mLm——试样质量，单位为克（gf——稀释倍数。测定结果用两次平行测定的

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