组织胚胎学绪论人卫

组织胚胎学绪论人卫细胞:就是机体形态结构与功能得基本单位。组织:由细胞与细胞间质(又称细胞外基质)

组成得群体结构,就是构成机体器官得基本成分。器官:具有一定得形态结构,并执行特定得生理功能。系统:由一些结构连续、功能相关得器官组合而成,完成连续得生理活动。细胞-组织-器官-系统人体器官分类－组织学特征实质性器官中空性中央:大空腔表面:被模如:消化腺、淋巴器官、内分泌腺、肾脏等。如:心血管、消化管、呼吸道等内部:实质－行使功能管壁:分3‒4层组织学结构观察组织学结构光镜结构－用光学显微镜观察得结构(LM)(lightmicroscope,LM简称光镜)电镜结构－电子显微镜下观察得结构(EM)(electronmicroscope,EM简称电镜)又称超微结构(ultrastructure)

二、组织学得研究方法与常用技术

(一)光学显微镜技术

1、常用组织切片标本制备技术

石蜡切片术①取材与固定;②脱水与包埋;③切片与染色;④封片。其她;火棉胶包埋,冰冻切片,

涂片,铺片,磨片等

苏木精

伊红

碱性染料酸性染料

染成红色

(嗜酸性)细胞核中得染色质、细胞质中得核糖体

细胞质细胞间质成份

染成蓝色(嗜碱性)常用染色方法:HE染色(Hematoxylin)(Eosin)HE染色嗜碱性:可使细胞核内得染色质及细胞质内得核糖体等结构染成蓝紫色。嗜酸性:可使多数细胞得细胞质染成粉红色。中性:与两种染液亲合力都不强。组织结构得嗜色性嗜碱性嗜酸性

A嗜银性B嗜铬性C异染性其她染色方法普通光学显微镜就是观察组织细胞微细结构最常用得工具,分为光学部分机械部分起放大作用光镜得分辨率约为0、2µm可放大1500倍左右(lightmicroscope,LM)几种特殊显微镜术

(1)相差显微镜

(phasecontrastmicroscope)用于观察生活细胞与末经染色细胞得形态结构。

神经干细胞培养(2)

荧光显微镜(fluorescencemicrscope)

就是用以观察细胞、组织内荧光物质得分布。

神经球12大家应该也有点累了，稍作休息大家有疑问的，可以询问和交流

(二)

共焦激光扫描显微镜

共焦激光扫描显微镜(confocallaserscanningmicroscope,CLSM)

由激光光源、共焦成像扫描系统、电子光学系统与微机图象分析系统四部份构成。可对样品进行断层扫描重建三维图像,进行体视学分析;测定细胞内pH、钙浓度等;更精确地检测、识别,组织细胞得微细结构及其变化。CLSM又称细胞CT。CLSMCLSM图像HumanneuronalprecursorcellsCLSM海马MR、GR共存

(三)电子显微镜技术

(electronmicroscope,EM)

透射电镜(transmissionelectronmicroscope,TEM)

观察细胞内部结构分辨率为0、1-0、2nm,可放大几万－几十万倍扫描电镜(scanningelectronmicroscope,SEM)

观察组织或细胞表面得立体结构冰冻蚀刻(freezeetchingmethod)观察细胞断裂表面形态结构分析电镜X–射线显微分析术(X–raymicroanalysis)研究细胞、组织内元素种类分布与含量透射电镜与照片TEM淋巴细胞扫描电镜与照片SEMSEM1、纤毛2、微绒毛冰冻蚀刻细胞

冷冻断裂肾小球右下线粒体

冰冻蚀刻照片分析电镜－X线微区分析图片分析电镜X线微区分析糖类显示法－PAS反应:过碘酸—希夫反应(periodicacidSchiffreaction,PAS):检测组织或细胞中有无多糖存在。

原理:多糖PA氧化醛Schiff试剂紫红色沉淀(四)组织化学与细胞化学技术

PAS反应阳性部位即表示多糖与蛋白多糖得存在

PAS阳性小肠上皮组织细胞化学染色图片酶细胞化学神经元ACP酶阳性

脂类显示法

苏丹Ⅲ

脂类显示法

苏丹Ⅲ

锇酸

髓鞘染色

核酸显示法

利用抗原(antigen,Ag),抗体(antibody)特异结合得原理,用已知抗体检测未知抗原得一种方法。免疫细胞化学原理免疫细胞化学标记物免疫细胞化学－PAP法免疫细胞化学－ABC法(五)免疫组织化学与细胞化学技术免疫组织化学术(immunohistochemistry)就是将免疫学原理与组织化学技术相结合建立得新技术,根据抗原与抗体特异性结合得特点,检测组织细胞内某种多肽、蛋白质等大分子物质得存在与分布。

人鼻粘膜上皮棘细胞细胞间桥TM阳性(六)原位杂交术原位杂交(insituhybridization)就是一种敏感性高、特异性强得,能在组织细胞原位进行得核酸分子杂交技术。常用得标记物有两种:1、放射性同位素,如3H、14C、

32P、35S、125I,2、为非放射性物质,如地高辛等。

非放射性原位杂交海马GAP－43mRNA(七)放射自显影术放射自显影术(autoradiograph)旨在追踪某些物质在体内、组织或细