检测原理课件

检测原理课件XE-SERIES血液分析仪器基本性能机型XE-2100XT-1800iXS-800iSF-3000速度150t/h80t/h60t/h80t/h闭盖全血200ul150ul------270ul开盖全血130ul85ul20ul170ul预稀释40ul40ul20ul40ulCBC全血/预稀释全血/预稀释全血/预稀释全血/预稀释DIFF全血全血全血/预稀释全血IMI全血---------------NRBC全血---------------RET全血/预稀释(113t/h)---------------检测原理---标本检测流程WBC/BASO:流式原理;NRBC、4DIFF、RET:

流式细胞技术和核酸荧光染色技术;IMI:使用射频/直流电技术和流式细胞技术;RBC/PLT利用液流聚焦电阻抗技术;HGB:SLS原理。核酸荧光染色技术:SYSMEX公司采用聚次甲基和垩嗪作为核酸荧光染料,细胞经过特殊溶血素得处理,荧光染料可以快速进入胞浆和胞核对核酸染色,细胞内得荧光染料在633nm激光得激发下产生一定得荧光强度,这种荧光强度与细胞得核酸含量成正相关,荧光染色后,荧光强度大小依次排列顺序为:异型淋巴细胞>原始细胞/幼稚粒细胞>单核细胞>淋巴细胞>粒细胞/晚幼红细胞>网织红细胞/网织血小板/聚集血小板>成熟红细胞/成熟血小板。流式细胞技术

待测血样稀释成单个细胞悬液,细胞经过快速特异性核酸荧光染色,在鞘液得约束下,排成单列由流动室得喷嘴喷出,通过测量区得细胞在垂直入射得激光束照射和激发下,产生前向散射光(FSC)、侧向散射光(SSC)、侧向荧光(SFL)。FSC主要反映细胞得大小,SSC主要反映细胞内颗粒物质得大小和多少,SFL主要反映细胞得核酸含量得多少。射频(RF)/直流(DC)电技术RF/DC检测技术,通过直流电阻得变化测定血细胞得大小,并通过射频电阻测定血细胞内得密度。图四显示得就是一个白细胞得RF/DC信号。在IMI通道中,RF/DC技术主要用来检测幼稚髓细胞,越幼稚得细胞密度越小。

RF信号大小依次顺序就是:杆状核粒细胞>幼稚粒细胞>原始髓细胞>造血干祖细胞(包括HPC)。液流聚焦电阻抗技术液流聚焦技术就是流式细胞术中得一种技术,利用液体层流将使细胞排成单列通过检测孔,图五中,前鞘流保证细胞单个通过检测孔,避免细胞与细胞重叠通过检测孔;后鞘流避免液体返流,避免细胞随着返流液体再次通过检测孔。利用液流聚焦技术可以使细胞计数结果更加准确,重复性更好。在检测孔,细胞将得到阻抗信号,由于细胞就是一个不良导体,细胞越大,阻抗信号越大,阻抗信号反映细胞得大小信息。SLS(十二烷基磺酸钠)法原理:1,红细胞溶解释放血红蛋白;2,改变血红蛋白结构;3,氧化二价铁为三价铁;4,形成SLS-Hb化合物。SLS-Hb在535nm有最大吸收峰,根据朗伯比尔定律将535nm处SLS-Hb得吸光度换算成血红蛋白浓度。SLS法具有无毒得优点,而且与国际参考方法氰化高铁血红蛋白法具有很好得相关性。XE系列试剂英文名称中文名称作用CELLPACK稀释液RBC/PLT/HGB检测CELLSHEATH鞘流液前鞘流、后鞘流STROMATOLYSER-FB嗜碱通道溶血素溶解出嗜碱细胞以外得白细胞为裸核STROMATOLYSER-4DL白细胞分类溶血素溶解红细;在白细胞膜上打孔STROMATOLYSER-4DS白细胞分类染液核酸染色STROMATOLYSER-NR(溶血素)有核红细胞通道溶血素溶解有核红细胞为裸核STROMATOLYSER-NR(染液)有核红细胞通道染液核酸染色SULFOLYSER红细胞溶血素HGB检测STROMATOLYSER-IMIMI通道溶血素溶解成熟白细胞RETSEARCH(II)(稀释剂)网织红细胞通道稀释液RET检测RETSEARCH(II)(染液)网织红细胞通道染液核酸染色大家有疑问的，可以询问和交流可以互相讨论下，但要小声点白细胞检测原理DIFF通道WBC/BASO通道IMI通道NRBC通道DIFF通道4DL

完全溶解红细胞血小板在白细胞膜上打孔4DS

对核酸染色纵坐标:侧向荧光(SFL)反映核酸含量横坐标:侧向散射光(SSC)反映细胞内容物复杂程度试剂反应(Ⅰ)试剂反应(Ⅱ)试剂反应(Ⅲ)DIFF通道得重要信息异常细胞:幼稚粒细胞、原始细胞、异型淋巴细胞、有核红细胞、疟原虫抗干扰能力强,WBC更加准确:难溶红细胞、聚集血小板、脂质颗粒异型淋巴细胞,原始细胞和幼稚粒细胞异型淋巴细胞:病毒、原虫等刺激下,胞体体增大、胞质增多、嗜碱性增强,细胞核母细胞化。散点图上荧光强度最强幼稚粒细胞:RNA得合成随着细胞得程度而逐渐减少,即细胞越幼稚,RNA越多,散点图上荧光强度越高原始细胞:一般情况下,五种白细胞不能正常分类,时OTHER区域一般为原始细胞幼稚粒细胞异常淋巴嗜酸中性单核淋巴嗜碱疟原虫散点图散点图特征:嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢有核红细胞晚幼红细胞核固缩,细胞简单,因此在淋巴细胞得正下方。难溶红细胞和脂质颗粒、血小板聚集难溶红细胞表现为白细胞群下方有大量散点出现,并且部分显示为淡兰色(和白细胞相同得颜色)脂质颗粒在散点图上表现为胡须状当出现难溶红细胞和脂质颗粒得时候,WBC-BASO受到干扰,不准确。此时WBC-DIFF利用核酸荧光染色技术可以排除这些干扰,因此比较准确聚集得血小板在两个通道内都显示在GOHST区域,不会影响WBCWBC/BASO通道STROMATOLYSER-FB

完全溶解红细胞血小板除嗜碱细胞以外得白细胞溶解为裸核嗜碱细胞保持原状纵坐标:前向散射光(FSC)反映细胞大小横坐标:侧向散射光(SSC)反映细胞内容物复杂程度嗜碱其他白细胞IMI(Theimmaturemyeloidinformation)通道STROMATOLYSER-IM

溶解红细胞血小板、成熟白细胞粒系幼稚细胞保持原状纵坐标:射频(RF)反映细胞密度横坐标:直流电(DC)反映细胞大小中幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞杆核红细胞检测原理RBC/PLT通道RET通道NRBC通道RBC/PLT通道双鞘流阻抗法浮动界标RDW-SD

假设峰值高度为100%,在20%频率水平上得分布宽度即为RDW-SD。单位用fL表示。RDW-CV

点L1和L2在总分布区域中得出现频率为68、26%,使用下列方程计算

RDW-CV=(L2-L1)/(L2+L1)RET/PLT-O通道RETSEARCH(II)稀释剂稀释标本RETSEARCH(II)染液对核酸染色纵坐标:前向散射光(FSC)反映细胞大小横坐标:侧向荧光(SFL)反映核酸含量LFRMFRHFRWBCRBCPLT疟原虫核酸含量略少于低荧光强度得网织红细胞NRBC通道NR溶血素完全溶解红细胞血小板白细胞保持原状有核红细胞溶解为裸核NR染液对核酸染色纵坐标:前向散射光(FSC)反映细胞大小横坐标:侧向荧光(SFL)反映核酸含量NRBCWBC修正WBCEoBaMoNeLyNRBCNRBC扣除扣除修正WBC修正分类扣除血小板检测原理RBC/PLT通道RET通道RBC/PLT通道双鞘流阻抗法浮动界标PDW

假设峰值高度为100%,在20%频率水平上得分布宽度即为PDW。单位用fL表示。P-LCR

由12fL界标得到得巨型血小板得比值。计算时,将固定界标与高界标之间得粒子数,同低界标与高界标之间得粒子数相比而得到一个比值。RET/PLT-O通道PLT-I,低可信度PLT-O,低可信度PLT计数无效PLT-I报告PLT-O报告NoNoYesYesPLT-I向PLT-O转换规则PLT-I,低可信度PLT-O,低可信度PLT计数无效PLT-I报告PLT-O报告NoNoYesYesPLT-I由PLT直方图获得PLT-O由RET散点图获得(2)PL(%)>9%(3)PU(%)>39%(4)PU<23fLandPU>20%(1)RL(%)>10%(5)出现“Fragments?”报警(6)出现“RBCAgglutination?”报警(7)PU%>13%andPLT35fL>45%andPLT-I#>=80x109/L(8)PLT-I<50x109/L(9)PLT-I/PLT-O>115%如果WBC碎片在PLT-O计数中出现,PLT计数无效:PLT“----”报警原理复检规则SuspectabnormalIP信息得来源散点图直方图SFLSSCFSCSSCRFDCFSCSFLFSCSFLDIFFWBC/BAIMINRBCWBC报警怀疑/异常RETRBC_DCRBC/RET报警怀疑/异常DIFFPLT_DCRBC_DCIMIRET(Plt-O)PLT报警怀疑/异常IP信息解释白细胞<Abnormal>报警项目中文信息来源WBCAbnScattergramNRBCAbnScattergramNeutropeniaNeutrophiliaLymphopeniaLymphocytosisMonocytosisEosinophiliaBasophiliaLeukocytopeniaLeukocytosisNRBCpresent白细胞散点图异常有核红细胞散点图异常中性粒细胞减少中性粒细胞增多淋巴细胞减少淋巴细胞增多单核细胞增多嗜酸细胞增多嗜碱细胞增多白细胞总数减少白细胞总数增多出现有核红细胞DIFF/BASO散点图NRBC散点图NEUT#<1、00x109/L(or%setting)NEUT#>11、00x109/L(or%setting)LYMPH#<0、80x109/L(or%setting)LYMPH#>4、00x109/L(or%setting)MONO#>1、00x109/L(or%setting)EO#>0、70x109/L(or%setting)BASO#>0、20x109/L(or%setting)WBC<2、50x109/LWBC>18、00x109/LNRBC%>2%Ne/EoLy/Ne2Lym/GstLy/Mo2Ly/Mo2Ly/BaMo/Ne1Ne/GstMo/Eo白细胞散点图异常细胞族群之间边界不清边界颗粒达到一定数量触发规则Gst/NLMEBas/NLMENLME:不包括BASO有核红细胞散点图异常NRBCWBCGOST1Pltclumps细胞族群之间边界不清边界颗粒达到一定数量触发规则IP信息解释白细胞<Suspect>报警项目中文信息来源Blasts?ImmatureGran?LeftShift?AtypicalLympho?AbnLympho/L-Blasts?NRBC?RBCLyseresistance?原始细胞？幼稚粒细胞？核左移？异型淋巴细胞？异常淋巴/原始淋巴细胞？有核红细胞？红细胞溶解不全？DIFF,IMI散点图DIFF,IMI散点图DIFF,IMI散点图DIFF,IMI散点图DIFF,IMI散点图DIFF散点图DIFF,WBC/BASO散点图原始细胞？触发规则:在散点图上特定得区域,散点达到一定数量。原始细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞杆核幼稚粒细胞？触发规则:在散点图上特定得区域,散点达到一定数量。幼稚粒细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞杆核核左移？触发规则:在散点图上特定得区域,散点达到一定数量杆核中幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞杆核异型淋巴细胞？触发规则:在DIFF散点图上特定得区域,散点达到一定数量and

在IMI通道IG和BLAST区域无散点异型淋巴细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞杆核异常淋巴/原始淋巴细胞？触发规则:在DIFF散点图上特定得区域,散点达到一定数量and在IMI通道IG和BLAST区域无散点异常淋巴中幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞杆核有核红细胞？触发规则:在DIFF散点图上特定得区域,散点达到一定数量有核红细胞红细胞溶解不全？触发规则:在DIFF散点图上特定得区域,散点达到一定数量orWBC-BASO/WBC-DIFF比例大于阈值难溶红细胞WBC-BASOWBC-DIFFIP信息解释红细胞<Abnormal>报警项目中文信息来源RBCAbnDistributionDimorphicPopulationRETAbnScattergramReticulocytosisAnisocytosisMicrocytosisMacrocytosisHypochromiaAnemiaErythrocytosis红细胞分布异常双峰网织红细胞散点图异常网织红细胞增多红细胞大小不均小红细胞症巨红细胞症血红蛋白减少贫血红细胞增多红细胞直方图红细胞直方图RET散点图RET%>0、05orRET#>200x109/LRDW-SD>65fLorRDW-CV>0、20MCV<70fLMCV>110fLMCHC<290g/LHGB<100g/LRBC>6、50x1012/L红细胞分布异常触发规则:

RL(%)>10%orRU(%)>5%orRDW-SD无法计算or多峰or

RU<225fl或WBC#>50x109/L双峰触发规则:红细胞直方图不止出现一个峰

RBC100200250fl100%5%RLRU100200250fl100%20%RLRUSL网织红细胞散点图异常触发规则:

RET_UPP区域,散点达到一定数量orRET_THR-H区域,散点达到一定数量UPP交界区域有核红细胞IP信息解释

红细胞<Suspect>报警项目中文信息来源RBCAgglutination?Turbidity/HGBInterference?IronDeficiency?HGBDefect?Fragments?红细胞聚集?脂血干扰血红蛋白?缺铁?血红蛋白减低?红细胞碎片?MCHC、MCH、RBC直方图MCHC>365g/LMCHC,MCV,RDW-CVRDW-CV<15%&MCV<75flRET散点图、血小板红细胞直方图红细胞聚集?触发规则:MCHC>40、0g/dL&

MCH>40pg&RBC<3、50x1012/LorMCHC>40、0g/dL&MCH>40pg&RU%>4%缺铁?触发规则: