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沙枣论文:新疆沙枣多糖的提取、分离纯化的研究【中文摘要】多糖(polysaccharide)是由多个单糖分子缩合、失水而成,是一类分子机构复杂且庞大的糖类物质。凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均称为多糖。多糖在自然界分布极广,也非常重要。多糖具有特殊的生物活性,在人体中具有抗病毒、抗感染、抗放射等多种生物学功能。新疆种植沙枣面积广泛,因此从新疆沙枣中提取多糖在经济以及减少资源损失上都有广泛的开发前景。本文以新疆沙枣为原料,通过常规热水提取、超声波辅助提取和微波辅助提取三种方法,进行正交试验,得出最优提取工艺。并采用乙醇沉淀,正丁醇、三氯乙酸以及正丁醇-三氯乙酸法去蛋白,以及DEAE-52柱层析对多糖进行分离纯化,HPLC和SephadexG-100凝胶柱层析证实为单一组分。研究结果表明:1.传统热水法提取沙枣多糖的最佳工艺为提取温度80℃,提取时间1h,水料比35:1,提取2次,提取率为5.1%。微波辅助提取沙枣多糖的最佳工艺为微波功率450W,微波处理时间2.5min,水料比25:1,提取率为8.9%。超声波辅助提取沙枣多糖的最佳工艺为超声波功率120W,超声时间40min,温度40℃,料液比40:1,提取率为7.5%。综合分析各种因素,微波辅助提取为最优提取方法。2.沙枣多糖的粗提物经醇沉后,采用正丁醇、三氯乙酸以及正丁醇-三氯乙酸法去蛋白,并对其三种方法的去蛋白效果进行比较,结果表明:采用正丁醇-20%三氯乙酸法去蛋白的效果最佳,其多糖损失率和蛋白去除率都在理想范围内,多糖损失率为35.23%,蛋白质去除率为13.23%。3.经去蛋白并透析后的多糖溶液过DEAE-52柱层析纯化后,得到两种多糖(XM1和XM2),经HPLC和SephadexG-100凝胶柱层析证实其均为单一组分。【英文摘要】Polysaccharideisakindofhighmoleculecompound,whichiscomprehensivedistributinginnature.Polysaccharidesisnotonlytheenergyresourceorfabricmaterials,butalsoithastheinformationalfunctionthatcancomparewithnucleicacidandprotein,italsohasthebiologicalfunctionthatparticipateineverylifeactivity,antivirus,antinfection,resistradiationandsoon.Theangustifoliahaslargegrowareainsinkiang,soextractedPolysaccharidesfromoleasterhasextensiveexploderforegroundbasedoneconomyanddecreasetheresourcelosing.Inthispaper,theangustifoliaisproducedinsinkiang.Themainresearchobjectistoresearchseveralmethodsofextractingangustifoliapolysaccharide.Usingthetraditionalhotwaterextraction,microwave-assistedextractionmethod,ultrasound-assistedextractionmethod,respectivelyorthogonaltest,istofingtheoptimumextraction.Theextractingofpolysaccharidesfromangustifoliawasprecipitatedbyethanol.Polysaccharideispurifiedbyn-butanol,20%trichloroacetic,n-butanol-20%trichloroaceticmethodtoremoveprotein,andthenfollowedbyDEAE-52columnchromatography.PolysaccharideisshowntobeasinglehomogeneouscomponentbyHPLCandSephadexG-100columnchromatography.theantoxidationactivitiesofpolysaccharidesisstudied.Theresultsshowedthat:1.Traditionalhotwaterextractionofpolysaccharideoptimumconditionsareasfollows:extractiontemperature80℃,extractiontime1h,water:angustifolia=35:1,Extractiontimes2.Theextractionrateis5.1%.Microwave-assistedextractionofAngustifoliapolysaccharideoptimumconditionsareasfollows:Extractingpower450W,extractiontime2.5min,water:angustifolia=25:1,Theextractionrateis8.98%.Ultrasonicextractionauxiliaryangustifoliapolysaccharideoptimumconditionsareasfollows:Ultrasonicpower120W,extractiontime40min,extractiontemperature40℃,water:angustifolia=40:1,Theextractionrateis7.5%.Consideringvariousfactors,microwave-assistedextractionistheoptimalextractionmethod.2.Theextractingofpolysaccharidesfromangustifoliawereprecipitatedbyethanol.Polysaccharideispurifiedbyn-butanol,20%trichloroacetic,n-butanol-20%trichloroaceticmethodtoremoveprotein,andcomparedwiththisthreemethods.Theresultsshowedthat:itisthebestwaytoremoveproteinfromPolysaccharideusingn-butanol-20%trichloroaceticmethod,thepolysaccharideslosingrateis35.23%andtheproteinremovedrateis13.23%.3.ThepolysaccharidesthathasbeenremovedproteinfollowedbyDEAE-52columnchromatography,andweobtainedtwokindsofpolysaccharides.AndtheyareshowntobetwosinglehomogeneouscomponentsbyHPLCandSephadexG-100columnchromatography.【关键词】沙枣多糖提取分离纯化【英文关键词】angustifoliapolysaccharideextractionseparationandpurification【目录】新疆沙枣多糖的提取、分离纯化的研究
摘要
5-6
ABSTRACT
6
第一章文献综述
9-20
1.1沙枣概述
9-11
1.1.1沙枣简介
9
1.1.2沙枣中营养成分的研究
9-10
1.1.3沙枣的加工现状
10-11
1.2多糖的研究概况
11-12
1.3植物多糖的研究现状
12-18
1.3.1植物多糖的提取方法
12-14
1.3.2植物多糖的分离与纯化工艺
14-16
1.3.3植物多糖的纯度鉴定与分子量检测
16
1.3.4植物多糖的生物活性研究
16-18
1.4立题意义、研究内容及创新点
18-20
1.4.1立题意义
18-19
1.4.2研究内容
19
1.4.3技术路线
19-20
第二章沙枣中多糖的提取技术研究
20-33
2.1材料与方法
20-22
2.1.1材料和设备
20
2.1.2实验方法
20-22
2.2结果与分析
22-31
2.2.1原料的预处理
22
2.2.2提取溶剂的选择
22-23
2.2.3还原糖的测定
23-24
2.2.4多糖的测定
24
2.2.5常规热水提取多糖的研究
24-26
2.2.6微波辅助提取法
26-29
2.2.7超声波辅助提取法
29-31
2.3沙枣多糖的纯度
31-32
2.4三种提取方法的比较
32
2.5小结
32-33
第三章沙枣多糖分离纯化工艺的研究
33-43
3.1材料与方法
33-37
3.1.1材料和设备
33
3.1.2实验方法
33-37
3.2结果与分析
37-42
3.2.1蛋白含量的测定
37
3.2.2脱蛋白方法的比较
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