江苏吴江青云中学2025届高三第二次联考生物试卷含解析

江苏吴江青云中学2025届高三第二次联考生物试卷注意事项:1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在条形码区域内。2．答题时请按要求用笔。3．请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试卷上答题无效。4．作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。5．保持卡面清洁，不要折暴、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．某种植物（2n=40）为XY型性别决定的生物，等位基因B和b位于X染色体上，分别控制阔叶（B）和细叶（b）。用阔叶雄株和杂合阔叶雌株进行杂交得到子一代，再让子一代相互杂交得到子二代，子二代的表现型及比例为：阔叶雌株：阔叶雄株：细叶雄株=2：3：1。根据上述杂交实验结果推断，下列叙述错误的是（）A．子二代中出现上述比例的原因可能是含有Xb的花粉不育B．子二代相互杂交得到的子三代中细叶植株所占比例为1/14C．若对该种植物基因组测序应测定21条染色体上的碱基对序列D．该种植物与叶型有关的基因型共有5种2．若马的毛色受常染色体上一对等位基因控制，棕色马与白色马交配，均为淡棕色马，随机交配，中棕色马：淡棕色马：白色马=1：2：1。下列叙述正确的是A．马的毛色性状中，棕色对白色为完全显性B．中出现棕色、淡棕色和白色是基因重组的结果C．中相同毛色的雌雄马交配，其子代中雌性棕色马所占的比例为3/8D．中淡棕色马与棕色马交配，其子代基因型的比例与表现型的比例相同3．核膜上有核孔，核孔构造复杂，与核纤层（组分为核纤层蛋白，存在于内层核膜内侧）紧密结合，成为核孔复合体。核孔复合体在核内外的物质转运中起重要作用，以下说法正确的是（）A．核纤层蛋白是在细胞核内合成的B．不同类型的细胞中核孔数量都相同C．DNA聚合酶和RNA聚合酶都可以通过核孔进入细胞核D．如果某个细胞表达了核纤层蛋白基因，那么它一定已经完成了细胞分化4．下列有关生命现象的解释，错误的是A．鱼在夏季的黎明时分常常浮头，原因是黎明时分水中溶解氧不足B．微生物难以在腌制的肉上繁殖，原因是死亡的肌细胞不能为微生物提供养分C．带芽插条比无芽插条容易生根，原因是插条上的芽能够产生生长素D．破伤风杆菌易在锈钉扎过的伤口深处繁殖，原因是伤口深处氧气缺乏5．图为物质进出细胞的两种方式，有关该图的叙述正确的是（）A．Ⅰ和Ⅱ分別表示协助扩散和主动运输B．Ⅰ和Ⅱ分别表示胞吞作用和胞吐作用C．葡萄糖、性激素是以Ⅱ方式进入细胞的D．水、二氧化碳、氧气是以Ⅰ方式进入细胞的6．鸡的性别决定方式为ZW型，羽色芦花（B）对非芦花（b）为显性，基因B/b位于Z染色体上。基因D能抑制色素的合成，当基因D存在时表现为非芦花，基因d没有此效应。两只纯合的非芦花鸡交配，F1全为非芦花鸡。F1的雌雄鸡自由交配，F2中芦花鸡占3/16。下列有关叙述错误的是（）A．亲本非芦花鸡的基因型为DDZBZB、ddZbWB．F1雌雄非芦花鸡共产生6种基因型的配子C．F2的芦花鸡中，雄鸡：雌鸡=2：1D．F2的非芦花鸡中，雄鸡：雌鸡=7：67．现代生物技术是在分子生物学基础上建立的创建新的生物类型或新生物机能的实用技术，是现代生物科学和工程技术相结合的产物。下列有关现代生物技术的叙述，正确的是（）A．植物体细胞杂交和动物细胞融合都利用了细胞的全能性B．转基因羊和克隆羊多利的培育都克服了远缘杂交不亲和的障碍C．试管牛和试管苗的培育过程中，都需要改变培育环境D．脱毒草莓和转基因抗病毒草莓的培育都发生了基因重组8．（10分）衰老人体通常会出现白发、老年斑、细胞数目减少等特征。叙述正确的是（）A．人体衰老是因为体内大多数细胞的基因发生突变B．老年人骨折后愈合得很慢，与成骨细胞的衰老有关C．细胞中的酪氨酸酶活性升高会导致老年人的头发变白D．老年斑的形成是因为黑色素随皮肤细胞衰老而逐渐积累二、非选择题9．（10分）果蝇(2n=8)的精原细胞要经过精确的四次有丝分裂之后，方能启动减数分裂形成初级精母细胞。科研团队致力于研究有丝分裂向减数分裂转化的调控机制，用EMS诱变筛选，发现一株果蝇tut突变体，其精原细胞不能停止有丝分裂，而出现精原细胞过度增殖的表现型。（1）显微观察野生型果蝇精巢，发现有15%的细胞是16条染色体、55%的细胞是8条染色体、30%的细胞是4条染色体。细胞中_________条染色体的出现可能与减数分裂有关。（2）为探究tut突变体的遗传特性，研究人员做了杂交实验，结果如下。根据杂交实验结果可知，___为隐性性状。推测它们的遗传遵循基因的_________定律。若F1与tut突变体杂交后代的性状及其分离比为__________，则说明上述推测正确。（3）经过文献查阅，发现已报道有bgcn突变体与tut突变体性状一样，研究人员为探究tut突变体的突变基因是否就是bgcn突变体的突变基因，做了如下实验：实验结果表明：___________，理由是_____________________________________。（4）研究人员采用缺失定位法对tut突变体的突变基因进行定位：将一株一条染色体缺失某片段的果蝇(缺失突变体)与tut突变体杂交，如果F1表现型会出现过度增殖，则说明____________________。研究人员将tut突变体与一系列缺失突变体果蝇做杂交，发现tut突变体与编号为BL7591、BL24400、BL26830、BL8065的果蝇缺失突变体杂交后代表型均有过度增殖，tut突变体的突变基因应该位于这些染色体缺失区域的_______(交集/并集)区域。10．（14分）某XY型性别决定且雌雄易辨的昆虫，其眼色受性染色体上的等位基因B和b控制。将多只红眼雄性昆虫与多只红眼雌性昆虫（基因型相同）随机交配，子一代中：雄性昆虫全为红眼，雌性昆虫中红眼：白眼=3：1；让子一代红眼的雌雄昆虫随机交配，子二代中：雄性昆虫全为红眼，雌性昆虫中红眼：白眼=5：1（随机交配中，每对昆虫产生的后代数目相等，无致死和变异发生）。请回答下列问题：（1）亲代红眼雄性昆虫的基因型有________种，子一代中红眼雄性昆虫的基因型为__________。（2）让子一代雌雄昆虫随机交配，子二代昆虫的表现型及比例为________。（3）现有多种眼色基因型纯合的昆虫若干，根据需要从中选择亲本，通过两代杂交，使最终获得的后代昆虫中，雌性全部表现为白眼，雄性全部表现为红眼，应如何进行实验_____？请简要写出实验思路。11．（14分）癌细胞表面蛋白“PDL-1”与T细胞表面蛋白“PD-1”特异性结合后，可抑制T细胞活性并启动其凋亡，导致肿瘤细胞发生免疫“逃逸”。研究者对“PD-1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定，为制备抗体打基础。研究中所用引物α和β碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2：α链：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β链：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'图1（1）首先提取细胞中的mRNA反转录生成____________________作为模板；设计含有不同的限制酶切点的α和β序列为引物，通过____________________技术扩增目的基因。（2）选用图1中的两种名称分别为____________________的限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建表达载体。该表达载体的组成，除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外，还必须具有____________________等。（3）而后一定温度下，与经过处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有_____________培养基中，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌，继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。（4）将扩增后的“pIRES2-EGFP载体/PD-1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，检测细胞膜表面是否具有____________________。为判断其是否具有生物学活性和功能，则可裂解293T细胞，提取该物质看能否与____________________发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。研究中还会有一步骤，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，其目的是_________________________。12．某XY型性别决定的植物，其花色有紫花、红花和白花，且受两对等位基因控制(相关基因用A/a、B/b表示，考虑X、Y染色体的同源区段)，A和B同时存在时为紫花，无B但有A时表现为红花，无A时表现为白花。现有两个纯合品系甲、乙，甲表现为紫花，乙表现为白花，每个品系中都有雌株雄株。某人用一株甲品系的雌株与另一株乙品系的雄株进行杂交实验，F1无论雌雄都是紫花，让F1雌雄株随机交配，统计F2的表现型及比例为紫花∶红花∶白花=9∶3∶4，且开红花的只有雄株，其他花色雌雄株都有。（不考虑其他变异）回答下列问题：（1）某同学认为这两对基因的遗传遵循基因的自由组合定律，其判断依据是________________。（2）经分析，对于A/a、B/b所在染色体的合理假设是：A/a位于_____________、B/b位于___________；根据假设，该植物自然种群中关于花色的基因型有________种。（3）现已证明A/a位于常染色体上，请根据已有的实验材料，进一步设计最简单的实验证明B/b所在染色体的假设的合理性(要求写出杂交方案、预期实验结果及结论)。杂交方案：____________________________________预期结果及结论：____________________________

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、D【解析】

根据题意分析可知：用阔叶雄株（XBY）与杂合阔叶雌株（XBXb）杂交得到子一代，子一代的基因型有XBXB、XBXb、XBY和XbY，子二代没有出现细叶雌株（XbXb），但有细叶雄株（XbY），可能是含有Xb的花粉不育，使子二代中阔叶雌株（XBXB、XBXb）：阔叶雄株（XBY）：细叶雄株（XbY）=（3/4×1/3+1/4×1/3）：（3/4×2/3）：（1/4×2/3）=2：3：1，据此答题。【详解】A、据上分析可知，子二代中出现上述比例的原因可能是含有Xb的花粉不育，A正确；B、据上分析可知，子二代中雌：雄=1：2，雌配子中XB：Xb=3：1，雄配子中XB：Xb（不育）：Y=3：1：4，故子三代中细叶植株（XbY）所占比例=1/2×1/4×4/7=1/14，B正确。C、若对该种植物基因组测序应测定19条常染色体+X+Y=21条染色体上的碱基对序列，C正确；D、因含有Xb的花粉不育，故不存在XbXb基因型，该种植物与叶型有关的基因型有XBXB、XBXb、XBY和XbY共4种，D错误。故选D。2、D【解析】

分析题中信息：“棕色马与白色马交配，均为淡棕色马，随机交配，中棕色马：淡棕色马：白色马=1：2：1。”可知马的毛色的控制属于不完全显性。【详解】A、马的毛色性状中，棕色对白色为不完全显性，A错误；B、中出现棕色、淡棕色和白色是基因分离的结果，B错误；C、中相同毛色的雌雄马交配，其子代中棕色马所占的比例为1/4+2/4×1/4=3/8，雌性棕色马所占的比例为3/16，C错误；D、中淡棕色马与棕色马交配，其子代基因型的比例为1:1，,表现型为淡棕色马与棕色马，比例为1:1，D正确。故选D。【点睛】一对等位基因的遗传遵循基因分离定律，根据题中信息可知，马毛色遗传属于不完全显性，然后再依据基因分离定律写出每种表现型对应的基因型，即可得出准确答案。3、C【解析】

1、细胞核的结构：核膜（双层膜，上面有孔是蛋白质和RNA通过的地方）、核仁（与某些RNA的合成以及核糖体的形成有关）、染色质。2、细胞核的功能：细胞核是遗传物质贮存和复制的场所，是细胞遗传和代谢的控制中心。【详解】A、核纤层蛋白是在核糖体上合成的，A错误；B、不同类型的细胞功能不同，核质之间的物质交换频率也不同，核孔数量不相同，B错误；C、核孔复合体是蛋白质、RNA等大分子出入细胞核的通道，所以DNA聚合酶和RNA聚合酶可以通过核孔进入细胞核，C正确；D、如果某个细胞表达了核纤层蛋白基因，只能说明细胞核结构已形成，但不能说明已经完成了细胞分化，D错误。故选C。4、B【解析】在夏季的黎明时因为水中的溶解氧比较低，所以鱼在此时常常浮头，A正确。微生物难以在腌制的肉上繁殖，原因是腌制时的外界溶液渗透压很高导致微生物失水而死亡，B错误。带芽插条比无芽插条容易生根，原因是插条上的芽能够产生生长素，而生长素能促进插条生根，C正确。破伤风杆菌是厌氧型微生物，所以容易在锈钉扎过的伤口深处繁殖，D正确。5、D【解析】【分析】特点、举例被动运输主动运输自由扩散协助扩散运输方向（逆、顺浓度梯度）高浓度→低浓度高浓度→低浓度低浓度→高浓度是否需要载体不需要不需要需要是否消耗细胞的代谢的能量不需要不需要需要代表例子水、氧气、二氧化碳、甘油、乙醇等葡萄糖通过红细胞等Na+、K+等离子通过细胞膜；葡萄糖、氨基酸通过小肠上皮细胞题图分析：Ⅰ是高浓度运输到低浓度，不需要载体和能量，属于自由扩散，Ⅱ是从低浓度一侧运输到高浓度一侧，是需要载体和能量，属于主动运输。【详解】A、Ⅰ和Ⅱ分别表示自由扩散和主动运输，A错误；B、有分析可知，Ⅰ和Ⅱ分别表示自由扩散和主动运输，故Ⅰ和Ⅱ不能表示胞吞作用和胞吐作用，B错误；C、性激素属于固醇，以Ⅰ自由扩散的方式进入细胞的，而葡萄糖主要以Ⅱ主动运输方式进入细胞内，C错误；D、水、二氧化碳、氧气的运输方式是自由扩散，所以是以Ⅰ方式进入细胞的，D正确。故选D。6、D【解析】

分析题意可知，鸡的性别决定方式为ZW型，即雌鸡的染色体为ZW，雄鸡的染色体为ZZ，题中F1全为非芦花鸡，且F1的雌雄鸡自由交配后代中出现芦花鸡，可推断基因D/d位于常染色体上。故芦花鸡的基因型为ddZBZ-和ddZBW。【详解】A、①若亲本非芦花鸡的基因型为DDZBZB、ddZbW，F1全为非芦花鸡，基因型为DdZBW、DdZBZb，可推后代芦花鸡的比例为1/4×（1/4+1/2）=3/16符合题意；②若亲本非芦花鸡的基因型为DDZBW、ddZbZb，则F1全为非芦花鸡，基因型为DdZBZb、DdZbW，可推后代芦花鸡的比例为1/4×（1/4+1/4）=1/8与题意不符；故基因型为DDZBZB、ddZbW的亲本基因型满足题意，A正确；B、已知F1基因型为DdZBW、DdZBZb，可产生配子DZB、DW、dZB、dW、DZb、dZb共6种配子，B正确；C、F2的芦花鸡中，基因型有ddZBZB、ddZBZb和ddZBW，各个基因型所占比例均为1/16，故芦花鸡中的雌雄比例为雄鸡：雌鸡=2：1，C正确；D、F2的非芦花雄鸡占F2的雄鸡比例为3/4，F2的非芦花雌鸡占F2的雌鸡比例为7/8，故F2的非芦花鸡中雄鸡：雌鸡=6：7，D错误；故选D。7、C【解析】

植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：项目细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性，（细胞的全能性）去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后，诱导细胞融合离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导制备单克隆抗体的技术之一【详解】A、植物组织培养过程依据的原理是植物细胞具有全能性，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，A错误；B、转基因羊的培育克服了远缘杂交不亲和的障碍，但克隆羊多利并没有克服远源杂交不亲和的障碍，B错误；C、试管牛和试管苗的培育过程中，都需要改变培育环境，C正确；D、利用植物的幼嫩的芽或茎进行植物组织培养技术可以培育脱毒苗，没有发生基因重组；转基因抗病毒草莓先用基因工程技术将抗病毒基因导入植物细胞中，再经过植物组织培养技术的培育获得抗病毒草莓，发生了基因重组，D错误。故选C。8、B【解析】

细胞衰老的特征：（1）细胞内水分减少，结果使细胞萎缩，体积变小，细胞新陈代谢速率减慢；（2）细胞内多种酶的活性降低；（3）细胞内的色素会随着细胞衰老而逐渐累积，它们会妨碍细胞内物质的交流和传递，影响细胞正常的生理功能；（4）细胞内呼吸速度减慢，细胞核的体积增大，核膜内折，染色质收缩，染色加深；（5）细胞膜通透性功能改变，物质运输功能降低。【详解】A、人体衰老是因为体内大多数细胞衰老，这与基因突变无关，A错误；B、老年人骨折后愈合得很慢，与成骨细胞的衰老有关，B正确；C、细胞中的酪氨酸酶活性降低（黑色素合成减少）会导致老年人的头发变白，C错误；D、细胞衰老后，黑色素的合成减少，老年斑的形成是因为色素（如褐色素）随皮肤细胞衰老而逐渐积累，D错误。故选B。【点睛】本题考查细胞衰老的相关知识，要求考生识记衰老细胞的主要特征。二、非选择题9、8和4过度增殖分离正常有丝分裂∶过度增殖=1∶1tut突变体的突变基因与bgcn突变体的突变基因不是同一个基因tut突变体与bgcn突变体杂交，F1为正常表现型，F2性状分离比为9∶7，符合基因自由组合定律，说明这两个突变体的突变基因分别在两对同源染色体上tut突变体的突变基因位于该果蝇的染色体缺失片段交集【解析】

根据题意可知，本研究是探究tut突变体的遗传特性，野生型果蝇和tut突变体杂交，子代可进行正常有丝分裂，说明该突变基因为隐性遗传，并遵循基因的分离定律。bgcn突变体与tut突变体杂交，F2出现两种表现型，且比例为9∶7，说明bgcn突变体的bgcn基因和tut基因分别位于两对同源染色体上，且基因表达互不影响。【详解】（1）含8条染色体的精原细胞经减数分裂形成含4条染色体的细胞；含16条染色体的细胞应处于有丝分裂的后期。（2）F1中雌雄果蝇杂交，F2中正常有丝分裂：过度增殖=3:1，表明过度增殖为隐性性状，且符合基因的分离定律。假设显性基因为A，隐性基因为a，若上述推测正确的话，则F1的基因型为Aa，tut突变体的基因型为aa，则F1与tut突变体杂交后代的性状及其分离比为正常有丝分裂：过度增殖=1:1。（3）据遗传图解可知，tut突变体与bgcn突变体杂交，F1为正常表型，F2性状分离比为9:7，是9:3:3:1的变式，说明符合基因自由组合定律，tut突变体的突变基因与bgcn突变体的突变基因不是同一个基因，且这两个突变体的突变基因分别在两对同源染色体上。（4）若将未突变的果蝇与tut突变体杂交，则F1表型为正常的有丝分裂，但与缺失突变体杂交，F1表型会出现过度增殖，则说明tut突变体的突变基因位于该果蝇的染色体缺失片段。tut突变体与一系列缺失突变体果蝇做杂交，发现tut突变体与编号为BL7591、BL24400、BL26830、BL8065的果蝇缺失突变体杂交后代表型均有过度增殖，tut突变体的突变基因应该位于染色体缺失区域的交集区域。【点睛】如果两对等位基因位于两对同源染色体上，那么双杂合个体自交，后代会出现9：3：3：1的比例，如果两对等位基因位于一对同源染色体上，那么双杂合个体自交，后代不会出现9：3：3：1的比例。有时考查的是基因自由组合定律的变式，比如本题中的9：7。10、2XBYB和XbYB红眼雄性：红眼雌性：白眼雌性=4：3：1选取（纯合）白眼雌性昆虫与（纯合）红眼雄性昆虫杂交获得子一代昆虫，再将子一代雄性昆虫与纯合的白眼雌性昆虫杂交，子二代中，雌性昆虫全为白眼，雄性昆虫全为红眼【解析】

由题干分析，假设控制眼色的基因只位于X染色体上，子一代红眼的雌雄昆虫随机交配，子二代雄性昆虫全为红眼，则F1雌性基因型为XBXB，雄性基因型为XBY，F2中雌性中不可能出现白眼，故控制眼色的基因不可能只位于X染色体上，也不可能只位于Y染色体上。因此，控制眼色的基因位于XY的同源区段。【详解】（1）由题干雄性全为红眼，无白眼可知，Y染色体上有B基因。由于F1雌性昆虫中红眼：白眼=3：1，则亲代雄性有2种基因型XBYB、XbYB，亲代雌性基因型为XBXb，F1红眼雄性昆虫的基因型为XBYB和XbYB。（2）亲代雄性基因型XBYB∶XbYB=1∶1，亲代雌性基因型为XBXb，杂交时，雄性产生三种配子XB∶Xb∶YB=1∶1∶2，雌性产生两种配子XB∶Xb=1∶1，亲代随机交配后，F1雄性基因型XBYB∶XbYB=1∶1，F1雌性基因型XBXB∶XBXb∶XbXb=1∶2∶1。F1雌雄昆虫随机交配，F1雄性产生三种配子XB∶Xb∶YB=1∶1∶2，F1雌性产生两种配子XB∶Xb=1∶1，随机结合，F2昆虫的基因型及比例为XBYB∶XbYB∶XBXB∶XBXb∶XbXb=2∶2∶1∶2∶1，即F2昆虫的表现型及比例为红眼雄性：红眼雌性：白眼雌性=4：3：1。（3）若子二代中雌性昆虫全为白眼，雄性昆虫全为红眼，则上一代中雌性应全为白眼，雄性应为XbYB，要得到XbYB的雄性，可选取白眼雌性昆虫与纯合红眼雄性昆虫杂交。【点睛】答题的关键是判断基因在染色体的位置，难点在于根据题干推断出基因位于XY的同源区段，并且亲代雄性不只一种基因型。11、cDNAPCRXhoIEoRI启动子、终止子、复制原点卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗体作为对照【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因采用DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA采用分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质采用抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）基因文库包括基因组文库和部分基因文库（cDNA）。其中基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库只包含某种生物的部分基因，可以mRNA为模板反转录形成cDNA；由于PCR技术利用的是DNA分子复制的原理，所以用该cDNA进行PCR技术扩增短时间内可以获得大量的目的基因。（2）分析图1中碱基序列，α链上有“—CTCGAC—”识别序列，β链上有“—GAATTC—”碱基识别序列，与图2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的识别序列相同。故选用XhoI限制酶和EoRI限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建基因表达载体。基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点等。（3）根据第（2）题可知，基因表达载体上的标记基因是卡那霉素抗性基因，因此一定温度下，与经过Ca2+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有卡那霉素的培养基，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌。（4）基因表达的产物是蛋白质，一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，可以检测细胞膜表面是否具有PD-1基因表达的PD-1蛋白。为判断其是否具有生物学活性和功能，可采用抗原—抗体杂交技术，即从裂解293T细胞中，提取PD-1蛋白看能否与PDL-1发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。为了增加实验的可信度，还需要设置对照实验，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，因为不含PD-1基因，所以“PD-1与PDL-1信号通路”不会阻断。【点睛】题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识在新的情景材料下分析运用。12、F2的表现型及比例为紫花：红花：白花9：3：4为9：3：3：1的变式常染色体上X染色体上或者位于X染色体和Y染色体的同源区段15或21选择甲品系的雄株与多株乙品系的雌株进行杂交，单独统计每个杂交组合中F1的表现型若子一代中出现红花雄株，则B/b只位于X染色体上；若所有杂交组合的子一代全部为紫花，则B/b位于X染色体和Y染色体的同源区段【解析】

A和B同时存在时为紫花，无B但有A时表现为红花，无A时表现为白花，可以判定A_B_为紫花，A_bb为红花，aaB_和aabb为白花；F2的表现型及比例为紫花∶红花∶白花=9∶3∶4，且开红花的只