药物分析胺类药物的分析

药物分析胺类药物的分析盐酸丁卡因盐酸普鲁卡因胺苯佐卡因非那西丁(对乙酰氨基苯乙醚)对乙酰氨基酚(扑热息痛)醋氨苯砜芳酰胺类药物盐酸利多卡因盐酸布比卡因一、结构与性质(一)芳伯氨基或潜在芳伯氨基特性具有芳伯氨基或潜在得芳伯氨基,可用重氮化—偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量,可与芳醛发生缩合反应,易氧化变色。(二)水解特性酯键或酰胺键易水解(三)弱碱性具脂烃胺侧链,弱碱性,可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。(四)溶解性游离碱易溶于有机溶剂,其盐可溶于水。(五)酚羟基特性对乙酰氨基酚(FeCl3)。(六)与重金属离子发生沉淀反应盐酸利多卡因和盐酸布比卡因酰氨基上得氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合,生成有色得配位化合物沉淀。此沉淀可溶于氯仿等有机溶剂后呈色。(七)UV(八)IR二、鉴别试验

(一)重氮化—偶合反应

芳香第一胺类鉴别反应

直接:盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、间接:对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、盐酸普鲁卡因ChP(2000)[鉴别](1)本品显芳香第一胺类得鉴别反应(附录Ⅲ)取供试品约50mg,加稀盐酸1m1,必要时缓缓煮沸使溶解,放冷,加0、1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴,滴加碱性β-萘酚试液数滴,视供试品不同,生成由橙黄到猩红色沉淀。

对乙酰氨基酚ChP(2000)[鉴别](2)取本品约0、1g,加稀盐酸5m1,置水浴中加热40分钟,放冷;取0、5m1,滴加亚硝酸钠试液5滴,摇匀,用水3ml稀释后,加碱性β-萘酚试液2m1,振摇,即显红色。(二)三氯化铁反应对乙酰氨基酚(三)与重金属离子反应1、与铜和钴离子反应

2、与汞离子得反应

(四)水解产物得反应

1、盐酸普鲁卡因ChP(2000)[鉴别](2)取本品约0、1g,加水2ml溶解后,加10％氢氧化钠溶液1ml,即生成白色沉淀;加热,变为油状物;继续加热,产生得蒸气,能使湿润得红色石蕊试纸变为蓝色;热至油状物消失后,放冷,加盐酸酸化,即析出白色沉淀。

12大家应该也有点累了，稍作休息大家有疑问的，可以询问和交流2、苯佐卡因ChP(2000)[鉴别](2)取本品约0、1g,加氢氧化钠试液5m1,煮沸,即有乙醇生成;加碘试液,加热,即生成黄色沉淀,并发生碘仿得臭气。

(五)制备衍生物测熔点1、三硝基苯酚衍生物

盐酸利多卡因ChP(2000)[鉴别]取本品0、2g,加水20ml溶解。(1)取溶液10ml,加三硝基苯酚试液10ml,即生成沉淀;滤过,沉淀用水洗涤后,干燥,依法测定(附录ⅥC),熔点为228～232℃,熔融时同时分解。盐酸布比卡因ChP(2000)2、硫氰酸盐衍生物

盐酸丁卡因ChP(2000)[鉴别](1)取本品约0、1g,加5%醋酸钠溶液10ml溶解后,加25%硫氰酸铵溶液1ml,即析出白色结晶;滤过,结晶用水洗涤,在80℃干燥,依法测定(附录ⅥC),熔点约为131℃。

盐酸布比卡因ChP(2000)[鉴别](2)取本品,精密称定,按干燥品计算,加0、01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0、40mg得溶液,照分光光度法(附录ⅣA)测定,在263nm与271nm得波长处有最大吸收;其吸收度分别为0、53～0、58与0、43～0、48。(六)UV

(七)IR

盐酸布比卡因ChP(2000)[鉴别](3)本品得红外光吸收图谱与对照得图谱(光谱集324图)一致。三、杂质检查(一)对乙酰氨基酚

1、有关物质杂质来源中间体、副产物及分解产物

对氯乙酰苯胺杂质对照品法

检查方法TLC

其她杂质参比杂质对照品法

2、对氨基酚杂质来源中间体、水解产物反应原理检查方法对照法取本品1、0g,加甲醇溶液(1→2)20ml溶解后,加碱性亚硝基铁氰化钠试液1m1,摇匀,放置30min;如显色,与对乙酰氨基酚对照品1、0g加对氨基酚50

g用同一方法制成得对照液比较,不得更深(0、005％)。2、盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸得检查

检查方法TLC杂质对照品法杂质来源水解产生

精密量取本品,加乙醇稀释使成为每1ml中含盐酸普鲁卡因2、5mg得溶液,作为供试品溶液。取对氨基苯甲酸对照品,加乙醇制成每1ml中含30

g得溶液,作为对照品溶液。取上述两种溶液各10

l,分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂得硅胶H薄层板上,用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇(14∶1∶1∶4)为展开剂,展开后,取出晾干,用对二甲氨基苯甲醛溶液(2％对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml,加冰醋酸5ml制成)喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应得杂质斑点,其颜色与对照品溶液主斑点比较,不得更深。(一)亚硝酸钠滴定法1、原理具芳伯氨基得药物四、含量测定

具游离芳伯氨基得药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基得药物,如具酰胺基药物(对乙酰氨基酚等)经水解,芳香族硝基化合物(如无味氯霉素)经还原,也可用本法测定。

2、主要测定条件(1)加入适量KBr加速反应KBr为催化剂NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O在盐酸存在下,重氮化反应得机理为:(1)K1(2)K2∵K1≈300K2加入KBr,可增大被测溶液中NO+得浓度,所以能加快重氮化反应速度(2)酸得种类及其浓度在不同酸中重氮化反应得速度为:HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3芳胺:盐酸1:2、5～6;加入盐酸:①重氮化反应速度加快;②重氮盐在酸性溶液中稳定;③防止生成偶氮氨基化合物,而影响测定结果(3)室温条件下滴定10～30℃(4)滴定速度:先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3处,滴定液一次大部分放下,近终点时方改为慢速滴定,标准溶液在液面下加入,可避免NaNO2挥发。3、指示终点得方法(1)永停滴定法ChP(2000)、BP(1998)永停滴定法(附录ⅦA)用作重氮化法得终点指示时,调节R1使加于电极上得电压约为50mV。取供试品适量,精密称定,置烧杯中,除另有规定外,可加水40ml与盐酸溶液(1→2)15ml,而后置电磁搅拌器上,搅拌使溶解,再加溴化钾2g,插入铂—铂电极后,将滴定管得尖端插入液面下约2/3处,用亚硝酸钠滴定液(0、1mol/L或0、05mol/L)迅速滴定,随滴随搅拌,至近终点时,将滴定管得尖端提出液面,用少量水淋洗尖端,洗液并入溶液中,继续缓缓滴定,至电流计指针突然偏转,并不再回复,即为滴定终点。(2)外指示剂法KI—淀粉糊剂或试纸2NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O

4、测定方法盐酸普鲁卡因ChP(2000)取本品约0、6g,精密称定,照永停滴定法(附录ⅦA),在15～25℃,用亚硝酸钠滴定液(0、1mol/L)滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液(0、1mol/L)相当于27、28mg得C13H20N2O2·HCl阳极阴极:(三)紫外分光光度法

对乙酰氨基酚在0、4％氢氧化钠溶液中,于257nm波长处有最大吸收,其紫外吸收光谱特征,可用于其原料及其制剂得含量测定。

(二)非水溶液滴定法

脂烃胺侧链,具弱碱性对乙酰氨基酚ChP（2000）取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数为715计算，即得。原料药

吸收系数法

USP(24)对照法

(六)HPLC法

盐酸普鲁卡因注射液ChP(2000)可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸离子抑制色谱法内标法定量97:137、采用亚硝酸钠法测定含量得药物有()A、苯巴比妥B、盐酸丁卡因C、苯佐卡因D、醋氨苯砜E、盐酸去氧肾上腺素

95:85、下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者()A、乙酰水杨酸B、对氨基水杨酸钠C、对乙酰氨基酚D、普鲁卡因E、苯佐卡因

96:81(99:72)、亚硝酸钠滴定法中,加KBr得作用就是()A、添加Br

B、生成NO+·Br

C、生成HBrD、生成Br2E、抑制反应进行例1、ChP(2000)亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠得含量时,指示滴定终点得方法为()A、自身指示终点法B、电位法指示终点C、永停滴定法D、氧化还原指示剂法E、酸碱指示剂法例2、盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时得反应条件就是()A、强酸B、加入适量溴化钾C、室温(10～30℃)下滴定D、滴定管尖端深入液面E、永停法指示终点96:127、亚硝酸钠滴定法中,可用于指示终点得方法有()A、自身指示剂法B、内指示剂法C、永停法D、外指示剂法E、电位法苯乙胺类药物得基本结构*第二节苯乙胺类药物得分析

BenzeneEthylamines常见得苯乙胺类药物盐酸克仑特罗硫酸沙丁胺醇一、结构与性质

1、脂烃胺基侧链,显弱碱性2、酚羟基,易氧化变色,可发生三氯化铁反应3、具手性碳原子,具旋光性4、溶解性游离碱难溶于水,易溶于有机溶剂,其盐可溶于水5、UV6、IR7、取代基:具芳伯氨基得盐酸克仑特罗可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。二、鉴别试验1、三氯化铁反应2、氧化反应3、与甲醛—硫酸反应4、UV与IR5、与亚硝基铁氰化钠反应——脂肪族伯胺得专属反应三、杂质检查

杂质来源原料残存检查方法比较法(含量测定法)(一)酮体得检查

检查原理利用酮体在310nm波长处有最大吸收,而药物本身在此波长处几乎没有吸收,规定一定浓度溶液在310nm波长处得吸收度限制酮体得量。(二)有关物质检查盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇等药物检查方法:TLC(二)溴量法盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺反应摩尔比为1∶6四、含量测定

(一)非水溶液滴定法原料药

脂烃胺基侧链,显弱碱性

(三)比色法盐酸克仑特罗栓具芳伯氨基,可发生重氮化—偶合反应对照法定量

偶合剂N-(1-萘基)-乙二胺遇亚硝酸也能显色,干扰比色测定,所以在重氮化后,应加氨基磺酸铵将剩余得亚硝酸分解除去,再加偶合试剂N-(1-萘基)-乙二胺。

(五)荧光分光光度法λex410nm、λem520nm处测定荧光强度,对照法定量。(六)HPLC法重酒石酸去甲肾上腺素注射液离子对反相高效液相色谱法内标法定量调节溶液pH为3、8,加入离子对试剂十二烷基磺酸钠例1、能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜色