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文档简介
2.2动物细胞工程
一、单选题1.下列关于动物细胞培养所需要条件的叙述,正确的是()A.气体环境中的CO2起刺激细胞呼吸的作用B.培养所需营养物质与植物组织培养的相同C.培养的适宜温度一般与动物的体温相近D.培养适宜pH一般为酸性条件2.动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础技术,该项技术的基本流程如图所示。下列有关分析正确的是()A.传代培养时需要收集细胞,都可以直接利用离心法收集B.过程①③可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理C.细胞培养时,大多数种类的动物细胞可悬浮在培养液中生长增殖D.②④过程所用的培养液中都须加有一定量的血清和动物激素3.阿霉素是一种抗肿瘤抗生素,但其没有特异性,在杀伤肿瘤细胞的同时还会对机体其他细胞造成伤害。构建抗体—药物偶联物(ADC)能对肿瘤细胞进行选择性杀伤,ADC通常由抗体、接头和药物(如阿霉素)三部分组成。下列叙述错误的是()A.将肿瘤抗原注射到小鼠体内,可从其血清中获得单克隆抗体B.ADC中的抗体和阿霉素分别起靶向运输和治疗的作用C.构建抗体—药物偶联物时用到的抗体应为单克隆抗体D.利用同位素标记的单克隆抗体,可定位诊断肿瘤4.科学家以病毒A的外壳蛋白为抗原,制备出了单克隆抗体。下列相关叙述错误的是()A.可利用选择培养基筛选出能产生抗体的杂交瘤细胞B.用病毒A的外壳蛋白对小鼠进行免疫,可获得产生特定抗体的B细胞C.用灭活的病毒诱导获得的融合细胞都具有浆细胞和骨髓瘤细胞的特性D.运用该单克隆抗体可以诊断人体是否感染病毒A5.微囊法是一种动物细胞培养法,其方法是将一定数量的动物细胞封闭在半透膜的微囊中,然后再将这种包含有细胞的微囊悬浮于培养液中培养。培养液中的水和营养物质可透过半透膜进入微囊供应给细胞,细胞的代谢物也可透过半透膜被排出,而细胞分泌的大分子物质则被阻留而积累于囊内。下列说法错误的是()A.微囊悬浮培养能防止培养过程中出现细胞贴壁生长和接触抑制现象B.微囊法培养动物细胞,有利于获得高度纯化的大分子细胞产物C.微囊法培养能保护细胞少受损伤,有利于大规模培养动物细胞D.微囊悬浮培养的细胞会因有害代谢产物的积累等因素而分裂受阻6.已知某动物细胞培养过程中会发生细胞贴壁现象。下列相关叙述正确的是()A.对贴壁细胞进行收集时,可直接采用离心法B.悬浮培养细胞会因细胞密度大等因素使细胞分裂受阻C.动物细胞培养一般采用固体培养基,并维持一定的气体环境D.只有原代培养一传代培养过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理7.细胞培养肉已经获准进入某些国家市场。在细胞水平上,培养肉的成分与动物肉基本相同。通过从幼年动物或受精卵中采集组织样本、分离细胞、在反应器中培养,可获得细胞培养肉。下列相关叙述错误的是()A.在进行细胞培养时可以用胶原蛋白酶处理,使细胞分散开B.悬浮在培养液中生长的动物细胞都会出现细胞贴壁现象C.在反应器中培养细胞时,添加适量的CO2以维持培养液的pHD.细胞培养肉的优点是不需要对动物进行大规模饲养和屠宰8.下列关于单克隆抗体制备的叙述,正确的是()A.动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核膜的融合B.诱导动物细胞融合的特有的方法有PEG融合法和灭活病毒诱导法C.用特定抗原对小鼠进行免疫后,只得到一种B淋巴细胞D.单克隆抗体是单个B淋巴细胞增殖并产生的抗体9.Transwell实验可模拟肿瘤细胞侵袭过程。取用无血清培养液制成的细胞悬液加入上室中,下室为有血清培养液,上下层培养液以一层具有一定孔径的聚碳酸酯膜(膜上铺有基质胶)分隔开,放入培养箱中培养,通过计数下室的细胞量即可反映细胞的侵袭能力。下列说法错误的是()A.进入下室的肿瘤细胞数量越多,说明肿瘤细胞的分裂能力越强B.可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理使肿瘤细胞分散开C.肿瘤细胞可分泌水解酶将基质胶中的成分分解后进入下室D.血清培养液中含有某些因子促使肿瘤细胞向下室移动10.如图为动物细胞培养的基本过程,以下叙述错误的是()A.a中放置的一般是幼龄动物的器官或组织,原因是其细胞分裂能力强B.c过程属于原代培养,d过程属于传代培养C.c、d瓶中的培养液需要加入血清等天然成分D.将培养的细胞置于95%O2和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养二、多选题11.如图表示某学习小组利用正常的小鼠细胞进行动物细胞培养的过程,①~④表示相关过程。下列相关叙述错误的是()A.过程①可以使用机械法或酶解法改变细胞的通透性B.过程②为原代培养,培养细胞1一般会发生接触抑制现象C.培养细胞2需要贴附于基质表面生长,不能直接用离心法进行收集D.进行动物细胞培养的过程中,不会发生基因的选择性表达12.研究人员从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养,在传代后的不同时间点检测细胞数目,其结果如图所示。下列相关叙述正确的是()A.贴壁细胞需要用胰蛋白酶处理,再用离心法收集B.原代和传代细胞都需要放入培养箱中进行培养C.选取②时期的细胞进行传代培养比①时期的更合理D.只要提供适宜的培养条件,该细胞培养将会无限传代三、读图填空题
参考答案1.答案:C解析:A、动物细胞培养时,气体环境中的CO2的作用是调节培养液pH的,A错误;B、动物细胞培养所需营养物质和植物组织培养不同,例如植物组织培养的培养基中含有蔗糖,而动物细胞培养液中含有葡萄糖和动物血清等,B错误;C、动物细胞培养的适宜温度一般应与动物的体温相近,为36.5+0.5℃,C正确;D、动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,D错误。故选C。2.答案:B解析:A、在进行传代培养时,悬浮培养的细胞直接用离心法收集;贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集,A错误;B、过程①是对新鲜取材的动物组织进行处理,或用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间,将组织分散成单个细胞。过程③是进行传代培养时,悬浮培养的细胞直接用离心法收集;贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集,B正确;C、体外培养的动物细胞,大多数需要贴附于某些基质表面才能生长增殖,C错误;D、动物细胞培养所用的培养液中,含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素等,此外还需要添加动物血清,不需要加入劫物激素,D错误。故选B。3.答案:A解析:A、将肿瘤抗原反复注射到小鼠体内,从小鼠的血清中分离出的抗体为血清抗体,单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌的特异性抗体,A错误;B、ADC中的抗体可以和肿瘤细胞特异性结合,靶向运输阿霉素,阿霉素是一种抗肿瘤抗生素,起到治疗作用,B正确;C、构建抗体药物偶联物(ADC)能对肿瘤细胞进行选择性杀伤,ADC中的抗体应为特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体,C正确;D、单克隆抗体特异性强,利用同位素标记的单克隆抗体在特定组织中的成像技术,可定位诊断肿瘤,D正确。故选A。4.答案:C解析:A、可利用选择培养基筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,A正确;B、用病毒A的外壳蛋白对小鼠进行免疫,经过筛选培养及抗体检测,可获得产生特定抗体的B细胞,B正确;C、融合的细胞可能是浆细胞与浆细胞的融合、也可能是骨髓瘤与骨髓瘤细胞的融合,因此不一定都具有浆细胞和骨髓瘤细胞特性,C错误;D、单克隆抗体可制作成诊断盒,可以诊断人体是否感染病毒A,D正确。故选C。5.答案:A解析:微囊悬浮培养能防止培养过程中细胞贴壁生长,但是仍然会出现接触抑制,A项错误6.答案:B解析:A、对于贴壁细胞需先用胰蛋白酶等处理,分散成单个细胞后,再进行离心收集,A错误;B、悬浮培养的细胞因细胞密度过大、有害代谢物积累和营养物质缺乏而使分裂受阻,B正确;C、动物细胞培养一般采用液体培养基,C错误;D、动物细胞培养过程中有贴壁生长和接触抑制现象,每一次传代培养均需加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散成单个细胞,D错误。7.答案:B解析:A、在进行细胞培养时可以用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,使细胞分散开,A正确;B、悬浮在培养液中生长的动物细胞不都会出现细胞贴壁现象,如已经癌变的细胞,B错误;C、在反应器中培养细胞时,添加适量的CO2以维持培养液的pH,C正确;D、细胞培养肉的优点是不需要对动物进行大规模饲养和屠宰,且生长快速、可控,D正确。故选:B。8.答案:A解析:动物细胞融合特有的诱导因素为灭活的病毒;免疫后的小鼠从脾脏中获取的是多种B淋巴细胞;单克隆抗体是杂交瘤细胞增殖并产生的抗体。9.答案:A解析:A、由题意可知,通过计数下室的细胞量即可反映细胞的侵袭能力,若进入下室的肿瘤细胞数量越多,说明肿瘤细胞的侵袭能力越强,但不能说明肿瘤细胞的分裂能力越强,A错误;B、获得动物组织块后,可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理使动物细胞分散开,制成细胞悬液,B正确;C、一开始将肿瘤细胞加入膜上铺有基质胶的上室中,一段时间后在下室发现肿瘤细胞,说明肿瘤细胞可分泌水解酶将基质胶中的成分分解后进入下室,C正确;D、上室含无血清培养液,下室含血清培养液,加入上室的肿瘤细胞一段时间后出现在下室中,说明血清培养液中含有某些因子促使肿瘤细胞向营养高的下室移动,D正确。故选A。10.答案:D解析:A、a中放置的一般是幼龄动物的器官或组织,原因是其细胞分裂能力强,因而可以作为动物细胞培养的材料,A正确;B、细胞培养过程中没有分瓶之前的培养称为原代培养,分瓶之后的培养称为传代培养,即c过程属于原代培养,d过程属于传代培养,B正确;C、c、d瓶中的培养液属于合成培养基,通常还需要加入血清等天然成分,因为目前对于动物细胞增殖所需要的营养尚不完全清楚,C正确;D、将培养的细胞置于95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养,其中二氧化碳起到了维持pH相对稳定的作用,D错误。故选D。11.答案:AD12.答案:ABC解析:A、贴壁细胞需要用胰蛋白酶处理,使之分散为单个细胞,再用离心法收集,A正确;B、原代和传代细胞都需要放入CO2培养箱中进行培养,B正确;C、②时期细胞增殖快、活力强,选取②时期的细胞进行传代培养比①时期的更合理,C正确;D、体外培养动物细胞,一般只能分裂40~50次,不能无限传代,D错误。故选ABC。13.答案:(1)接触抑制;蛋白(或胶原蛋白)(2)原代培养无菌无毒(3)MII(减数分裂I中期);显微操作(法)(4)生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制(卵母细胞细胞质中的遗传物质也能影响克隆动物的性状)(5)体细胞的细胞核解析:(1)从去世不久的“大蒜”本体取得表皮细胞进行动物细胞培养,在培养过程中会出现细胞贴壁和接触抑制现象,因此在核移植前要用胰蛋白(或胶原蛋白)酶将培养的体细胞分散开来。(2)动物组织经处理后的初次培养称为原代培养,分瓶后的培养称为传代培养。动物细胞的体外培养需要满足营养物质的供应,适宜的温度、pH和渗透压,无菌无毒的环境以及气体环境。(3)将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中,一般要在卵母细胞培养至MII(减数分裂工中期)再进行,目前普遍使用的去核方法是显微操作(法)。(4)克隆猫“大蒜”与死亡的“大蒜”的性状表现不完全相同,其原因为生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制(卵母细胞细胞质中的遗传物质也能影响克隆动物的性状)。(5)“大蒜”克隆成功,说明了体细胞的细胞核具有全能性。14.答案:(1)能在体外无限增殖(2)CD14(CD14蛋白/CD14抗原);与形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多,有的不能分泌
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