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文档简介

临床微生物检查

标本的采集与送检规范

桐乡市第一人民医院主要内容

一、临床微生物检查标本送检的意义二、微生物检验目前存在的困惑三、常见标本的采集与运送规范一、临床微生物检查标本送检的意义

正确采集、转运与保存微生物标本直接关系到致病微生物培养的正确性与阳性率,是从临床微生物检验获得正确结果的最关键一步。

近年来由各种不同细菌引起的感染性疾病越来越多,导致抗生素的过度使用,其结果是耐药菌株的增加。

临床微生物室应如何帮助临床医生合理治疗感染性疾病成为我们共同目标。检验误差发生率哪个阶段最高

?微生物结果的影响因素

1.针对性的检验申请2.病人准备3.标本的采取4.标本的运输5.标本的保存和处理46~68.2%标本检验4~15%结果审核和批准危急值报告18.5-27%分析前过程

按照时间的顺序,从临床医生开出医嘱开始,到实验室分析检验程序启动时终止。包括检验申请、患者准备、原始样品的采集、标本运送到实验室并在实验室内进行传输的全部过程。二、微生物检验目前存在的困惑目前存在的困惑

医生根据药敏报告进行临床治疗常常无效;实验室是否分离到真正的致病菌;标本采集不合格;标本延迟送检血标本采集时存在的问题

1血培养瓶存放于冰箱,取出后立即采血进行培养,过低的温度抑制细菌生长。2血液标本采集后放置于冰箱,低温抑制细菌生长。3血液标本采集后,放置时间过长,细菌生长已达衰老期。4标本采集量少,会明显降低阳性率。5标本采集时机不合适,未抓住菌血症时期,或在刚使用抗生素不久。采血最好在:体温升高前半小时,使用抗生素前,或停用抗生素24小时。标本消毒时消毒酒精未完全挥发。

痰液标本采集存在的问题随机标本采集多而非晨痰针对如此严重的分析前误差

我们能做什么?

提供准确的“标本采集输送的标准操作程序”持续的临床教育和交流三、常见标本的采集与运送规范做好病原学检查

要特别重视标本质量

基本原则

早期采集无菌采集

根据目的菌的特性用不同的方法采集。

采取适量的标本

安全运送我国血培养现状—阳性检出率低<10%(国外约为15%)

血流中含菌量低血培养的临床实践欠规范!!血液中抗菌物质培养条件限制抗生素的应用血培养问题

2008年制定血培养指导原则要求:怀疑血流感染时,应在不同部位采血做血培养,至少2套。提高血培养阳性率关键点消毒程序

静脉穿刺点皮肤消毒程序

取无菌棉签或棉球沾取安尔碘II型皮肤消毒剂原液由内向外划圈,均匀涂擦消毒区域二遍,消毒面积不小于5cm×5cm.,自然干燥后再行穿刺采血。如没有佩戴无菌手套,不允许按压消毒后的静脉。(<2月的婴儿不建议采用该消毒剂)、

培养瓶消毒程序用75%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞(不能用含碘消毒剂),自然待干。运送程序

血培养标本应按要求尽快送往实验室,不得超过2h。如无法及时送检,血培养标本需室温(20-25度)保存。切勿冷藏!

血培养标本

采集与运送

血培养的指征是什么?

血培养的指征是什么?

当怀疑血流感染或脓毒症时,应常规行血培养怀疑患者有血流感染的症状有:

不明原因的发烧(>38°C)或体温过低(<36°C)

白细胞增多(

>10,000/ul),粒细胞减少(

<1,000ul)

休克,寒颤

严重的局部感染(脑膜炎,心内膜炎,肺炎,肾盂肾炎,腹部术后感染,...)

心率异常加快

低血压或高血压

呼吸频率加快怀疑血流感染,何时采血最佳?

采集血培养样本的最佳时间?

答案

尽可能在患者寒战或开始发热时采血在患者接受抗生素治疗前采血

如患者已经应用抗菌药物进行治疗,应在下一次用药之前采血培养应该采几份血液标本?基本概念

成人“一套”血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个,也叫“一份”注意:一次穿刺采血,算“一套”,采集第二套应从另一个穿刺点获得。

儿童一般只做需氧培养,特殊患者才考虑厌氧培养

应该采几份血液标本?

每位患者采血最少2套,3套更好初发患者,绝不能只采1套标本应该采集多少血液?要采集多少血液?

采血量是影响灵敏度最关键因素成人一份标本2个培养瓶(需氧+厌氧),每瓶8-10ml,共20ml;要求至少采两份标本,即40ml。

儿童一般只需采集需氧瓶,在保证采集血量<1%总血量下,一般为1-5ml采血量不足时应优先保证需氧瓶,因临床90%以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染

痰培养标本

采集与运送

咳痰途经口咽部

不可避免地受到污染•唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。•研究显示,国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。痰标本的采集方法

自然咳痰:要求患者在清晨用药前留取,因为晨痰量多,且含菌量也多。留取前刷牙,用清水漱口3次,以除去口腔内大部分杂菌,之后用力咳痰。咳痰较困难者可用3%~5%氯化钠溶液雾化吸入进行导痰;对咳嗽乏力或昏迷患者,可用普通吸痰管经鼻腔或口腔吸引下呼吸道分泌物;痰液必须盛于无菌容器内送检。。痰标本的采集方法

咽拭子采样:上呼吸道感染,可通过咽拭子获取标本。标本采集前数小时内不得用消毒药物漱口或涂抹病灶局部。用咽拭子采集标本时应小心、认真、准确,避免触及舌、口腔黏膜和唾液,以防污染。如咽拭子标本发现致病菌,如肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等,且数量较多时,提示有该菌所致感染存在。痰标本的采集方法

纤维支气管镜抽吸采样:插入纤支镜,达到肺炎病灶引流支气管内,纤支镜吸引口依次连接标本采集瓶,用负压将下呼吸道分泌物吸入标本采集瓶内送检。气管切开或气管插管患者也可用痰液收集器吸入标本采集瓶内。痰标本的采集方法

纤支镜直视下可准确采集病灶部位的分泌物,但插入时纤支镜顶端和内孔常受咽喉部正常菌群污染,所以纤支镜吸引物常规培养结果不能完全代表肺部感染的病原体。但检查过程中如注意规范化操作,插入纤支镜时尽量不做上呼吸道分泌物吸引,纤支镜吸痰遭口咽部细菌污染机会较咳痰明显减少。一般认为纤支镜吸引物定量培养可更有效地区分污染菌与感染菌。痰标本的采集方法人工气道是肺部感染的常见易感因素。经人工气道吸引下呼吸道分泌物是目前临床较常用的标本采集方法。但由于这些患者的气管纤毛黏液防御机制受到损害,常有致病菌或条件致病菌定植而不再保持无菌状态,故建立人工气道患者肺部感染病原学诊断有时更为困难。通常认为吸引物定量培养可能区分污染菌抑或感染菌。根据国内诊断标准,经人工气道吸痰细菌浓度≥1×105cfu/ml可认为是感染病原菌,而浓度≤1×104cfu/ml则认为是污染菌。痰标本的采集方法支气管肺泡灌洗术采样:采用塑料导管,在近顶端处设置一气囊,纤支镜插入病灶引流支气管后,引入导管,然后用等渗氯化钠液20~50ml分次注入,并立即用低负压吸引回收,弃去首次灌洗液,以减少污染,收集以后回收的支气管肺泡灌洗液(10-100ml)送检。

痰标本运送

尽快(<2h)送至实验室。如不能及时送达,应将标本暂存于4°C,但放置时间不可超过24h。痰液室温下延搁2~5h会降低肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和葡萄球菌的检出率,而定植于上呼吸道的非致病菌和革兰阴性杆菌会过度生长。

尿培养标本

采集与运送

采集指征:

有典型的尿道刺激症状肉眼脓尿或血尿尿常规检查表现为白细胞阳性(几个+号)不明原因的发热,无其他局部症状留置导尿管时间超过48h的患者出现发热膀胱排空功能受损泌尿系统疾病手术前。采集方法:

尽量取早晨第一次尿液弃去开始流出的尿液,以冲刷尿道口的细菌,取能代表膀胱部位病原菌的中段尿详细告知病人以下操作步骤女性病人收集标本前用清洗液冲洗干净,从前向后仔细擦洗尿道区域分开阴唇,开始排尿排出几毫升后,不停止尿流,采集中段尿•男性病人回缩包皮并清洗龟头

排出几毫升后,不停止尿流,采集中段尿导尿管尿液

集尿袋内的尿液不能用作培养;导尿管末端的尿液也不能用于培养,因为很难避免没有尿道菌群污染。不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。采样端口用酒精消毒;必要时,可先夹住导尿管但不能超过30分钟;将注射器针头插入采样端口,抽吸出尿液;注入无菌杯或试管中标本运送

收集中段尿液5-10ml,及时送检。室温保存下不得超过2小时,否则应置于4°C冰箱保存,保存时间不得超过18h。

粪便培养标本

采集与运送

采集指征:

粪便标本的采集方法

自然排便采集标本时,取有脓血、粘液、组织碎片部份的粪便1~3g(花生米大小)。液体粪便则取絮状物,一般取1~3ml,直接装入粪便容器或运送培养基中送检。肛拭子采集粪便标本:先将

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