药物的纯度检查和鉴别方法

关于药物的纯度检查和鉴别方法

药品质量的评价

从三方面考查：

真伪纯度品质优良度

[性状][鉴别][检查][含量测定]第2页,共53页，星期六，2024年，5月性状外观：指药物的聚集状态、晶形、色泽以及嗅味等性质。溶解度：药物的一种物理性质，在一定程度上反映了药物的纯度理化常数：吸光系数、熔点、晶形、相对密度、折光率、黏度、比旋度、酸值、碘值等2.1药物的鉴别试验IdentificationTest性状和鉴别两个项目第3页,共53页，星期六，2024年，5月1溶解度

准确称取研成细粉的供试品或量取液体供试品（准确度±2％），加入一定量溶剂，在25±2℃下，每隔5min强力振摇30s，观察30min内的溶解情况，如看不到溶质颗粒或液滴时，视为完全溶解。

溶解度极易溶解易溶溶解略溶微溶极微溶解不溶g/ml>1.00.1~10.033~0.10.033~0.010.01~0.0010.001~0.0001<0.0001第4页,共53页，星期六，2024年，5月2吸光系数吸光物质在单位浓度及单位厚度时对紫外可见光的吸光程度。特征常数方法：1五台以上不同型号的紫外可见分光光度计

2溶剂在所用波长处不得有大的干扰

3最大吸收波长的校对

4测定要求：以配置供试品的溶剂为空白，吸收池临用前配对，样品应干燥，样品溶液先配成吸光度值在0.6～0.8之间的浓度测定，然后再稀释一倍测定。样品应同时测定两份，偏差≤1％。五台仪器的相对标准偏差≤1.5％。第5页,共53页，星期六，2024年，5月3熔点4晶型初熔和全熔第6页,共53页，星期六，2024年，5月2.2药物的鉴别方法要求：专属性强、重现性好，灵敏度高，简便快速等方法：光谱鉴别法：红外用于原料药紫外色谱鉴别法：薄层色谱气相色谱高效液相色谱用于制剂化学鉴别法：呈色反应鉴别法沉淀反应鉴别法荧光反应鉴别法气体生成反应鉴别法第7页,共53页，星期六，2024年，5月2.3检查——药物的纯度检查药物纯度的概念：指药物的纯洁程度药物纯度的评价：主要通过药物中的杂质来评定，但应和药物的性状、理化常数、含量测定等作为一个有联系的整体来评价。一、药物的纯度第8页,共53页，星期六，2024年，5月二、药物中的杂质杂质(impurity)：药物中存在的无治疗作用，影响药物的疗效和稳定性，甚至对人体健康有害的物质，称为药物的杂质杂质的来源：生产过程中引入：原料、中间体、副产物、异构体、有机溶剂残留等储藏过程中引入：降解产物、氧化产物（生产中也能同时产生）第9页,共53页，星期六，2024年，5月一般杂质多数是无机杂质，Cl-、SO42-、As、

Fe、重金属等特殊杂质多数为有机杂质有关物质项——原料、中间体、降解产物……杂质的分类：一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质

特殊杂质指在个别药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质第10页,共53页，星期六，2024年，5月限度试验limittest杂质限量药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示。对照法灵敏度法吸光度法药物杂质限量检查第11页,共53页，星期六，2024年，5月杂质限量（L）计算第12页,共53页，星期六，2024年，5月NaCl中Br-的检查供试管NaCl样2.0g+H2O→10ml对照管标准KBr（1.0mgBr-/ml）1.0ml各加HCl3d，氯仿1.0ml，加2%氯胺T液3d

操作注意点：平行原则，用纳氏比色管（一）对照法对照管供试管对照管供试管第13页,共53页，星期六，2024年，5月例2-1．对乙酰基酚中的氯化物的检查：已知：S=2.0g×25/100；C=10μg/ml；V=5.0ml求：L=？解：L=C×V/S×100%=10×5.0/（2.0×106×25/100）×100%=0.01%第14页,共53页，星期六，2024年，5月（二）灵敏度法

供试品液中加入试剂，不得有正反应出现，判断符合规定。

NaBr中I-检查

★不需对照品第15页,共53页，星期六，2024年，5月（三）吸收度限度法

供试液的吸收度不得超过一定值盐酸去氧肾上腺素中酮体检查

2.0mg/ml310nm下A≯0.20★不需对照品

第16页,共53页，星期六，2024年，5月三、一般杂质检查信号杂质一般无害，但其含量的多少可以反映出药物的纯度水平，氯化物、硫酸盐等就属于信号杂质。有害杂质，如重金属、砷盐、氰化物等，对人体有害，在药品标准中必须严格控制。氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐溶液澄清度与颜色、溶液酸碱度、炽灼残渣、干燥失重、水分第17页,共53页，星期六，2024年，5月一般杂质检查规则《药品检验操作标准》规定：1遵循平行操作原则（1）仪器的配对性。如纳氏比色管应配对（2）对照品与供试品同步操作2正确的取样及称量3正确的比色、比浊4检查结果不符合规定或在边缘时，应对供试管和对照管各复查二份第18页,共53页，星期六，2024年，5月（一）氯化物（Chlorides）的检查ChP（2005）二部附录ⅧA

供试管样品xg+水25ml

对照管标准NaCl液(10

gCl-/ml)xml

各加稀硝酸10ml，加水至40ml，加入AgNO3试液1ml，加水至刻度，于暗处放置5min，比浊，在黑色背景下由上向下观察。第19页,共53页，星期六，2024年，5月第20页,共53页，星期六，2024年，5月（二）硫酸盐（sulfates）检查法

ChP（2005）二部附录ⅧB

供试管样xg+水对照管标准K2SO4(100

g

SO42-/ml)xml

各加水至40ml，加稀HCl2ml，25%BaCl25ml，然后加水至50ml，放置10分钟，比浊。第21页,共53页，星期六，2024年，5月（三）铁盐（ironsalt）检查法

ChP（2005）二部附录ⅧG

硫氰酸盐法

n=1～6

供试管样xg

对照管标准Fe3+10

g/mlxml

加水25ml，稀HCl4ml，过硫酸铵50mg，30%硫氰酸铵液3ml，加水至50ml，比色。

加过硫酸铵目的：第22页,共53页，星期六，2024年，5月（四）重金属（HeavyMetals)检查法

ChP（2005）二部附录ⅧH

重金属如:Ag、Pb、Hg、Cu、Bi、Cd、Sb、Sn、As、Ni、Co等。测定以Pb为代表。

ChP（2005）有四种方法，常用1和2第23页,共53页，星期六，2024年，5月第一法适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物，最常用。

硫代乙酰胺

供试管供试液25ml

对照管标准铅10

gPb/mlxml

各加pH3.5醋酸盐缓冲液2ml，硫代乙酰胺试液2ml，放置2分钟，比色。第24页,共53页，星期六，2024年，5月第25页,共53页，星期六，2024年，5月第二法适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸及乙醇的有机药物。

本法先将样品炽灼破坏（500～600℃炽灼灰化），取炽灼残渣项下的残渣，处理后再检查。第26页,共53页，星期六，2024年，5月（五）砷盐（Arsenic）检查法

ChP2005.附录ⅧJ古蔡氏法（Gutzeit）原理：第27页,共53页，星期六，2024年，5月第28页,共53页，星期六，2024年，5月

标准砷斑标准砷溶液（As2O3）1

gAs/ml2ml

样品砷斑

与标准砷斑比较，不得更深

加KI、SnCl2的目的——使AsO43-转变为AsO33-，因为AsO33-生成AsH3的速度比AsO43-快。第29页,共53页，星期六，2024年，5月第30页,共53页，星期六，2024年，5月（六）酸碱度检查法

（AcidityorAlkalinity)

ChP（2005）二部附录ⅨA原料药一般均进行酸碱度检查。液体制剂也均进行酸碱度检查。酸度检查时采用碱液滴定或规定的pH值小于7.0碱度检查时采用酸液滴定或规定的pH值大于7.0酸碱度检查时先后用碱、酸液分别进行滴定或pH范围在7.0两侧。pH第31页,共53页，星期六，2024年，5月1.pH值测定法用电位法测定供试品溶液的pH值如注射用水pH值应为5.0～7.0

青霉素钠盐、钾盐pH值应为5.0～7.5

红霉素pH值应为8.0～10.52005年版药典pH值测定法见附录ⅥH第32页,共53页，星期六，2024年，5月2.指示液法将一定量的指示液加入供试品中，根据指示液的颜色变化来控制酸碱性杂质的限量。

例：纯化水的酸碱度取10ml，加甲基红指示剂2d，不得显红色另取10ml，加溴麝香草酚兰5d，不得显兰色纯化水的pH值为4.2～7.6第33页,共53页，星期六，2024年，5月

3.酸碱滴定法

在一定的指示液下，用酸或碱滴定液滴定供试品溶液中碱性或酸性杂质，以消耗酸或碱滴定液的毫升数作为限度指标。例：苯甲酸钠的酸碱度本品1.0g，加水20ml，酚酞2d

如显淡红色，加硫酸滴定液0.25ml（0.05mol/L）,淡红色应消失。如显无色，加NaOH滴定液0.25ml（0.1mol/L）,应显淡红色。表明本品1g中所含酸、碱性杂质的限量分别为0.025mmol。第34页,共53页，星期六，2024年，5月（七）澄清度检查法

（ClarityofSolution）

ChP2005年版附录ⅨB

检查药品中存在的不溶性杂质对原料药、口服制剂均有要求原理：硫酸肼与乌洛托品反应制备标准比浊液

第35页,共53页，星期六，2024年，5月1.0%硫酸肼+10.0%乌洛托品—浊度标准贮备液---浊度标准原液(15ml—1000ml)第36页,共53页，星期六，2024年，5月

供试品液比浊用玻璃管黑色背景上浊度标准液液面高4cm从上向下观察未超过0.5级浊度标准液或与所用溶剂相同大于0.5级，小于1级0.5级浊度澄清第37页,共53页，星期六，2024年，5月（八）溶液颜色检查法

（ColorofSolution）

ChP2005年版二部附录ⅨA

控制有色杂质限量的一种方法1.目视比色法供试液与标准液比较，不得更深黄色原液K2Cr2O7液红色原液CoCl2·6H2O液蓝色原液CuSO4·5H2O液

配成黄绿色、黄色、橙黄色、橙红色和棕红色5种标准贮备液，再分别配成10种色号。共计50种标准比色液。第38页,共53页，星期六，2024年，5月例：盐酸异丙嗪（抗组胺药）

溶液的澄清度与颜色取本品1.0g，加水10ml溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液（附录ⅨB）比较，不得更深；如显色，与黄色2号标准比色液（附录ⅨA）比较，不得更深。第39页,共53页，星期六，2024年，5月

2.分光光度法在某波长下，测定溶液的吸收度，并规定其吸收度不得超过某一限度。例：华法林钠（抗凝血药）丙酮溶液的澄清度与颜色取本品0.20g，加丙酮10ml溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显色，置4cm吸收池中，在460nm的波长处测定吸收度，不得过0.12。第40页,共53页，星期六，2024年，5月（九）干燥失重测定法

（LossonDrying）

ChP（2005）二部附录ⅧL

干燥失重指药品在规定条件下，经干燥后减失的量测挥发性杂质，主要为水第41页,共53页，星期六，2024年，5月例：葡萄糖干燥失重扁平称量瓶t1t2

t+st+w1t+w2

（放在干燥器内冷却30分钟）恒重:∣t1-t2∣＜0.3mg∣(t+w1)–(t+w2)∣＜0.3mg

指物品连续两次干燥或灼烧后称得的重量相差小于0.3mg，称为达恒重。第42页,共53页，星期六，2024年，5月1.常压恒温干燥法如葡萄糖常用烘箱105℃或以上。2.干燥剂干燥法用于受热不稳定，易挥发的药物。干燥器放P2O5。3.减压干燥法用于受热不稳定、水分难赶除的药物。20mmHg以下压力，恒温减压干燥箱第43页,共53页，星期六，2024年，5月4.热重法

Thermogravimetry

TG

热天平上分析是在程序控制温度下借助热天平以获得物质的质量与温度关系得一种热分析技术。第44页,共53页，星期六，2024年，5月（十）炽灼残渣检查法

（ResidueonIgnition）

ChP（2005）二部附录ⅧN

有机药物炽灼炭化，再加硫酸湿