全国艾滋病检测技术规范专家讲座

全国艾滋病检测技术规范（年修订版

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全国艾滋病检测技术规范第1页年修订版

与年版比较：此次主要对以下6个方面内容进行了修改、增补和完善。全国艾滋病检测技术规范第2页修订版（一）在样品采集和处理中，增加了滤纸干血斑样品（DBS）采集和处理，用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品、尿液和唾液样品采集和处理；在HIV抗体检测中，增加了免疫荧光法和化学发光法，深入明确了不一样情况下检测策略；全国艾滋病检测技术规范第3页修订版（二）在HIV核酸检测中，增加了HIV感染产妇所生婴儿HIV感染早期诊疗检测流程和适合用于窗口期集合核酸检测方法；依据临床治疗需求，增加了HIV-1耐药检测；全国艾滋病检测技术规范第4页修订版（三）深入完善了艾滋病检测试验室安全防护和艾滋病检测试验室质量管理，使其愈加符合当前艾滋病防治工作需求，愈加含有可操作性；考虑到技术发展和新需求，增加了HIV-1新近感染检测和HIV-1分离培养技术。全国艾滋病检测技术规范第5页修订后《规范》（一）

共九章第一章样品采集和处理第二章HIV抗体检测第三章HIV-1抗原检测第四章HIV核酸检测第五章HIV-1耐药检测全国艾滋病检测技术规范第6页修订后《规范》共九章第六章CD4+和CD8+T淋巴细胞检测第七章HIV-1分离培养第八章试验室生物安全第九章艾滋病检测试验室质量管理全国艾滋病检测技术规范第7页第一章样品采集和处理全国艾滋病检测技术规范第8页样品种类及对应用途（一）

HIV抗体检测样品包含：全血、血清、血浆唾液、尿液DBS样品全国艾滋病检测技术规范第9页样品种类及对应用途（二）抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。DBS样品可用于HIV-1基因型及耐药检测。全血、血浆、淋巴细胞富集液、外周血淋巴细胞（PBMC）及DBS样品可用于HIV核酸定性检测。PBMC、全血、淋巴细胞富集液等可用于HIV-1分离培养。全国艾滋病检测技术规范第10页采集和处理样品（一）血液滤纸干血斑尿液和唾液全国艾滋病检测技术规范第11页采集和处理样品（二）血液：抗凝全血、末梢全血、血浆、血清、淋巴细胞富集液、PBMC注意：依据检测要求选取适当抗凝剂，如CD4+和CD8+T淋巴细胞测定可选取EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠，HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选取EDTA钠盐或钾盐或枸橼酸钠。

全国艾滋病检测技术规范第12页注意：全部血液、血清、未固定组织和组织液样品，均应视为有潜在传染性，都应以安全方式进行操作。全国艾滋病检测技术规范第13页样品保留（一）用于抗体和抗原检测血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测可存放于2～8℃，一周以上应存放于-20℃以下。全国艾滋病检测技术规范第14页样品保留（二）用于核酸检测血浆和血细胞样品4天内进行检测可存放于4℃，3个月以内应存放于-20℃以下。3个月以上应置于-70℃以下。全国艾滋病检测技术规范第15页样品保留（三）艾滋病检测筛查试验室检测筛查阳性样品应及时送确证试验室，筛查阴性样品，可依据详细需要决定保留时间，提议最少保留1～2个月。特殊用途或专题项目标样品依据详细要求确定保留时间。全国艾滋病检测技术规范第16页样品保留（四）艾滋病检测确证试验室收到筛查阳性样品，不论确证结果怎样，均应将剩下样品保留最少10年，特殊用途或专题项目标样品依据详细要求确定保留时间。全国艾滋病检测技术规范第17页样品运输应符合生物安全要求；要取得对应部门同意并由含有资质人员专程护送；应采取三层容器对样品进行包装，随样品应附有与样品唯一性编码相对应送检单。送检单应标明受检者姓名、样品种类等信息，并应放置在第二层和第三层容器之间。全国艾滋病检测技术规范第18页样品运输注意事项（一）用于抗体检测血清和血浆样品应在冻存条件下运输。用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定样品应在室温下（18～25℃）或4℃（特殊要求时）运输。用于病毒载量检测样品应在-20℃以下运输。DBS样品应在室温下（18～25℃）运输。每一件包装体积以不超出50mL为宜。全国艾滋病检测技术规范第19页样品运输注意事项（二）运输样品必须有统计。特殊情况下经相关部门同意能够用特快专递邮寄样品，但必须按三层包装，将样品管包扎好，禁止使用玻璃容器。全国艾滋病检测技术规范第20页样品接收（一）样品包裹必须在含有处理感染性材料能力试验室内、由经过培训、穿戴防护衣、戴口罩、防护眼镜工作人员在生物安全柜中打开，用后包裹应及时进行消毒。查对样品与送检单，检验样品管有没有破损和溢漏。如发觉溢漏应马上将尚存留样品移出，对样品管和盛器消毒，同时汇报试验室责任人和上一级试验室技术人员。全国艾滋病检测技术规范第21页样品接收（二）检验样品情况，统计有没有严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。假如污染过重或者认为样品不能被接收，应将样品安全废弃。并将样品情况马上通知送样人。接收样品时应填写样品接收单。全国艾滋病检测技术规范第22页第二章HIV抗体检测本章要求了HIV抗体检测方法、程序、结果汇报、检测策略及质量控制。适合用于各级各类医疗机构、疾病预防控制机构、检验检疫机构、采供血机构及卫生保健机构。可作为对HIV感染者诊疗和监测试验室依据。全国艾滋病检测技术规范第23页HIV抗体检测目标HIV抗体检测可用于诊疗、血液筛查、监测等。以诊疗为目标检测是为了确定个体HIV感染情况，包含临床检测、自愿咨询检测、依据特殊需要进行体检等。以血液筛查为目标检测是为了预防输血传输HIV，包含献血员筛查和原料血浆筛查。以监测为目标检测是为了解不一样人群HIV感染率及其改变趋势，包含各类高危人群、重点人群和普通人群。全国艾滋病检测技术规范第24页HIV抗体检测关键点依据目标选择检测方法及检测策略。严格恪守试验室SOP。筛查试验阳性，须作确证试验。筛查试验阴性，不应做确证试验。筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。全国艾滋病检测技术规范第25页以诊疗为目标检测策略常规HIV抗体检测方法和程序HIV抗体检测分为筛查试验（包含初筛和复检）和确证试验。全国艾滋病检测技术规范第26页筛查试验筛查试剂筛查样品筛查方法筛查程序全国艾滋病检测技术规范第27页筛查试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册同意、在使用期内试剂，其中酶联免疫试剂应批批检合格。推荐使用临床质量评定敏感性和特异性高试剂。全国艾滋病检测技术规范第28页筛查样品HIV抗体筛查可采取血清、血浆、滤纸干血斑、唾液和尿液样品。全国艾滋病检测技术规范第29页筛查方法酶联免疫吸附试验（ELISA）化学发光或免疫荧光试验快速检测（RT）及其它检测试验全国艾滋病检测技术规范第30页筛查程序初筛试验复检试验

注：艾滋病检测筛查试验室复检判定为阳性反应样品，确证试验室能够直接进行确证试验。初筛和复检流程（见图）筛查试验结果汇报筛查试验呈阳性反应样品转送全国艾滋病检测技术规范第31页复检试验假如抗原抗体联合试剂检测呈阳性反应，而抗体试剂检测为阴性反应，则应考虑进行HIV-1p24抗原或核酸检测，必要时进行随访。全国艾滋病检测技术规范第32页筛查试验结果汇报HIV抗体筛查试验:阴性反应汇报为“HIV抗体阴性（-）”；阳性反应汇报为“HIV抗体待复检”。全国艾滋病检测技术规范第33页HIV抗体筛查检测流程样品初筛试验筛查试剂阳性反应阴性反应复检试验阴性汇报原有试剂+另一不一样原理(或厂家)试剂或另外两种不一样原理(或厂家)试剂一阴一阳均阳性反应确证试验汇报阴性均阴性反应全国艾滋病检测技术规范第34页确证试验（一）确证试剂确证样品：可采取血清、血浆、滤纸干血斑样品。确证方法：包含免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）等。确证流程（见图）全国艾滋病检测技术规范第35页确证试验（二）HIV抗体确证试验结果判定HIV抗体确证试验结果汇报发出确证汇报同时要做好检测后咨询。HIV抗体确证汇报反馈和上报疑难样本仲裁全国艾滋病检测技术规范第36页HIV抗体确证试验结果判定HIV-1抗体阳性HIV-2抗体阳性HIV抗体不确定HIV抗体阴性全国艾滋病检测技术规范第37页HIV抗体确证试验结果汇报(一)注意：符合HIV抗体阴性判断标准，汇报“HIV抗体阴性（－）”。如疑似“窗口期”感染，提议深入做HIV核酸检测，尽早明确诊疗。符合HIV抗体不确定判断标准，汇报“HIV抗体不确定（±）”，在备注中应注明“4周后复检”。全国艾滋病检测技术规范第38页HIV抗体确证试验结果汇报(二)注意：省艾滋病确证中心试验室难以确证样品，送国家艾滋病参比试验室确证。同一受检对象样品在不一样试验室得到不一致确实证结果时，由国家艾滋病参比试验室给予仲裁。全国艾滋病检测技术规范第39页HIV抗体确证检测流程全国艾滋病检测技术规范第40页质量控制（QC）全国艾滋病检测技术规范第41页在每次试验中必须包含有内部对照质控血清和外部对照质控血清。全国艾滋病检测技术规范第42页

试剂盒内部对照试剂盒内部对照质控品即为试剂盒内提供阳性和阴性对照血清。试剂盒内部对照用于判断每次试验有效性，但不能作为室内质控品使用。每一次检测临床样品时，必须有试剂盒内部对照，而且只能在同批号试剂盒中使用。内部对照结果无效，必须重新试验。全国艾滋病检测技术规范第43页室内质控品为非试剂盒组份外部质控品，是为了监控检测重复性而设置，包含强阳性、弱阳性和阴性质控血清。也能够只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（Cut-off）2～3倍为宜。外部质控品作用是，判断该批临床样品检测有效性，所以，每次试验必须包含室内质控品，其结果无效，必须重新试验。室内质控品能够是商品或试验室自行制备。全国艾滋病检测技术规范第44页统计室内质控主要表示方法

—建立质控图最惯用质控图是Levey-Jennings质控图，该图使用累计和技术或趋势分析技术图形提供系统偏移和漂移情况。全国艾滋病检测技术规范第45页

建立质控图参数算术平均值()：代表一组质控血清测定S/CO值均值。为了统计学上有显著性意义，应该采取最少20次（天）所测得外部对照质控血清S/CO值结果计算出平均值。标准差(s)：是描述样品与均数之间离散程度一个指标，是与质控血清S/CO值均值相关预期范围。一组S/CO值标准差以s表示。全国艾滋病检测技术规范第46页变异系数（cv）是反应各次S/CO值相对于均值离散程度一个指标，能够用来衡量检测重复性或精密度。全国艾滋病检测技术规范第47页控制限由试验室依据对外部质控品检测结果均值和标准差来确定。比如2S质控规则控制限为外部质控品S/CO均值加减2个标准差；3S质控规则控制限为外部质控品S/CO均值加减3个标准差。全国艾滋病检测技术规范第48页质控图绘制步骤在常规条件下，对同一批外部质控血清连续测定20次（天）或以上，取得一组S/CO值，求均数（）和标准差（s）,超出2s或3s数据不应删除。将均值（）和标准差（s）分别在质控框架图中标示出来。以S/CO值作纵座标（Y轴），每一批次试验作横座标（X轴），绘制质控图。从第21次起，将每次质控血清检测结果依次点入该质控框架图中，检验进入质控状态。全国艾滋病检测技术规范第49页质控图全国艾滋病检测技术规范第50页绘制和分析质控图关键点（一）分析数据时，超出2s或3s数据不应删除。由专员负责建立质控图，每个月定时召开质控分析会，讨论本月质量控制情况。提议长久和稳定地使用一个质量好试剂，更换不一样厂家试剂后，须重新绘制质控图。改用新批号试剂如外部质控品测定出现较大改变也应重新制作质控图。使用新批号或不一样厂家试剂,必须在质控图上注明使用日期。全国艾滋病检测技术规范第51页绘制和分析质控图关键点（二）发觉质控结果失控，应填写汇报单，上交质量责任人，分析原因并决定是否发出检测汇报。使用新批次外部质控品时，如测定值出现较大改变，须重新绘制质控图。变异系数（cv）小于20％，表示外部质控品处于稳定状态。全国艾滋病检测技术规范第52页室内质控其它方式—“即刻法”质控“即刻法”质控方法是在对同一批外部质控血清连续测定3次后，即可对第3次检验结果进行质控。全国艾滋病检测技术规范第53页Levey-Jennings质控图基本统计学含义稳定条件下，在20个IQC结果中不应有多于1个结果超出2SD（95.5%可信限）程度；在1000个测定结果中超出3SD（99.7%可信限）结果不多于3个。如以±3s为失控限，假失控概率为0.3%。全国艾滋病检测技术规范第54页服从正态分布条件误差原因多而小，无一个占优，彼此相互独立（中心极限定理）。普通认为，当影响测量原因在15个以上，且相互独立，其影响程度相当，能够认为测量值服从正态分布；若要求不高，影响原因则应在5个（最少3个）以上，也可视为正态分布。全国艾滋病检测技术规范第55页概率密度函数正态分布密度函数μ为测量总体数学期望，如不计系统误差，则σ=χ-μ即为随机误差σ为测量总体标准差，也是σ=χ-μ随机误差标准差全国艾滋病检测技术规范第56页分布误差特征单峰性：小误差出现概率比大误差出现概率大。对称性：正误差出现概率与负误差出现概率相等。抵偿性：随测量次数增加，算术平均值趋于零。正态分布这三个特点与误差大样本下统计特征相符。但在理论上，正态分布无界，这也是正态分布与实际误差有界性不相符之处。全国艾滋病检测技术规范第57页全国艾滋病检测技术规范第58页正态分布一些k值置信概率k3.33.02.582.01.961.6451.00.6745p0.9990.99730.990.9540.950.900.6830.5

0.0010.00270.010.0460.050.100.3170.5全国艾滋病检测技术规范第59页正态分布在误差理论和实践中地位(1)经典误差理论都是建立在正态分布基础上。凡是有3、5个以上、差不多微小、独立影响合成份布都趋近正态分布。这是被前人早已证实了中心极限定理告诉我们一个事实。(2)许多非正态分布能够用正态分布来表示。(3)正态分布概率密度函数含有简单数学形式和优良性质。(4)也有不少误差分布并不能简单地用正态分布来描述。因而，当代误差理论及其实践需要深入研究非正态分布问题。全国艾滋病检测技术规范第60页

正态分布图-σσμ0.682全国艾滋病检测技术规范第61页质控规则及其使用告警（12S）失控（13S）漂移趋势全国艾滋病检测技术规范第62页告警（12S）：当外部对照S/CO值超出+2s范围时，系统处于告警状态，应予注意，是否能够继续检测需要深入观察。若将12S做失控标准，有较高假失控概率，所以普通不采取。失控（13S）：当外部对照S/CO值超出+3s范围时，系统处于失控状态，此次试验结果不能被接收，可能是系统误差、随机误差或外部对照滴度下降造成。全国艾滋病检测技术规范第63页漂移：连续几次（3

5次）外部对照S/CO值都落在均值一侧则称为位移，提醒试验条件发生了较大改变。趋势：连续几次（5

7次）外部对照S/CO值几乎按一个方向分布时称为趋势，通常由参数迟缓改变引发。

全国艾滋病检测技术规范第64页出现以下情况时，应暂停检测查找原因：出现一次3s范围改变连续两次出现同一方向2s范围改变连续四次出现同一方向1s范围改变连续10次结果都在1s范围内，但落在均值线同一侧。

全国艾滋病检测技术规范第65页第三章——第七章第三章HIV-1抗原检测第四章HIV核酸检测第五章HIV-1耐药检测第六章CD4+和CD8+T淋巴细胞检测第七章HIV-1分离培养全国艾滋病检测技术规范第66页第八章艾滋病试验室生物安全全国艾滋病检测技术规范第67页HIV生物危害第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。人类免疫缺点病毒（HIV）属第二类病原微生物，是高致病性病原微生物。全国艾滋病检测技术规范第68页HIV相关检测生物安全级别（一）HIV抗体检测（包含筛查和确证试验）、抗原检测和相关免疫学检测应在符合Ⅱ级生物安全试验室（BSL-2）要求艾滋病检测试验室中进行。HIV分离培养、浓缩、中和试验、细胞培养及研究工作及其它需要应用活病毒研究工作，应在Ⅲ级生物安全试验室（BSL-3）中进行。全国艾滋病检测技术规范第69页HIV相关检测生物安全级别（二）HIV核酸提取和检测均应在符合Ⅱ级生物安全试验室（BSL-2）要求艾滋病检测试验室中进行。HIV病毒株应保留在符合Ⅲ级生物安全试验室（BSL-3）要求艾滋病试验室；HIV阳性样品，包含全血、血清、血桨和其它组织（液）、核酸提取物应保留在符合BSL-2要求艾滋病试验室。全国艾滋病检测技术规范第70页生物安全相关法律法规及标准《中华人民共和国传染病防治法》《病原微生物试验室生物安全管理条例》《医疗废弃物管理条例》《可感染人类高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理要求》《人间传染病原微生物名目》《试验室生物安全通用要求》《微生物和生物医学试验室生物安全通用准则》全国艾滋病检测技术规范第71页《试验室生物安全通用要求》

(GB19489-)风险评定及风险控制试验室生物安全防护分级试验室设施和设备要求管理要求全国艾滋病检测技术规范第72页BSL-2级试验室工作人员可能暴露路径经口感染：在试验室吃东西、饮水或吸烟，用嘴吸液，经污染手指或物品将病原体带入口腔。经皮肤感染：被针头或其它利器、玻璃等意外刺伤、割伤、刮擦伤。经眼睛感染：传染性物质溅入眼中；或经污染手指将病原体带入眼中。经肺感染：经呼吸吸入含有病原体气溶胶。全国艾滋病检测技术规范第73页BSL-2试验室设施和设备要求（一）适用时，应符合本标准6.1要求。试验室主入口门、放置生物安全柜试验间门应可自动关闭。试验室工作区域外应有存放大量备用物品条件。应在试验室工作区配置洗眼装置。全国艾滋病检测技术规范第74页BSL-2试验室设施和设备要求（二）应在试验室或其所在建筑内配置高压蒸汽灭菌器或其它适当消毒设备，所配置消毒设备应以风险评定为依据。应在操作经空气传输致病性生物材料试验间内配置生物安全柜。全国艾滋病检测技术规范第75页BSL-2试验室设施和设备要求（三）生物安全柜安装和使用应遵照制造商提议。假如生物安全柜排风在室内循环，室内应具备通风换气条件；假如使用需要管道排风生物安全柜，应经过独立于建筑物公共通风系统管道排出。应有可靠电力供给。必要时，主要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应配置备用电源。全国艾滋病检测技术规范第76页BSL－1试验室设施和设备要求（一）试验室门应有可视窗并可锁闭，门锁及门开启方向应不妨碍室内人员逃生。应有预防节肢动物和啮齿动物进入办法。应设洗手池，宜设置在靠近试验室出口处。在试验室门口处应设存衣或挂衣装置，可将个人服装与试验室工作服分开放置。全国艾滋病检测技术规范第77页BSL－1试验室设施和设备要求（二）试验室墙壁、天花板和地面应易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂腐蚀。地面应平整、防滑，不应铺设地毯。试验室台柜和座椅等应稳固，边角应圆滑。试验室台柜等和其摆放应便于清洁，试验台面应防水、耐腐蚀、耐热和坚固。试验室应有足够空间和台柜等摆放试验室设备和物品。全国艾滋病检测技术规范第78页BSL－1试验室设施和设备要求（三）应依据工作性质和流程合理摆放试验室设备、台柜、物品等，防止相互干扰、交叉污染，并应不妨碍逃生和抢救。试验室能够利用自然通风。假如采取机械通风，应防止交叉污染。假如有可开启窗户，应安装可防蚊虫纱窗。试验室内应防止无须要反光和强光。全国艾滋病检测技术规范第79页BSL－1试验室设施和设备要求（四）若操作刺激或腐蚀性物质，应在30米内设洗眼设施，必要时应设紧急喷淋装置。若操作有毒、刺激性、放射性挥发物质，应在风险评定基础上，配置适当负压排风柜。若使用高毒性、放射性等物质，应配置对应安全设施、设备和个体防护装备，应符合国家、地方相关要求和要求。全国艾滋病检测技术规范第80页BSL－1试验室设施和设备要求（五）若使用高压气体和可燃气体，应有安全办法，应符合国家、地方相关要求和要求。应设应急照明装置。应有足够电力供给。应有足够固定电源插座，防止多台设备使用共同电源插座。应有可靠接地系统，应在关键节点安装漏电保护装置或监测报警装置。全国艾滋病检测技术规范第81页BSL－1试验室设施和设备要求（六）供水和排水管道系统应不渗漏，下水应有防回流设计。应配置适用应急器材，如消防器材、意外事故处理器材、抢救器材等。应配置适用通讯设备。必要时，应配置适当消毒设备。全国艾滋病检测技术规范第82页BSL-2试验室个人防护基本要求（一）BSL-2试验室工作人员进入试验室后应穿工作服，依据操作内容确定是否需要外加隔离服；应戴帽子、口罩和一次性手套，必要时应戴双层手套和防护眼镜。一次性手套不得清洗和再次使用；全国艾滋病检测技术规范第83页BSL-2试验室个人防护基本要求（二）当进行感染性操作不可能在生物安全柜内进行、必须采取外部操作时，为预防感染性材料溅出或雾化危害，须使用面部保护装置，如护目镜；离开试验室时，工作服和任何防护物品必须脱下并留在试验室区域内，不得穿着防护用具进入办公区域或其它公共场所；用过防护用具及时清洁消毒。全国艾滋病检测技术规范第84页个人保健和防护（一）遇有手部皮肤有开放性伤口及其它不适于工作情况，应暂停工作。皮肤微小伤口、擦伤、皲裂等，应用防水敷料严密覆盖。应为每一名在艾滋病试验室工作人员提供充分防护服、一次性乳胶手套、口罩、帽子和覆盖足背工作鞋。应将清洁防护服和其它个人防护用具置于试验室清洁区内专用处存放。试验室应设置应急冲洗眼睛装置。全国艾滋病检测技术规范第85页个人保健和防护（二）工作人员上岗前必须进行HIV抗体和乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等肝炎病毒标志物检测，应接种乙肝疫苗。应每年对工作人员采血检测HIV抗体，血清应长久保留。进试验室工作前要摘除首饰，修剪长带刺指甲，以免刺破手套。禁止在试验室内进食、饮水、吸烟和化装。全国艾滋病检测技术规范第86页个人保健和防护（三）试验操作时应穿适当防护服、戴手套和口罩、穿试验室专用工作鞋。如接触物传染性大、应戴双层手套；含有HIV液体（样品或病毒培养液）有可能喷溅时，应戴防护眼镜、穿防水（如塑料）围裙。工作完成，先脱去手套，再脱去防护服，用肥皂和流动水洗手。穿过污染防护服应及时放入污物袋中，消毒后方可洗涤或废弃。全国艾滋病检测技术规范第87页个人保健和防护（四）注意：

操作过程中，如发觉防护服被污染应马上更换，如手套破损，应马上丢弃、洗手并换上新手套。不能用戴手套手触摸暴露皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等。不要将手套清洗或消毒后再次使用，因为使用表面活性剂清洗可使手套对水通透性增加，消毒剂能够引发手套破损。全国艾滋病检测技术规范第88页个人保健和防护（五）禁止使用口腔吸液管，必须使用移液器来操作试验全部液体。全国艾滋病检测技术规范第89页离心机使用注意事项（一）必要时应设负压排风罩，并能经过生物安全风险评定。离心机不能放入Ⅱ级生物安全柜中使用。在Ⅰ级生物安全柜中使用时，应评定离心机对安全柜开口处气流影响，以及安全柜对离心机可能产生气溶胶防护能力。全国艾滋病检测技术规范第90页离心机使用注意事项（二）在离心含有潜在危害生物学材料结束后，打开离心机盖前要先等候5min。应定时清理离心管座，检验转子是否损坏、破裂或腐蚀。离心杯应定时清洗，并用适当消毒剂去除污染。离心时发生破裂或泄露后均应及时清洁消毒。全国艾滋病检测技术规范第91页离心机使用注意事项（三）要尤其加强离心机连续使用过程中维修保养。使用过程中假如发生离心管、离心杯等破裂或泄漏，应重新评定离心操作规范，必要时更换愈加安全离心设备。Ⅰ全国艾滋病检测技术规范第92页离心机内溢洒处理（一）在离心感染性物质时，要使用密封管以及密封转子或安全桶。每次使用前，检验并确认所有密封圈都在位并状态良好。离心结束后，最少再等候5min打开离心机盖。假如打开盖子后发觉离心机已经被污染，马上小心关上。假如离心期间发生离心管破碎，马上关机，不要打开盖子。切断离心机电源，最少30min后开始清理工作。全国艾滋病检测技术规范第93页离心机内溢洒处理（二）穿着适当个体防护装备，准备好清理工具。必要时，清理人员需要佩戴呼吸保护装置。消毒后小心将转子转移到生物安全柜内，浸泡在适当非腐蚀性消毒液内，提议浸泡60min以上。全国艾滋病检测技术规范第94页离心机内溢洒处理（三）小心将离心管转移到专用搜集容器中。一定要用镊子夹取破碎物，能够用镊子夹着棉花搜集细小破碎物。经过用适当消毒剂擦拭和喷雾方式消毒离心转子仓室和其它可能被污染部位，空气晾干。假如溢洒物流入离心机内部，需要评定后采取适用办法。全国艾滋病检测技术规范第95页污染物处理全国艾滋病检测技术规范第96页污染物处理应按照《试验室生物安全通用要求》（GB19489-）和《消毒技术规范（年版）》处置试验室废弃物。艾滋病试验室产生全部废弃物，包含不再需要样品、培养物和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于专用密封防漏容器中，安全运至消毒室，经高压消毒后再进行处理或废弃。全国艾滋病检测技术规范第97页污染物处理惯用消毒方法（一）

1.物理消毒方法高压蒸汽消毒，121℃，保持15

20min;干燥空气烘箱消毒（干烤消毒），140℃，保持2

3h。全国艾滋病检测技术规范第98页污染物处理惯用消毒方法（二）2.化学消毒方法含氯消毒剂（次氯酸钠，含有效氯～5000mg/L）75%乙醇2%戊二醛全国艾滋病检测技术规范第99页艾滋病检测试验室物品惯用消毒方法废弃物缸：5000mg/L次氯酸钠。生物安全柜工作台面和仪器表面：75%乙醇。溢出物：5000mg/L次氯酸钠。污染台面和器具：mg/L次氯酸钠,也能够用过氧化氢或过氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。全国艾滋病检测技术规范第100页意外事故处理发生意外事故时，应针对事故类型马上进行紧急处理。全国艾滋病检测技术规范第101页意外事故紧急处理方法（一）皮肤针刺伤或切割伤，应马上用肥皂和大量流水冲洗，尽可能挤出损伤处血液，用70%乙醇或其它消毒剂消毒伤口。皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，并用适当消毒剂浸泡，如70%乙醇或其它皮肤消毒剂。粘膜污染：用大量流水或生理盐水冲洗污染部位。衣物污染：尽快脱掉污染衣物，进行消毒处理。全国艾滋病检测技术规范第102页意外事故紧急处理方法（二）污染物泼溅：小范围污染物泼溅，应马上进行消毒处理和清洗。发生大范围污染物泼溅事故时，应马上通知试验室主管领导和安全责任人抵达事故现场，查清情况，确定消毒程序。发生空气污染时，可采取低温蒸汽甲醛气体对空气进行消毒，但甲醛有致癌作用，不宜用于生物安全柜和试验室常规空气消毒。全国艾滋病检测技术规范第103页意外事故紧急处理方法（三）假如发生重大泼溅事故，应采取疏散人员、控制污染扩散等办法。：意外及事故登记、汇报和检测对重大意外和事故必须进行登记，对职业暴露事故应填写“艾滋病职业暴露人员个案记录表”；对重大意外和事故必须进行汇报和检测。全国艾滋病检测技术规范第104页“艾滋病职业暴露人员个案记录表”

内容包含：意外和事故发生时间、地点及详细经过。详细统计职业暴露发生时间、地点及经过；暴露方式；损伤详细部位、程度；暴露物种类（培养液、血液或其它体液）和含有HIV情况；事故处理方法和经过，包含教授或领导赴现场指导和处理情况。处理方法及经过；是否采取暴露后预防药品，详细统计用药情况、首次用药时间（暴露后几小时或几天）、药品毒副作用情况（包含肝肾功效化验结