临床常用免疫学检查医学知识讲座专家讲座

临床惯用免疫学检验南京医科大学第一从属医院7/12/20241临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第1页临床惯用免疫学检验免疫功效检验*血清免疫球蛋白检测*血清补体检测*细胞免疫检测病毒肝炎血清标志物检验感染免疫检验

细菌感染免疫检测病毒感染免疫检测其它（寄生虫感染、性病等）肿瘤标志物检验

蛋白质类肿瘤标志物糖脂类肿瘤标志物酶类肿瘤标志物7/12/20242临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第2页临床惯用免疫学检验本身抗体检验*抗核抗体检测*类风湿因子测定*抗心磷脂抗体测定*抗中性粒细胞胞浆抗体测定抗某种组织/细胞抗体检测

移植免疫检验细胞因子检验*IL-2、6、8、10*TNFIFN

7/12/20243临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第3页免疫功效检验*血清免疫球蛋白检测

*血清补体检测*细胞免疫检测7/12/20244临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第4页体液免疫检验（一）免疫球蛋白

（Immunoglobulin,Ig）

免疫球蛋白指含有活性抗体活性和抗体样结构球蛋白，由浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一些细胞膜上。7/12/20245临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第5页免疫球蛋白

用超速离心、免疫电泳方法可将免疫球蛋白分为五类：

IgG最多、占70%~80%抗体活性

IgA血清型和分泌型两种

IgM是有效凝聚和溶解细胞因子

IgD功效尚不完全清楚IgE与变态反应相关7/12/20246临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第6页免疫球蛋白

7/12/20247临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第7页

7/12/20248临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第8页正常值：

单向免疫扩散法—IgG7.0~16.6g/LIgA0.7~3.5g/LIgM0.5~2.6g/L

ELISA法—IgE0.1~0.9mg/L7/12/20249临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第9页

多克隆增高:IgGIgAIgM均增高单克隆增高:仅某一个Ig增高而其它种不增高

7/12/202410临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第10页临床意义

增高：多克隆性增高—慢性感染、慢性肝病、本身免疫性疾病单克隆性增高—免疫增殖性疾病

7/12/202411临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第11页临床意义

减低：

先天性—先天性无（低）丙种球蛋白血症、重链病、轻链病

后天性—肾病综合征、病毒感染、免疫抑制剂应用

7/12/202412临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第12页IgE测定

IgE为亲细胞抗体，在Ⅰ型变态反应性疾病发病中起主要作用。临床意义：IgE增高最多见于Ⅰ型变态反应性疾病，如支气管哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎、荨麻疹等；非过敏性疾病如寄生虫病、肝炎、SLE、类风湿关节炎及多发性骨髓瘤（IgE型）等。

7/12/202413临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第13页M蛋白（Monocolonalprotein）:

M蛋白是一个单克隆B淋巴细胞（浆细胞）异常增殖时产生免疫球蛋白分子或其片段（如轻链、重链等），它们与正常免疫球蛋白相同结构和电泳迁移速度，但不含有抗体活性。临床意义多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)巨球蛋白血症（Waldenstrom症）重链病、轻链病、半分子病其它：恶性淋巴瘤（lymphoma）、良性M蛋白血症7/12/202414临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第14页（二）血清补体（complement,C）

参加灭活病原体免疫反应也可破坏本身组织或本身细胞造成免疫损伤7/12/202415临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第15页

7/12/202416临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第16页

总补体溶血活性检测（totalhemolyticcomplementactivity,CH50）

正常值：50~100ku/L

临床意义：减低—肾小球肾炎、本身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮Systemiclupuserythematosis,SLE）、感染性心内膜炎（subacuteinfecitiveendocarditis,SBE）、肝病等

增高—急性炎症、组织损伤、肿瘤等7/12/202417临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第17页补体C3检测：C3在补体系统各成份中含量最多，是传统路径和旁路路径被激活关键物质正常值：0.8~1.5g/L补体C4检测：C4代表补体传统活化路径，在补体活化、促进吞噬、预防免疫复合物从容和中和病毒等方面发挥作用正常值：0.2~0.6g/L7/12/202418临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第18页临床意义：

参见CH50减低和增高临床意义C3增高在急性炎性反应更敏感

C4对判断免疫复合物形成时补体消耗性减低更有意义7/12/202419临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第19页细胞免疫检测T细胞免疫检测B细胞免疫检测自然杀伤细胞检测中性粒细胞吞噬、杀菌功效检测7/12/202420临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第20页

T细胞分化抗原测定

(免疫荧光法）

CD3—总T细胞正常值：

61%～85%

CD4—T辅助细胞（TH）正常值：

28%～58%

CD8—T抑制细胞（TS）正常值：

19%～48%

CD4/CD81.66±0.33

（＞1）7/12/202421临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第21页临床意义：CD3降低—本身免疫性疾病（SLE、类风湿关节炎）

CD4/CD8增高—本身免疫性疾病（如SLE、类风湿关节炎、多发性硬化症等）及器官移植后排异反应

CD4/CD8减低—见于艾滋病、恶性肿瘤、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染、血吸虫病等。

CD3CD4CD8均增高—T细胞型淋巴细胞恶性疾病7/12/202422临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第22页

B细胞分化抗原测定：

应用CD19、CD20、CD21、CD22和CD40等单克隆抗体标识单个核细胞—B细胞，经过免疫荧光或流式细胞术进行检测。

CD19

为全部B细胞共有表面标志，B细胞活化后不消失，是最主要B细胞标识分子。

参考值：CD1911.74±3.73%

7/12/202423临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第23页临床意义升高—B细胞型急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血病、Burkitt淋巴瘤等

减低—无丙种球蛋白血症、长久免疫抑制剂应用后7/12/202424临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第24页

自然杀伤细胞免疫检测它不依赖抗体和补体即能杀伤靶细胞自然杀伤细胞（NK）介导天然免疫应答，自然杀伤细胞（NK）活性可作为判断机体抗肿瘤和抗病毒感染指标之一

7/12/202425临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第25页参考值：

NK细胞活性（自然杀伤）47.6%～76.8%

临床意义：

升高：常见于病毒感染早期，Down综合症，器官移植后，使用免疫增强剂（如干扰素）治疗后。

减低：常见于恶性肿瘤，重症联合免疫缺点病，AIDS和免疫抑制剂使用者等。7/12/202426临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第26页三、肿瘤标志物检测蛋白质类肿瘤标志物、糖脂类肿瘤标志物、酶类肿瘤标志物7/12/202427临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第27页临床惯用肿瘤标志物7/12/202428临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第28页AFP胎儿早期肝脏合成糖蛋白，当干细胞或生殖腺胚胎细胞恶变，基因激活，细胞合成AFP增加。参考值：＜25ug/l意义：1：原发性肝癌，＞300ug/l；10%阴性。2：生殖腺胚胎癌、胃癌、胰腺癌可升高。3：慢性肝炎、肝硬化可升高（＜200ug/l）。4：孕妇可升高7/12/202429临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第29页CEA胎儿早期消化管和一些组织合成，孕6月后降低，出生后极低。参考值：＜15ug/l意义：1：90%胰腺癌、74%结肠癌、60%乳腺癌常超过60ug/l。2：胰腺炎、结肠炎、肝脏疾病、哮喘可升高。3：慢性肝炎、肝硬化可升高（＜200ug/l）。4：动态观察，疾病活动↑好转↓7/12/202430临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第30页7/12/202431临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第31页本身抗体检验类风湿因子（rheumatoidfactor,RF）

RF是变性IgG刺激机体产生一个本身抗体，主要存在于类风湿关节炎患者血清和关节液内。RF可分为IgM型、IgG型、IgA型等，用胶乳凝集法测出主要是IgM型，用ELISA法可深入检出其它型7/12/202432临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第32页RF-IgGRF-IgARF-IgM7/12/202433临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第33页参考值：

阴性<30U/L临床意义：

类风湿关节炎（阳性率70%）其它本身免疫性疾病（SLE、干燥综合症等）可阳性

慢性活动性肝炎、一些感染性疾病（传染性单核细胞增多症、结核病感染性心内膜炎等）也可出现阳性7/12/202434临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第34页（二）抗核抗体检测

1.抗核抗体（antinuclearantibody,ANA）

抗核抗体是一个泛指抗各种细胞核成份本身抗体总称（ANAS），这种抗体无器官和种族特异性7/12/202435临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第35页

免疫荧光法

以鼠肝细胞核或人喉癌细胞（Hep-2细胞）作抗原时该抗体（1抗）可与之结合，再加入荧光标识抗人IgG（2抗）后可产生黄绿色荧光7/12/202436临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第36页依据细胞核着染荧光图像可分为:均质型DNP核蛋白边缘型DNA颗粒型ENA核仁型RNA

7/12/202437临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第37页

参考值：

免疫荧光法为阴性血清滴度>1：40为阳性

7/12/202438临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第38页

临床意义：

ANA阳性最多见于未治疗SLE，阳性率达80%—100%（活动期几乎100%阳性）

ANA阳性是结缔组织病标志，如:混合性结缔组织病（mixedconnectivetissuedisease,MCTD）100%阳性

系统性硬化病（systemicsclerosis,SSc）85%—95%阳性、多发性肌炎（polymyositis,PM）30%—50%阳性,

另外,类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)、干燥综合症（SjogrenSyndrom,SS）等可出现阳性

其它疾病,如原发性胆汁性肝硬化、慢性肝病、慢性感染、肿瘤等也可出现阳性7/12/202439临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第39页2.抗脱氧核糖核酸抗体（anti-DNAantibody，抗DNA）

其中抗双链DNA（doublestranded-DNA,ds-DNA）抗体靶抗原是细胞核中DNA双螺旋结构，它检测有临床主要性

正常结果：阴性

临床意义：抗ds-DNA抗体阳性见于活动期SLE，阳性率70%—90%，为SLE特异性抗体，尤其在并发狼疮性肾炎时起主要作用，其它风湿病中抗ds-DNA抗体也可阳性7/12/202440临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第40页

3.可提取性核抗原多肽抗体谱

ENA（extractableantinuclearantigen）由各种相对分子质量不一样多肽组成，利用免疫印迹试验可对这些抗原本身抗体进行检测

7/12/202441临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第41页ENA多肽7项是当前临床最多应用于风湿病检验项目7/12/202442临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第42页抗心磷脂抗体（anticardiolipinantibody,ACA）

抗磷脂抗体是一组针对各种带负电荷磷脂本身抗体，其中以ACA可作为代表。

正常参考：阴性ELISA法测定≥2.1为阳性

临床意义：ACA阳性见于SLE、类风湿关节炎、干燥综合症等风湿病，抗磷脂综合症，以及肿瘤、感染等。7/12/202443临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第43页抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)（anti-neutrophilcytoplasmicantibody）ANCA是存在于系统性血管炎患者血清中一个本身抗体，可分为胞浆型（C-ANCA）和核周型（P-ANCA）7/12/202444临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第44页7/12/202445临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第45页7/12/202446临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第46页临床意义：

C-ANCA（+）---韦格纳肉芽肿（WG）

P-ANCA（+）---血管炎性肾炎多动脉炎变应性肉芽肿血管炎（Churg-Strauss综合症）本身免疫性肝病…

7/12/202447临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第47页抗组织和细胞抗体检测

抗线粒体抗体（anti-mitochondriaantibody,AMA）抗甲状腺球蛋白抗体（anti-thyroglobulinantibody,TG）抗甲状腺微粒体抗体（anti-thyroidmivrosomentibody,TM）抗平滑肌抗体（antismoothmuscleantibody,ASMA）

如AMA、ASMA在原发性胆汁性肝硬化、慢性肝病、本身免疫性肝炎中常为阳性……7/12/202448临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查医学知识讲座第48页细胞因子检测细胞因子（cytokine）是由活化免疫细胞和一些基质细胞分泌，介