人体寄生虫学实验专家讲座

1人体寄生虫学试验人体寄生虫学实验第1页2试验课注意事项

一、试验室规则1.进试验室上课时必须穿白大衣，按编号入座

（编号=座位号=标本盒号=显微镜号）；2.试验前做好预习，明确试验目标和要求。3.严格恪守操作程序，爱护教学标本、仪器、试剂、动物。人体寄生虫学实验第2页34.试验操作时要耐心细致，自己动手，独立思索。5.上课要按时，不得无故缺席、迟到或早退。恪守课堂纪律。6.严格恪守生物安全要求。动物尸体、玻片、器皿、垃圾应按要求放到指定地点。7.值日生应负责搞好试验室清洁卫生，离开试验室前应关好水、电、门窗及署名。

人体寄生虫学实验第3页41.每位同学：①离开试验室之前按次序放好玻片标本；放好显微镜；整理好自己台面和清洁试验用具。②动物尸体、玻片、器皿、垃圾应按要求放到指定地点。2.值日生:①抹试验台、黑板、整理桌面等；②拖地、倒垃圾；③值日组长署名；④关好水、电、门窗。

清洁与值日

人体寄生虫学实验第4页5二、赔偿制度

1.损坏公物要赔偿

2.重点为玻片标本，损坏要登记赔偿（蠕虫标本每人一盒，每盒18张玻片标本）。

3.要求课前课后检验标本课前：上课前检验或老师课前讲话后5min

内检验课后：离开试验室之前4.标本损坏赔偿：（206室登记，）人体寄生虫学实验第5页6三、显微镜使用

1.搬动显微镜时要轻，对号使用，对号放回。2.插、拔电源前要检验显微镜灯泡亮度是否已拨至最低处，开关是否关了。3.看玻片标本要注意问题

(1)成虫玻片标本：用肉眼、解剖镜、低倍镜

(2)虫卵玻片标本：用低倍镜、高倍镜

虫卵玻片标本特点及对焦方法低倍→对焦→对靶→高倍

(3)原虫玻片标本：高倍镜→油镜人体寄生虫学实验第6页7虫卵玻片标本对焦方法低倍→对焦→对靶→高倍人体寄生虫学实验第7页显微镜故障处理1.放在边台桌面，无需放入柜内2.写张小纸条注明故障情况夹于玻片夹处

3.可取无人使用后备显微镜使用，用完后放回原处。人体寄生虫学实验第8页9四、试验安排

操作：自己用显微镜看小组操作：普通4人一组

小班示教：在小班试验室看示教：分两组，到208示教室和大厅看。每组12分钟，带上试验指导

示教时间：15:00-15:25组别

12345678910座位号1-45-88-1213-1617-2021-2425-2829-3233-3536-38人体寄生虫学实验第9页10五、作业要求

在每次作业首页左上角写上“汇报日期：年×月×日”标注图：用平行线标注各部位名称绘图：用铅笔描绘，点、线图

绘虫卵图要求：

1.外形特征,内含物结构特点

2.卵壳用双线表示厚薄、是否均匀等特征

3.标注主要结构

生活史线条图：

简答题：简明扼要，或用表格列出

汇报：写目标／原理、方法（步骤）、结果、分析人体寄生虫学实验第10页11试验课总目标和要求1.掌握常见人体寄生虫识别，掌握含有诊疗价值寄生虫形态特征和常见寄生虫病原学检验方法，了解免疫学诊疗技术及高新技术诊疗方法。2.培养动手能力、分析问题和处理问题能力及创新能力。3.验证理论课中所学基本理论，对主要理论内容加深了解。人体寄生虫学实验第11页12试验一华支睾吸虫（Clonorchissinensis）布氏姜片虫（Fasciolopsisbuski）人体寄生虫学实验第12页13试验目标和要求

1.以华支睾吸虫为代表，掌握吸虫基本形态和生活史基本特点。

2.掌握两种吸虫虫卵形态特征和病原学诊疗方法。

3.熟悉两种吸虫感染路径、感染方式、寄生部位与致病作用及防治关键点。人体寄生虫学实验第13页14

试验内容

一、操作

1.华支睾吸虫(成虫、虫卵)

2.布氏姜片虫(成虫、虫卵)二、小组操作

1.检验猫肝（找华支睾吸虫成虫,注意病理改变）

2.ELISA法检测待测血清中抗华支睾吸虫抗体三、示教：成虫液浸标本、中间宿主（淡水螺、淡水鱼）、植物媒介、生活史各期、病理标本四、录像：华支睾吸虫五、作业六、小结人体寄生虫学实验第14页15华支睾吸虫成虫注意观察：外形口、腹吸盘（位置和大小百分比）生殖系统消化系统人体寄生虫学实验第15页16

华支睾吸虫卵

大小：29×17μm形状：芝麻状（或灯泡状）颜色：黄褐色内含物：毛蚴其它：卵盖疣状突起（小瘤）小瘤人体寄生虫学实验第16页17布氏姜片虫成虫腹吸盘口吸盘睾丸卵巢注意观察：外形口、腹吸盘生殖系统消化系统人体寄生虫学实验第17页18布氏姜片虫卵

大小：人体吸虫中最大者

形态：长椭圆形

颜色：淡黄色

内含物：一个卵细胞

许多卵黄细胞

其它：卵壳薄

卵盖不显著卵盖卵细胞卵黄细胞人体寄生虫学实验第18页ELISA法检测待测血清中抗华支睾吸虫抗体（小组操作）

试验原理：特异性抗原与特异性抗体反应包埋已知抗原（GST2，基因工程重组抗原）抗原抗体复合物底物显色反应加待测血清酶标识二抗试验目标：熟悉免疫学诊疗方法和意义终止反应人体寄生虫学实验第19页ELISA法检测待测血清中抗华支睾吸虫抗体（小组操作）操作步骤100ul＋－100ul100ul1.加样待测样品1或22.温育封板，37℃25分钟3.洗涤洗涤液3次，200ul，拍干4.加酶标识二抗100ul，封板，37℃20分钟5.洗涤洗涤液4次，拍干6.显色、加终止液&结果判定显色液A、B各加一滴,37℃10分钟；加终止液一滴人体寄生虫学实验第20页操作注意事项:1.每一步反应液要垂直滴入反应孔,加样后轻轻摇匀；2.每一步反应完后都要抛尽，并注意抛尽方向

以防交叉反应；3.每次冲洗、抛尽后要在吸水纸上拍干。试验汇报:试验目标/原理

试验方法（步骤）

试验结果

试验结果分析人体寄生虫学实验第21页22人体寄生虫学实验第22页23人体寄生虫学实验第23页24人体寄生虫学实验第24页人体寄生虫学实验第25页26人体寄生虫学实验第26页27人体寄生虫学实验第27页28在鱼肉中囊蚴(0.138-0.15mm)人体寄生虫学实验第28页291.绘虫卵图（华支睾吸虫、布氏姜片虫）2.标注成虫形态图（华支睾吸虫、布氏姜片虫）3.绘华支睾吸虫生活史线条图4.写出ELISA法检测待测血清中抗华支睾吸虫抗体试验汇报（试验目标/原理、试验方法/步骤、试验结果/试验结果分析）作业人体寄生虫学实验第29页30小结

一、虫卵判别及病原学诊疗方法

大小、形状、颜色、内含物、卵壳、其它（卵盖）

人体寄生虫学实验第30页31

两种虫卵判别关键点华支睾吸虫卵布氏姜片虫卵

卵盖有卵盖（大）肩峰显著有卵盖（小）无肩峰

大小较小27~35μm×12～20μm（小）较大130~140μm×80~85μm，（大）

形态低倍镜下看似芝麻高倍镜下看似灯泡（上窄下宽），底端有一小疣椭圆形

颜色黄褐色淡黄色

内含物毛蚴卵内含一个卵细胞和20-40个卵黄细胞

卵壳较薄薄离开人体载体（诊疗材料）粪便（胆汁）粪便人体寄生虫学实验第31页32二、成虫判别外形口、腹吸盘生殖系统消化系统寄生部位人体寄生虫学实验第32页33人体寄生虫学实验第33页34两种成虫判别关键点华支睾吸虫成虫布氏姜片虫成虫吸盘（附着、运动器官）口吸盘比腹吸盘略大，腹吸盘在虫体前1/5处腹吸盘比口吸盘大4-5倍，两吸盘距离很近。腹吸盘漏斗状，肌肉发达。生殖系统睾丸一对在体后1/3处前后排列，树枝状。卵巢在体中部分叶，有受精囊、劳氏管，无阴茎、阴茎袋。与左相同，但睾丸分支细而多，卵巢也分支，无受精囊，有劳氏管、阴茎袋。卵黄腺发达。消化系统肠管较直肠管弯曲体表无体棘有体棘体形狭长，葵花子形长椭圆形，为人体最大吸虫寄生部位终宿主肝胆管终宿主小肠人体寄生虫学实验第34页35

三、生活史

寄生虫完成一代生长、发育及繁殖整个过程。终宿主保虫宿主宿主第一中间宿主第二中间宿主／植物媒介感染期感染路径、感染方式定居部位致病离开人体时期诊疗人体寄生虫学实验第35页36华支睾吸虫生活史：虫卵毛蚴胞蚴雷蚴尾蚴囊蚴成虫虫卵粪便水淡水螺（纹沼螺等）淡水鱼虾人粪便哺乳动物肝胆管第一中间宿主第二中间宿主终宿主（1M）布氏姜片吸虫生活史：

虫卵毛蚴胞蚴母雷蚴子雷蚴尾蚴囊蚴成虫虫卵粪便水淡水螺（扁卷螺）水生植物人粪便猪、野猪小肠中间宿主植物媒介终宿主(1-3M)（感染期）（感染期）人体寄生虫学实验第36页37两种吸虫生活史判别关键点

华支睾吸虫布氏姜片虫终宿主／保虫宿主人／猪、狗、猫、豹、虎等哺乳动物人／猪、野猪第一中间宿主纹沼螺、长角涵螺、赤豆螺扁卷螺第二中间宿主／植物媒介淡水鱼（鲤科鱼）、淡水虾水生植物，菱角、荸荠（马蹄）感染期囊蚴囊蚴感染路径经口（被动）经口（被动）定居部位人或哺乳动物胆管（肝胆管）内人、家猪、野猪等小肠内离开人体时期（诊疗取材）虫卵（粪便）虫卵（粪便）致病肝，胆管炎、肝肿大、肝硬变、胆结石、胆管癌…消化道症状，机械损伤，坏死脱落，炎症、出血、水肿、溃疡…

人体寄生虫学实验第37页38四、ELISA法检测华支睾吸虫感染结果分析

应结合病史，临床症状等综合判断。①血清中无特异性抗体②未感染华支睾吸虫③感染早期，特异性抗体未出现④病人已治愈，无抗体存在⑤假阴性①血清中有特异性抗体②已感染华支睾吸虫③曾感染经治疗未治愈④经治疗病人已治愈，抗体仍存在⑤假阳性阳性阴性人体寄生虫学实验第38页39

五、复习名词慨念

1.寄生虫（parasite）

2.宿主（ho