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木薯叶片中黄酮醇的测定高效液相色谱法国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会I请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国标准化研究院提出并归口。李开绵。1木薯叶片中黄酮醇的测定高效液相色谱法1范围本文件描述了木薯(ManihotesculentaCrantz,Cassava)叶中4种黄酮醇化合物的高效液相色谱测2规范性引用文件4原理5.2.20.2%磷酸水溶液(体积分数):取2.0mL磷酸(5.1.3),置于1000mL容量瓶中,用水定容至刻2GB/T42114—202250%乙醇水溶液(5.2.1)定容,获得4种黄酮醇标准品质量浓度分别为100.0μg/mL、600.0pμg/mL、的离心管中。试样制备后于—18℃以下密封避光保存。保存期1年。3GB/T42114—2022密封袋中。试样制备后于8℃以下密封避光保存。保存期1年。8测定步骤准确称取木薯鲜叶或木薯干叶粉末0.2g(±0.0002g)于15mL离心管中,加入50%乙醇水溶液液转移至10mL容量瓶中,残渣再加入50%乙醇水溶液(5.2.1)5.0mL,旋涡振荡混匀,离心5min(10000r/min,25℃),合并两次离心的上清液,加入50%乙醇水溶液(5.2.1)定容至10mL,旋涡振荡检测。高效液相色谱仪(6.1)的色谱参考条件如b)流动相:甲醇和0.2%磷酸水溶液,按表1的规定进行梯度洗脱;表1梯度洗脱表时间min甲醇%0.2%磷酸水溶液%00苷和水仙苷质量浓度范围分别为:0.25mg/L~100.0mg/L、0.15mg/L~600.0mg/L、0.15mg/L~300.0mg/L和0.15mg/L~100.0mg/L。按照8.2.1规定的色谱条件测定,以标准溶液质量浓度为横4GB/T42114—20228.2.3试样溶液的测定按照8.2.1规定的色谱条件,将待测样品溶液(8.1)注入高效液相色谱仪(6.1)中进行测试,根据标准溶液色谱峰的保留时间进行定性。试样溶液中4种黄酮醇的响应值应在标准曲线线性范围内,超过线性范围应稀释后再进行分析,外标法定量。9结果计算与表述9.1木薯叶片中黄酮醇各组分含量试样中木薯叶黄酮醇各组分含量,按式(1)计算。 (1)式中:X;——试样中某一黄酮醇组分含量,单位为毫克每千克(mg/kg);pi——从标准工作曲线得到的试样溶液中各组分的质量浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);V———试样提取液定容体积,单位为毫1000——单位换算系数;9.2木薯叶黄酮醇总含量试样中黄酮醇总含量为各组分之和,按式(2)计算。X=∑X, (2)式中:X——试样中黄酮醇总含量,单位为毫克每千克(mg/kg);X;——试样中某一黄酮醇组分含量,单位为毫克每千克(mg/kg)。9.3结果表示计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留至小数点后一位。10精密度10.1重复性在重复性条件下,获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。10.2再现性在再现性条件下,获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过算术平均值的15%。11检出限和定量限本方法测定黄酮醇的检出限和定量限见表2。5GB/T42114—2022单位为毫克每千克化合物
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