人类疾病动物模型

人类疾病动物模型Animalmodelsofhumandiseases第一节人类疾病动物模型定义和意义第二节人类疾病动物模型的分类第三节免疫缺陷动物模型第四节转基因动物模型第一节：人类疾病动物模型定义人类疾病动物模型(Animalmodelsofhumandiseases)是指在医学研究中，在动物身上建立，或形成类似人类疾病动物和相关材料。通过动物模型直接，或间接反映疾病的发生和发展过程，在了解疾病的基础上开创和改进、优化疾病的治疗。

人类疾病动物模型的意义1.避免直接实验所造成危险。2.临床上平时不易见的疾病可以随时复制。3.增加方法学上的可比性。4.样品易得，实验方法简化。5.有助于了解疾病的本质。1.避免直接实验所造成危险临床上对外伤、中毒、肿瘤等疾病的研究不可能在人体重复进行实验，人体难以承受这些病因所带来的痛苦。动物可以作为人类的替难者，可在认为设计的实验条件下反复实验研究。使用动物模型能克服在人类研究中经常遇到的伦理和社会道德限制，能采用某些不能应用于人类研究的方法和途径，为了实验目的需要还可以损伤动物组织、器官以至处死。纳粹用犯人做传染病试验、绝育试验、犹大族头盖骨的研究、用人皮做装饰品、高空试验、冷冻试验、压力试验、耐高温试验，直至停止呼吸，有的被活体解剖；有的注射致命的斑疹伤寒和黄疽病毒，有的被用于冷冻实验，被浸在水中或者被脱光衣服放在户外雪地里直致冻死；还有的被用来进行毒药弹和糜烂性毒气的试验；用孪生姐妹做人体实验以研究双胞胎之间的细微差别。

日本陆军731部队曾在人体实验中残酷杀害成千上万来自中国，朝鲜，苏联的无辜者，并生产细菌武器，在中国等战场进行使用。1946年至1948年间，卡特勒在危地马拉的监狱里展开了一项秘密人体实验。那期间，监狱囚犯在与妓女发生性关系后身患淋病或感染梅毒。当美方医疗人员认为患者不够多时，会让实验对象“接种”性病病毒。共696名男性和女性接触了梅毒或淋病病毒。实验对象随后接受青霉素治疗。2.临床上平时不易见的疾病可以随时复制放射病，毒气中毒，烈性传染病，战伤等发病率低：遗传疾病，传染病，内分泌疾病潜伏期长：动脉粥样硬化病程长：慢性哮喘，甲亢3.增加方法学上的可比性临床上许多疾病是十分复杂的。病人并非患有一种疾病，有的几种疾病同时并存。即使某单一疾病，不同年龄，性别，体质，遗传，社会因素等，都对疾病发生发展起着一定的影响作用。动物模型，人为设计，遗传背景等各项条件都很清楚，或可以控制，因此可以排除其他影响因素，使得到的结果更加准确，也可单一变换某一因素，使研究的结果更加深入，增加了因素的可比性。4.样品易得，实验方法简化取材方便，简化了试验方法。动物模型，可随时按需要采集各种样品，及时或分批处死动物收集样本，以便更好地了解疾病过程，完成实验目的，这点在临床是不易办到的。5.有助于了解疾病的本质临床上研究疾病的本质带有一定的局限性。同一病原体对人和动物的感染，其症状体征表现可能不完全相同。通过对人畜共患病的比较，可充分认识同一病原体给不同机体带来的各种危害，使研究工作上升到立体的水平来揭示某种疾病的本质。1．相似性：复制的动物模型尽可能接近人类疾病，最好能找到与人疾病相同的动物自发性疾病。

小型猪自发性冠状动脉粥样硬化是研究人类冠心病的良好动物模型犬自发性类风湿关节炎与人类幼年型类风湿性关节炎十分相似兔急性梗阻阑尾炎模型，以往用结扎血管的方法制造模型，后发现无临床意义，改用结扎阑尾的方法

动物疾病模型设计原则

2、重复性：理想的人类疾病动物模型应该是可重复、可标准化的。为增强动物模型复制的重复性，在设计时应尽量选用标准化实验动物，在标准化动物实验设施内完成动物模型复制工作。应尽可能在许多因素上保持一致性，如动物的品种、品系、年龄、性别、体重、健康状况、饲养管理等，试剂和药品的生产厂家、批号、纯度、规格，给药的剂型、剂量、途径、方法，仪器的型号、灵敏度、精确度、范围值，实验者操作技术、熟练程度等方面的因素。3、可靠性:复制的动物模型应力求可靠地反映人类疾病，同时应具备该种疾病的主要症状和体征，并经过一系列检测得以证实。复制方法和症状有因果关系，易自发地出现某些病变的动物不应选用；易产生与复制疾病相混淆的疾病或临床症状者也不宜选用。铅中毒模型，选用大鼠复制动物模型时，大鼠本身易患进行性肾病，容易与铅中毒所致的肾病相混淆；选用蒙古沙鼠就比选用大鼠可靠性好，因为蒙古沙鼠只有铅中毒才会使其出现病变。4、适用性和可控性：供医学实验研究用的动物模型在复制时，应尽量考虑到以后的临床应用和便于控制其疾病的发展，以利于研究的开展。雌激素能终止大鼠和小鼠的早期妊娠，但不能终止人的妊娠。选用大、小鼠作实验性腹膜炎也不适用，因为它们对革兰氏阴性菌具有较高的抵抗力，很难造成腹膜炎。犬腹腔注射粪便滤液的腹膜炎模型。5、易行性和经济性：在复制动物模型时，所采用的方法应尽量做到容易执行和合乎经济原则。灵长类动物复制的疾病模型相似性好，但稀少昂贵。很多小动物也可复制出十分近似的人类疾病模型。它们容易做到遗传背景明确，体内微生物可加控制，模型性状显著且稳定，年龄、性别、体重等可任意选择，而且价廉易得、便于饲养管理，因此应尽量采用。除了在动物选择上要考虑易行性和经济性原则外，在模型复制方法上、指标观察上也要注意这一原则。动物模型局限性1、动物与人种之差异影响模型可靠性2、环境因素与模型复制生活环境、社会环境3、病毒性疾病模型第二节：人类疾病动物模型的分类一.医学动物模型基本分类1．诱发性动物疾病模型(Experimentalanimalmodel)

是指以物理学、化学、生物学等致病手段，人为导致动物组织、器官或整体成为人类疾病动物模型；使其在功能、代谢、形态结构等方面发生改变，即人为地诱发动物产生类似人类疾病模型。

应用：药理学，毒理学，免疫学，肿瘤学和传染病等优点：简便，条件简单，其他因素容易控制，短时间内可大量复制不足：诱发动物模型在某些方面与自然产生的疾病模型有所不同；某些疾病不能用人工方法诱导。

2．自发性动物模型(Spontaneousanimalmodel)

是指不加任何人工诱发，在自然条件下动物自然产生的疾病，或者由于基因突变的异常表现，通过遗传育种保留下来的动物疾病模型。其中包括近交系的肿瘤疾病模型和突变系的遗传性疾病模型。

常用的自发突变模型高血压模型（SHR大鼠）肥胖模型（Zucker大鼠）糖尿病模型GK大鼠肥胖并糖尿病模型（db/db小鼠）优点：在一定程度上减少人为的因素，更接近自然的人类疾病。缺点：目前发现的种类有限。近交系肿瘤模型，因实验动物种属，品系不同，其肿瘤发生类型，机理有所不同疾病动物需要饲养条件要求高，操作技术性强。3．抗疾病型动物模型(Negativeanimalmodel)

是指特定的疾病不会在某种动物身上发生。因此，可借以探讨何种动物对该疾病有天然的抵抗力（东方田鼠）。

4．生物医学动物模型(Biomedicalanimalmodel)

是指以健康动物生物学特征提供与人类疾病相似表现的疾病模型。沙鼠缺乏完整的基底动脉环，左右大脑供血相对独立，是研究中风的理想动物模型。

鹿的正常红细胞是镰刀形的，多年来被用作镰刀形红细胞贫血的研究。

兔胸腔的特殊结构用于胸外科手术研究比较方便。这类动物模型与人类疾病存在着一定的差异，研究人员应加以分析比较。

二、按系统范围分类1．疾病基本病理过程动物模型

是指致病因素在一定条件下作用于动物后，所出现的共同性的功能、代谢和形态结构某些改变的动物模型。这种动物模型的致病因素不是某种疾病所特有的，而是各种疾病都可能共同发生的。是研究疾病机理和药物筛选理想的方法。2．各系统疾病动物模型

是指与人类各系统疾病相应的动物模型，如神经、心血管、呼吸、消化、泌尿等系统疾病相应的动物模型。[A.神经系统]1．大鼠囊状脑动脉瘤结扎大鼠颈总动脉，同时佐以脱氧皮质酮和高渗盐水处理，饲喂含有β氨基丙睛的饲料，复制囊状动脉瘤模型，为研究人类脑动脉瘤与血液动力学的关系，病变的发展及发病机理提供有益的帮助。

2．结扎大鼠中动脉的大鼠卒中模型结扎大鼠大脑中动脉，复制中风模型其优点是能产生非致命性的孤立性病灶损害，可提供长期的行为学和生物化学的研究。3.维生素A缺乏引起的兔脑积水模型选用雌性幼兔，饲以限制维生素A饲料，诱发兔脑积水。该模型优点是易复制，易收集胎兔和新生兔的标本样品，通过血清维生素A的监测，可控制血清中维生素A的浓度，有利进行生化和形态学的研究。[B.心血管系统]1.动脉粥样硬化长期以来用兔饲以高脂肪、高胆固醇饲料诱发动脉粥样硬化的动物模型。给小型猪饲喂高脂肪、胆固醇饲料诱发动脉粥样硬化病变，其解剖部位，病理特点均与人类相似，有时还伴有心肌梗塞，较易饲养管理，小型猪是一种很好的模型动物。

2．心肌缺血和心肌梗塞①电刺激法：雄性成年免麻醉后，用弱、强刺激(弱为0.8～1.6毫安，强为4～6毫安)交替刺激右侧下丘脑背侧核，复制心肌缺血动物模型；②药物法；给大鼠、兔注射异丙肾上腺素，犬静脉给予麦角新硷制备冠状动脉痉挛模型；③冠状动脉阻断法：应用大鼠、犬麻醉后,分离冠状动脉套上自制的冠状动脉压迫环，制备心肌缺血和心肌梗死模型。

3．高血压

目前，应用最广泛的是日本学者培育的突变系SHR大鼠。该鼠自发性高血压的变化与人类相似，并且可产生脑血栓、梗塞、出血、肾硬化、心肌梗死和纤维化等变化。在SHR的基础上，又培育了两个亚系SHRSP和SHRSR，前者出生后，除出现严重高血压外,90％以上患脑卒中(脑出血和脑栓塞)；SHRSR则是抗脑卒中的自发性高血压大鼠。[C.呼吸系统]

1．用异性蛋白注射致豚鼠过敏症动物模型，包括支气管痉挛、哮喘和过敏性休克。1974年Petterson和Kelly发现狗可以对空气中过敏原(草、树、灰尘和猫抗原)引起过敏症的模型。主要表现为豚草花粉病、患犬出现眼结膜炎、鼻炎、重度搔痒性皮炎，血液内有抗脉草抗原的循环抗体，相当于人体免疫球蛋白IgE。这些是临床研究和生产检定过敏症的动物模型。2．慢性支气管炎和肺炎

70年代初学者应用SO2、烟雾、甲醛蒸气、辣性气体等制备诱发性猴、免、大鼠、小鼠的慢性支气管炎动物模型。有人先后将木瓜蛋白酶，菠萝蛋白酶，胰蛋白酶，蛋白溶解酶分别注入兔，大鼠，地鼠气管内诱发肺气肿。[D.消化系统]1．先天性高胆红素血症模型：已发现非洲啮齿类胃溃疡、地鼠的肝淀粉样变、羊和大鼠的先天性高胆红素血症动物模型。尤其是South-downe变种羊，因其先天性肝脏摄取有机阴离子缺陷(胆红素)，造成血中未结合的胆红素增高。2．小牛轮状病毒性肠炎模型：轮状病毒性肠炎对人类及许多动物都能引起感染，如小鼠、兔、羊、猪等。在实验中发现人类与动物可交叉感染，小牛轮状病毒性模型有利于生产大量血清与抗原，便于手术、粪便特征容易监测，是传染病学、生理学研究较好模型。

3．豚鼠溃疡性结肠炎模型：豚鼠口服变质角叉菜(从红海藻中提取)溶液，产生溃疡性结肠炎、临床表现与人类溃疡性结肠炎相似，是研究溃疡性的发病机理、综合症对全身影响，和治疗方法的模型。[E.泌尿系统]1.诱发性肾小球肾炎模型：给兔、猫、狗注射异种抗肾血清、细菌抗原与肾组织复合抗原，以及抗原抗体诱发动物肾小球肾炎模型。2.自发性肾脏疾患模型：如芬兰的Landrace羊羔中有一种发展迅速致死的肾小球肾炎，伴有肾小球免疫荧光复合物的沉积。狗、猫自发的免疫介导肾小球肾炎动物模型。

3.继发性肾炎模型：

小鼠淋巴脉络膜炎、乳酸脱氢酶、鼠类的白血病病毒感染等均能复制继发性肾炎。[F.内分泌与代谢](1)手术糖尿病模型：

自从德国的WonMening将犬作胰腺全切除术，造成糖尿病后，陆续报道猫、大鼠、兔、猪、猴等切除80％一90％胰腺，并受到高糖饮食刺激后，引起永久性糖尿病。(2)化学物质损伤胰岛细胞：①链脲佐菌素(STZ)一次腹腔或静脉注射30一100mg／kg几天后可使狗、大鼠等动物产生永久性高血糖。②四氧嘧啶(A11oxan)一次静脉或腹腔注射30—150mg／kg，可复制糖尿病模型，但可造成肝、肾组织的损害，而且较多的资料证明，它在生理上不同于人类所患的糖尿病。③环丙庚哌,给大鼠连续给药4周后，可见高血糖症状。④鼠脑炎、心肌炎(EMC)病毒M型变异可诱发若干品系的成年小鼠糖尿病，如DBA／2、CD-l、C3H、C57BL、BALB／cj。

(3)遗传性及自发性糖尿病：①kk小鼠由日本杂种小鼠交配得来的遗传性糖尿病小鼠，其生物特性类似ob小鼠，属先天遗传缺陷性小鼠。②C57BL／ks小鼠是一种具有db基因的近交小鼠，其表现多食肥胖及血糖升高，类似人类中年肥胖合并糖尿病③中国地鼠(黑线仓鼠)有50％自发产生糖尿病，属多基因遗传，病鼠耐糖曲线类似人类Ⅱ型非胰岛素依赖性)糖尿病。④BBWistar系大鼠：是一种典型自发遗传I型(胰岛素依赖性)糖尿病的动物模型。其临床表现为多饮、多食、体重下降、高血糖及酮尿。三、中医证候动物模型中医动物模型经30余年的研究，已形成独特的体系。为中医基础病理学、基础药理学研究提供了重要依据。

1960年发现,过量使用肾上腺皮质激素的小鼠表现为阳虚征象：体重下降、萎靡、耐寒力低。1963年又发现用助阳药(附子、肉桂、淡众蓉、仙灵脾)能治疗这种状态。1964年，易宁育用六昧地黄汤治疗类似阴虚的肾性高血压大鼠。1977年，上海中医学院用肾上腺皮质激素和甲状腺，加利血平复制小鼠阳虚、阴虚模型并用助阳药、滋阴药治疗。1979年，张启元尝试用灌喂大黄煎剂“泻下伤脾”，建立小鼠脾虚证模型。1988年，由杨云主持研究的“劳倦和饥饱所致大鼠脾虚证模型”获得国家中医药管理局科技进步二等奖。

第三节：免疫缺陷动物模型

免疫缺陷动物是指由于先天性遗传突变，或用人工方法，培育一种或多种免疫功能缺陷的动物。免疫缺陷动物开创了肿瘤学、免疫学、细胞生物学的新的里程碑。分类：按免疫功能缺陷的种类常分为:1.T-淋巴细胞功能缺陷动物：裸小鼠、裸大鼠、裸牛、裸豚鼠等。2.B-淋巴细胞功能缺陷动物：CBA/N小鼠、Arabin马和Quarter马等马属动物。3.NK细胞功能缺陷动物：Beige小鼠。4.联合免疫缺陷动物：Scid小鼠等其他人工定向培育的多种免疫功能缺陷动物。常见的免疫缺陷动物1.裸小鼠是指先天性无胸腺，且无被毛的小鼠,简称为裸小鼠。其突变基因为裸基因,符号为:nu,是一个隐性突变基因,位于小鼠的第11号染色体上。目前，此基因已导入到不同品系的小鼠中,常见的有BALB/c-nu、C3H-nu、C57BL/6-nu等。裸鼠的解剖生理特点：

①毛囊发育不良，外观上看几乎没有被毛，故称“裸鼠”；②无胸腺，仅有胸腺残迹或异常的胸腺上皮。故不能分泌胸腺素，不能使T细胞正常分化，而T细胞是移植排异的主要细胞。Ｂ细胞基本正常但功能欠佳。有较高的NK细胞数量和活性。③因为IgG的产生需要T细胞和巨噬细胞的参与，其免疫球蛋白主要是IgM，只有极少量的IgG。④自发肿瘤现象罕见，可能与NK细胞的活性高有关。⑤裸鼠易患鼠肝炎和病毒性肺炎。⑥纯合裸鼠母性极差，且受孕率低，乳房发育不良。通常以纯合雄鼠与带有nu基因的杂合雌鼠（♀nu/+

♂nu/nu）可获1/2裸鼠。⑦裸鼠需饲养在屏障环境中。裸鼠的应用

（1）肿瘤学。（肿瘤移植方法脑内、皮下、肾包膜下）（2）微生物学（麻风杆病）。（3）免疫学（胸腺功能恢复）。（4）寄生虫学（腹腔内接种卡氏肺囊虫感染率高

）（5）组织移植和器官再造。2.裸大鼠

1953年，英国科学家首次在大鼠中发现一种外观与裸小鼠相似，只是被毛不像裸小鼠那样全无，通过解剖和免疫学检查发现其也是无胸腺、缺乏T细胞功能，B细胞功能正常，细胞活力增强，繁殖方式与裸小鼠相同，且能接受异种组织和细胞移植。3.Beige（bg）小鼠

为NK细胞活性缺陷的突变系小鼠，bg是隐性突变基因，位于第13号染色体上。纯合的小鼠（bg/bg）被毛完整，但毛色变浅，耳廓和尾尖色素很淡。这种小鼠其内源性NK细胞功能缺陷。纯合bg基因降低杀菌活性。bg对化脓性细菌感染非常敏感，对各种病原因子也都较敏感，bg小鼠必须在屏障环境中才能较好的生存。繁殖时可采用纯合子的亲本。4.SCID小鼠

SCID小鼠的全称为“重症联合免疫缺陷”小鼠。其突变点在16号染色体上，为单基因突变，突变符号为scid，当其纯合时，性状表现为淋巴细胞抗原受体基因编码顺序异常，造成T、B淋巴细胞不能分化为特异性的淋巴细胞，目前已有多种不同品系的SCID小鼠。

SCID小鼠的生物学特征：

外观与普通小鼠无异样，但其胸腺、脾、淋巴结等免役器官的重量不到正常小鼠的30%。其胸腺多为脂肪组织包围，没有皮质结构，仅残存的髓质。外周白细胞较少，淋巴细胞仅占总数的10-20%（正常小鼠为70%）。饲养环境

SCID小鼠需在屏障环境（空气洁净度万级以下）中，方能存活一年以上。其繁殖生产，以近交系繁殖方式进行，产子率和离乳率均低于正常小鼠。5.Motheaten小鼠

突变基因（me）位于第6号染色体上，出生后两天内即可有病变现象，表现为皮肤脓肿，有严重的联合免疫缺陷现象。对胸腺依赖和不依赖抗原均无反应，细胞毒和自然杀伤细胞活性低下。此小鼠对于先天性早期免疫缺陷和某些自身免疫疾病的研究有着重要的价值。6.人工定向培育的多联免疫缺陷型小鼠

目前，常见的三种小鼠的三个隐性免疫基因，即NK细胞缺陷的Beige基因、T细胞缺陷的nu基因和B细胞缺陷的Xid基因。可将它们杂交-回交，筛选出T、B、NK细胞三联免疫缺陷小鼠。这种小鼠对于实验性的肿瘤移植和免疫功能的研究有着极其重要的作用。

三种免疫缺陷小鼠肿瘤移植实验转基因动物的概念

所谓转基因动物就是把外源性目的基因导入动物的受精卵或其囊胚细胞中，后改用注入受精卵的任何一个前核，并在细胞基因组中稳定整合，再将合格的重组受精卵或囊胚细胞筛选出来，采用借腹怀孕法寄养在雌性动物（fostermother）的子宫内,使之发育成具表达目的基因的胚胎动物,并能传给下一代。这样，生育的动物为转基因动物。这类动物由于外源性目的基因的稳定存在而赋于子代动物个体。转基因动物技术的主要步骤获取外源目的基因外源目的基因导入生殖细胞或胚胎干细胞选择携带目的基因的细胞，选择体外培养系统和宿主动物转基因胚胎的发育及鉴定筛选所得的转基因动物目的基因的制备目的基因的制备：化学合成法PCR扩增法

基因构件：目的基因、启动子和标记基因（lacZ、荧光素酶基因、EGFP)、载体载体:病毒、质粒、噬菌体等

克隆扩增：质粒酶切、连接、转染、克隆、扩增、提取

真核表达载体目的基因的导入脂质体介导法

·

脂质体是磷脂在水中形成的一种由脂类双分子层围成的囊状结构

·

形成囊状结构可将DNA包在其中

·

带有外源DNA的脂质体通过细胞的内吞作用进入受体细胞，达到基因转移的目的电转移法

受体细胞与外源DNA按一定比例混合后，放入电脉冲槽中，经用脉冲电压刺激，外源DNA即可进入细胞（或受精卵）目前应用于生产转基因动物的方法

-原核显微注射生殖细胞载体反转录病毒转染体细胞核移植胚胎干细胞技术应用较早并且被公认和成熟的技术最具应用潜力的并且也是目前发展最快的技术原核注射

显微注射法是建立得最早的转基因方法，也是目前使用最为广泛、最为有效的方法。其所具有的优点是:基因的转移率高，整合效率可达30%:可直接用不含有原核载体DNA片段的外源基因进行转移;外源基因的长度不受限制，可达几百kb;常常能得到纯系动物;实验周期相对比较短。外源基因基因微注射移植受精卵小鼠出生转基因鼠的检测繁殖后代A:准备注射的原核清晰受精卵B:注射过程C:注射后的受精卵D:吸取基因注射液转GFP绿色荧光胚胎转GFP绿色荧光胚胎生殖细胞载体技术有体外和体内转染生殖细胞的两种方法，前者又包括精子载体法、卵子载体法、胞浆内精子注射法等。

精子载体法是将成熟的精子与外源DNA的载体共同孵育，使精子携带外源DNA，受精后外源DNA整合至染色体中。

此法理论上是可行的、也有成功的先例，但成功率不高、效果不稳定，有待继续探索、完善。

反转录病毒转染将目的基因重组到反转录病毒RNA载体上,制成高滴度的病毒颗粒,人为感染着床前或着床后的胚胎,也可以让胚胎与能释放反转录病毒的单培养层细胞共孵育以达到感染的目的。反转录病毒RNA进入寄主细胞后,被反转录为DNA,并在整合酶和其末端特殊核酸序列作用下整合到寄主细胞的基因组进行表达和遗传,得到转基因动物。目的基因逆转录病毒

卵母细胞成熟卵母细胞精子导入感染体外受精

囊胚受体动物子宫

胚胎移植转基因动物妊娠体细胞核移植体细胞核移植技术是先把外源基因整合到供体细胞上,然后将供体细胞通过显微操作的方法注射到去核卵母细胞中,组成重构体,通过激活使其发育成转基因重构胚胎，再把其移植到假孕母体,待其妊娠、分娩后便可得到转基因克隆猪。此法具有相对较大的优越性:转基因效率高,约是显微注射法的2倍；可对外源基因在供体细胞上是否整合、整合状况及整合位点预先进行准确鉴定和评估；也可以提前预测基因的表达情况；不存在位置效应且能大大节省供体和受体动物的数量及费用。

目的基因动物胎儿成纤维细胞卵母细胞受体导入注核

囊胚受体动物子宫

胚胎移植转基因动物妊娠成熟卵母细胞去核核移植获得的表达红色荧光蛋白的兔克隆胚

左图为光镜视野照片，右图为激发荧光的照片。核移植获得的表达绿色荧光蛋白的兔克隆胚

2007克隆出世界首例转基因克隆兔TransgenicRes

18(2):227-35,

2009Apr

(TRAGonline)doi:10.1007/s11248-008-9227-y世界首例转基因克隆兔在沪诞生(图)

2007-12-1408:50来源：解放日报

实验首先取兔耳组织培养获得所需要的成纤维细胞，经过３～４次传代，再将一种从特殊水母中提取的绿色荧光蛋白基因转染到兔子成纤维细胞中，再挑选出发绿色荧光的转基因体细胞，将其细胞核移植到成熟的去核兔子卵母细胞中，最终构成了转基因胚胎。胚胎经过手术，移植入“代孕兔”体内。经过３０～３１天孕期，通过给代孕兔剖腹产获得幼兔，再经人工辅助哺育，顺利断奶等一系列的过程，最终成功获得了这只转基因克隆兔。转基因克隆兔由于基因与原来兔子完全一样，加上有发绿光的标记基因，便于鉴定，可以尝试转入或转出某种基因，研究特定基因和相关疾病