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文档简介

1310本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定平菇液体菌种制备技术规范GB/T4789.28食品微生物学检验培养基和试剂的质NY/T528食用菌菌种生产技术规程3.1在生物发酵罐中通过深层培养(液体发酵)技术生产的液体形态的食用菌菌3.2经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物，以玻璃试管为培养容器和3.33.43.53.6单位时间通入发酵罐中无菌空气体积与发酵罐体3.74基本要求4.2场所要求4.3厂房及设施要求厂房设计应符合NY/T528要求。洁净车间应设有多功能实验室、菌种保藏室、无菌接种室、摇瓶4,4生产设备要求5.3.1容器5.3.4灭菌将分装好的摇瓶放入灭菌锅内，采用高压灭菌，灭菌温度控制在121℃~122℃,维持25min～305.3.5接种接种结束后封口，放入恒温箱中23℃~25℃静置培养24h，然后置于摇床上震荡培养，摇床温度体积不低于整个培养液体积的80%，均匀悬浮于液体培养基中5.4发酵罐液体菌种生产生产用水应符合GB5749要求，培养基质应符合NY/T528要求，玉米粉过30目筛。其中，培养基配），用温水把玉米粉等原料搅拌均匀，混合后加入罐体，装液量为罐体容量的60%～70%，加入0.4‰泡敌做为消泡剂，通入空气鼓气搅拌1min～2min，混合均匀，拧紧上料口盖。发酵罐通入蒸汽加热。待罐压达到0.05MPa时，缓慢打开排气阀降压至0MPa排净冷空气，关闭排气其他与外界有流通的阀门开口如取样口、排污口、接种口等均要通蒸汽5.4.5冷却灭菌结束，关闭空气过滤器灭菌阀与排气阀，缓慢打开空气过滤器排水阀降压至0MPa，夹层通入冷水降温；同时缓慢打开发酵罐排气阀降压，待压力接近0.01MPa时通过空气过滤器向培养层内通入无5.4.6接种的火焰圈套在接种口上，使发酵罐压力为0.01MPa，并有气体排出。点燃火焰圈，在火焰保护下将菌种倒入发酵罐接种口，盖上接种口盖子，去掉火焰圈，罐压0.03MPa～0.05MPa，培养温度控制在23℃~25℃,培养6d～7d。培养液澄清透明，菌丝球、菌丝片段均匀悬浮于液体中，不分层，直径小于3.5mm有平菇液体培养时特有的香气，无酸、臭等异味，发酵罐排气口气可见平菇菌种液体培养中特有的菌丝形态，菌丝粗无无——形态学观察：主要是通过肉眼观察菌球形态，包括菌液色泽、菌液形态、通过鼻嗅检测菌液min，称重。——霉菌检验：按照无菌操作从取样阀取少量疑有霉菌污染的培养液，接种于GB/T4789.28中规定的PDA培养基中，置于35℃~37℃恒温培养48h，采用显微镜和感官观察菌丝生长状况和有无杂菌污染；若出现白色以外的杂色者，或有异味者为霉菌污染物，必要时进行——细菌检验：按照无菌操作从取样阀取少量疑有细菌污染的培养液，接种于GB/T4789.

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