生物化学与分子生物学：生化专题

生化专题

基因表达调控一、基因表达的概念基因组(genome):一个细胞或病毒所携带的全部遗传信息或整套基因。基因表达(geneexpression)：基因经过转录、翻译，产生具有特异生物学功能的蛋白质分子的过程。全部表达都会翻译么？tRNArRNA

2007A-168.基因组是指A、以转录组学为基础的研究领域B、一种生物体具有的所有遗传信息的总和C、研究基因的结构,功能及表达产物的学科领域D、包过转录组学和蛋白质组学等内容的科学领域答案：B解析：一个细胞或病毒所携带的全部遗传信息或整套基因称为基因组。2002A-29．下列关于“基因表达”概念的叙述，错误的是

A．基因表达具有组织特异性B．基因表达具有阶段特异性

C．基因表达均经历基因转录及翻译过程

D.某些基因表达产物是蛋白质分子

E.有些基因表达水平受环境变化影响答案：C

基因表达的多级调控基因激活转录起始转录起始转录后加工mRNA降解

蛋白质降解等蛋白质翻译翻译后加工修饰2009A-38.基因调控的基本控制点是A.mRNA从细胞转运到细胞质B.转录起始C.转录后加工D.蛋白质翻译及翻译后加工答案：B二、基因表达的时间性及空间性（一）时间特异性按功能需要，某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生，称为基因表达的时间特异性。多细胞生物基因表达的时间特异性又称阶段特异性。从侵入细菌到溶菌不同阶段，噬菌体DNA的表达表现为：A、细胞特异性B、组织特异性C、空间特异性D、阶段特异性答案：D（二）空间特异性在个体生长全过程，某种基因产物在个体按不同组织空间顺序出现，称之为基因表达的空间特异性。基因表达伴随时间顺序所表现出的这种分布差异，实际上是由细胞在器官的分布决定的，所以空间特异性又称细胞或组织特异性。三、基因表达的方式按对刺激的反应性，基因表达的方式分为：（一）组成性表达:某些基因在一个个体的几乎所有细胞中持续表达，被称为管家基因。管家基因较少受环境因素影响，在个体各个生长阶段的大多数或几乎全部组织中持续表达被视为组成性基因表达。2010A-37．组成性基因表达的正确含义是A．在大多数细胞中持续恒定表达

B．受多种机制调节的基因表达c．可诱导基因表达D．空间特异性基因表达答案：A（二）诱导和阻遏表达在特定环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，这种基因称为可诱导基因。可诱导基因在特定环境中表达增强的过程，称为诱导。如果基因对环境信号应答是被抑制，这种基因是可阻遏基因。可阻遏基因表达产物水平降低的过程称为阻遏。

基因工程在体外将目的DNA片段与能自主复制的载体连接，形成重组DNA分子，进而在受体细胞中复制、扩增，从而获得单一DNA分子的大量拷贝。工具酶功能限制性核酸内切酶识别特异序列，切割DNADNA连接酶使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接碱性磷酸酶切除末端磷酸基反转录酶合成cDNA；替代DNA聚合酶I进行填补，标记或DNA序列分析末端转移酶

3´羟基末端进行同聚物加尾DNA聚合酶Ⅰ合成双链cDNA分子或片段连接；缺口平移制作高比活性探针；DNA序列分析；填补3´末端Klenow片段具有完整DNA聚合酶I的5

3

聚合、35

外切活性。常用于cDNA第二链合成，双链DNA3末端标记等多核苷酸激酶催化多聚核苷酸5´羟基末端磷酸化，或标记探针2001X-146．重组DNA技术中常用到的酶是

A．限制性核酸内切酶B．DNA连接酶C．DNA解链酶D．反转录酶答案：ABD

重组DNA技术操作的主要步骤载体质粒噬菌体病毒目的基因（外源基因）基因组DNA

cDNA人工合成PCR产物限制酶消化开环载体DNA目的基因连接酶重组体转化体外包装，转染带重组体的宿主筛选表型筛选酶切电泳鉴定菌落原位杂交2005X-136.在分子克隆中目的DNA可来自:A.原核细胞基因组DNAB．真核细胞基因组DNAC．PCB合成的DNAD．真核细胞mRNA反转录获得的cDNA答案：ABCD2009X-161、重组DNA技术中，可用于获取目的基因的方法有：ABA、化学合成法B、PCRC、WesternblottingD、基因敲除答案：AB1.化学合成法已知氨基酸序列推测DNA序列2.基因组DNA文库限制性核酸内切酶：是识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。常见的是II型。Ⅱ类酶识别序列特点—回文结构GGATCCCCTAGG2004A-31.能识别DNA特异序列并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶是A.核酸外切酶B.核酸内切酶C.限制性核酸外切酶D.限制性核酸内切酶E.核酸末端转移酶答案：D2011A-38．下列选项中符合Ⅱ类限制性内切核酸酶特点的是:AA．识别的序列是回文结构

B．没有特异酶解位点C.同时有连接酶活性D．可切割细菌体内自身DNA答案：A限制性内切酶识别序列不相同，切割DNA后产生相同粘性末端称为配伍未端。3.

cDNA文库4.聚合酶链反应PCR2012A-38.可以利用逆转录酶作为工具酶的作用是DA.质粒的构建B.细胞的转染C.重组体的筛选D.目的基因的合成重组DNA技术主要步骤载体质粒噬菌体病毒目的基因（外源基因）基因组DNA

cDNA人工合成PCR产物限制酶消化开环载体DNA目的基因连接酶重组体转化体外包装，转染带重组体的宿主筛选表型筛选酶切电泳鉴定菌落原位杂交载体：供插入目的基因并导入宿主细胞表达或复制的工具克隆载体：插入外源DNA序列被扩增特意设计的载体，包括质粒、噬菌体、病毒DNA、酵母人工染色体质粒-小型环状双链DNA分子克隆载体具备条件：1.自主稳定复制2.多克隆位点：识别3.遗传标记便于筛选-抗生素4.分子量小，拷贝多2003X-136、下列关于质粒载体的叙述，正确的是ABCDA、具有自我复制能力B、有些质粒常携带抗药性基因C、为小分子环状DNAD、含有克隆位点答案：ABCD2011A-39作为克隆载体的最基本条件是A、DNA分子量较小B、环状双链DNA分子C、有自我复制功能D、有一定遗传标志答案：C2006A-33．下列DNA中一般不用作克隆载体的是BA．质粒DNAB．大肠杆菌DNAC.病毒DNAD．噬菌体DNAE．酵母人工染色体答案：B2002A-30．在基因工程中将目的基因与载体DNA拼接的酶是

A．DNA聚合酶I

B．DNA聚合酶III

C．限制性内切核酸酶

D．DNA连接酶E.反转录酶

答案：D重组体导入受体细胞的方法：转化：质粒转入大肠杆菌物理生化不分家转导：噬菌体导入细胞半导体转染：重组DNA导入真核细胞病毒（DNA）感染将重组DNA分子导入受体细胞的方法有：BCDA、接合B、转化C、转导D、转染答案：BCD1995X140．从带有遗传信息的mRNA构建成DNA重组体，要利用ABCDA．质粒B．限制性核酸内切酶C．DNA连接酶D．反转录酶答案：ABCD解析：重组过程为mRNA在反转录酶作用下合成与mRNA互补的cDNA(目的DNA)；组装到质粒中去；借限制性核酸内切酶将质粒切开，利用DNA连接酶将质粒DNA与DNA连接起来。重组体筛选：1.直接选择法(1)抗药性标记选择(2)标志补救：α互补筛选(3)分子杂交法：原位杂交、Southern印迹2.免疫学方法如免疫化学方法及酶免检测分析等2010X-160．DNA重组技术中，用来筛选重组体的方法有A．标志补救B．分子杂交C．特异性抗体与产物结合

D．紫外分光光度计分析答案：ABC基因诊断与基因治疗GeneticDiagnosisandGeneTherapy基因治疗：将某种遗传物质转移到患者细胞内使其发挥作用，以达到治疗疾病目的的方法。基本方法：（2011、2013年已考）1、基因矫正2、基因置换3、基因增补（主要）4、