学习情境二模块5 有毒有害物质检测

模块五有毒有害物质检测

单元1脲酶活性测定粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

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1．样本筛（孔径200μm);2．酸度计（精度0.02pH，附有磁力搅拌器和滴定装置）;3．恒温水浴（可控温30℃±0.5℃);4．试管（直径18mm，长150mm，有磨口塞子）;5．精密计时器；6.粉碎机（粉碎时应不生强热）；7.分析天平（感量0.1mg）；8.移液管（10mL）。一、准备仪器粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

1．尿素；2．磷酸氯二钠3．磷酸二氢钾：4．尿素缓冲溶液（pH6.9~7.0)，称取4.45g磷酸氢二钠和3.40g磷酸二氢钾溶于水并稀释至1000mL，再将30g尿素溶在此缓冲溶液中，可保存1个月。5．盐酸标准溶液：浓度为0.1mol/L，按GB601标准溶液制备方法的规定配制；6．氢氧化钠标准溶液，浓度为0.1mol/L，按GB601标准溶液制备方法的规定配制：7．甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：0.1％甲基红乙醇溶液和0.5％溴甲酚绿乙醇溶液等体积混合，在阴凉处保存期为3个月。二、准备试剂和溶液粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

1、试样中脲酶活性测定称取约0.2g已粉碎的试样，准确至0.1mg，加入试管中，活性很高的试样只称0.05g。移入10mL尿素缓冲溶液，立即盖好试管并剧烈摇动，置于30℃±0.5℃恒温水浴中，准确计时保持30min。即刻移入10mL盐酸标准溶液，迅速冷却到20℃。将试管内容物全部转入50mL烧杯，再用20mL水冲洗试管2次，立即用氢氧化钠标准溶液滴定至酸度计呈现pH4.7。如果选用指示剂，试管中内容物全部转入250mL锥形瓶中，滴加8~10滴混合指示剂，以0.1mol/L氢氧化钠标准液滴定至蓝绿色为终点。记录氢氧化钠溶液消耗量。三、测定步骤粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

2．空白试验移取10mL尿素缓冲液和10mL盐酸标准溶液于试管中。称取与上述试样量相当的试样，准确至0.1mg，迅速加入此试管中。立即盖好试管并剧烈摇晃。将试管置于30℃±0.5℃的恒温水浴，同样准确保持30min，冷却至20℃，将试管内容物全部转入烧杯，用5mL水冲洗2次，并用氢化钠标准溶液滴定至酸度计呈现pH4.7。如果选用指示剂，试管中内容物全部转入250mL锥形瓶中，滴加8~10滴混合指示剂，以0.1mol/L氢氧化钠标准液滴定至蓝绿色为终点。记录氢氧化钠溶液消耗量。三、测定步骤粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

四、分析测定结果粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

四、分析测定结果模块五有毒有害物质检测

单元2亚硝酸盐检测粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

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1．四硼酸钠饱和溶液；称取25g四硼酸钠溶于500mL温水中，冷却后备用；2.106g/L亚铁氰化钾溶液：称取53g亚铁氰化钾溶于水，加水稀释至500ml;3.220g/L乙酸锌溶液：称取110g乙酸锌，溶于适量水和15mL冰乙酸中，加水稀释至500mL;4.5g/L对氨基苯磺酸溶液：称取0.5g对氨基苯磺酸，溶于10％盐酸中，边加边搅，再加10％盐酸稀释至100mL，贮于暗棕色试剂瓶中，密闭保存，一周内有效；一、准备试剂粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

5.1g/LN-1-奈乙二胺盐酸盐溶：称取0.1gN-1-奈乙二胺盐酸盐，用少量水研磨溶解，加水稀释至100mL，贮于暗棕色试剂瓶中密闭保存，一周内有效；6.5mol/L盐酸溶液；量取445mL盐酸，加水稀释至1000ml;7.亚硝酸钠标准贮备液：称取经115℃±5℃烘至恒重的亚硝酸钠0.3000g，用水溶解，移入500mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于400μg亚硝酸根离子；8．亚硝酸钠标准工作液；取5.00mL亚硝酸钠标准贮备液，置于200mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于10μg亚硝酸根离子。一、准备试剂粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

1．分光光度计（有10mm比色池，可在538nm处测量吸光度）;2．分析天平（感量0.0001g);3．恒温水浴锅；4．实验室用样品粉碎机或研钵;5．容量瓶（50mL（棕色）、100mL、150mL、500mL);6．烧杯（100mL、200mL、500mL);7．量简（100mL、200mL、1000mL);8．长颈漏斗（直径75~90mm);9．吸量管（1mL、2mL、5mL);10．移液管（5mL、10mL、15mL、20mL)。二、准备仪器设备粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

1．试样的选取与制备采集具有代表性的饲料样品，至少2kg，四分法缩分至约250g，磨碎，过1mm孔筛，混匀，装入密闭容器，防止试样变质，低温保存备用。2．试液制备称取约5g试样，精确到0.001g，置于200mL烧杯中，加约70mL

温水（60℃±5℃）和5mL

四硼酸钠饱和溶液，在（85℃±5℃）水浴上加热15min，取出，稍凉，依次加入2ml亚铁氰化钾溶液、2mL乙酸锌溶液，每一步须充分搅拌，将烧杯内溶液全部转移至150ml容量瓶中，用水洗涤烧杯数次，并入容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，静置澄清，用滤纸过滤，滤液为试液备用。三、测定步骤粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

3．标准曲线绘制吸取0mL

、0.25mL

、0.50mL、1.00mL

、2.00mL、3.00mL亚硝酸钠标准工作液，分别置于50mL柠色容量瓶中，加水约30mL，依次加入2mL对氨基苯磺酸溶液、2ml盐酸溶液，混匀，在闭光处放置3~5min，加入2mLN-1-茶乙二胺盐酸盐溶液，加水稀释至刻度，混匀，在闭光处放置15min，以0mL亚硝酸钠标准工作液为参比，用10mm比色池，在波长538nm处，用分光光度计测其他各溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，各溶液中所含亚硝酸根离子质量为横坐标，绘制标准曲线或计算回归方程。4．试样测定准确吸取试液约30mL，置于50mL棕色容量瓶中，从“依次加入2mL对氨基苯磺酸溶液、2mL盐酸溶液”起，按测定步骤3的方法显色和测量试液的吸光度。三、测定步骤粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

四、分析测定结果粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

2．结果表示（1）每个试样取2个平行样进行测定，以其算术平均值为结果；（2）结果表示到0.1mg/kg。3．重复性（1）同一分析者对同一试样同时或快速连续地进行两次测定，所得结果之间的差值；（2）在亚硝酸盐含量小于或等于1mg/kg时，不得超过平均值的50%;（3）在亚硝酸盐含量大于1mg/kg时，不得超过平均值的20%。四、分析测定结果

单元3酸价及过氧化值检测

任务一过氧化值的测定粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

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1．碘化钾；2．三氯甲烷；3．冰乙酸；4．硫代硫酸钠；5．饱和碘化钾：称取14g碘化钾，加10mL水溶解，必要时微热使其溶解，冷却后贮于棕色瓶中；6．三氯甲烷-冰乙酸混合液：量取40mL三氯甲烷，加60mL冰乙酸，混匀；7．硫代硫酸钠标准滴定溶液［c(Na2S2O3)=0.002mol/L];8．淀粉指示剂（10g/L）称取可溶性淀粉0.5g，加水少许，调成糊状，倒入50mL沸水中调匀，煮沸。临用时现配。一、准备试剂粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

称取2.00~3.00g混匀（必要时过滤）的样品，至于250mL碘量瓶中，加30mL三氯甲烷-冰乙酸混合液，使样品完全溶解。加入1.00mL饱和碘化钾溶液，紧密塞好瓶盖，并轻轻振摇0.5min，然后在暗处放置3min。取出加100mL水，摇匀，立即用硫代硫酸钠标准滴定溶液滴定，至淡黄色时，加1mL淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失为终点。同时做试剂空白试验。二、测定步骤粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

三、分析计算结果粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

2．结果的表示与重复性报告算术平均值的2位有效数字。两平行样结果之差值不得大于平均值的10%，即相对相差≤10%。3．注意事项（1）过氧化物值（POV）可用100g油脂析出碘的质量（g）或毎千克油脂析出碘的毫克当量（meq）来表示。其换算关系如下：

POV(meq/kg)=POV×78.8我国采用100g油脂析出碘的质量（g）表示过氧化物值。（2）固态油样可微热溶解，并适当多加溶剂。（3）硫代硫酸钠溶液不稳定，每次滴定时应准确标定其浓度。三、分析计算结果

单元3酸价及过氧化值检测

任务二酸价的测定粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

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1．乙醚；2.95％的乙醇；3．氢氧化钾；4.乙醚—乙醇混合液（2+1,V+V)，用氢氧化钾溶液（3g/L）中和至对酚酞指示液呈中性；5.0.05mol/L氢氧化钾标准滴定溶液，取5.6g氢氧化钾溶于1000mL煮沸后的冷却的蒸馏水中，此溶液浓度约为0.lmol/L。然后用此溶液稀释成0.05mol/L氢氧化钾标准地滴定溶液；6．酚酞指示液10g/L乙醇溶液。一、准备试剂粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

二、准备仪器设备1．碱式滴定管（25mL);2．锥形瓶（250mL);3．分析天平。三、测定步骤准确称取3.00~5.00g样品，置于三角烧瓶中，加入50mL中性乙醚—乙醇混合液，振摇使油样溶解，必要时可置热水中，温热促其溶解。冷至室温，加入酚酞指示液2~3滴，以氢氧化钾标准滴定溶液（0.05mol/L）滴定，至初现微红色，且30s内不退色为终点。粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

四、分析测定结果模块五有毒有害物质检测

单元4棉籽饼粕中游离棉酚的检测粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

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1．异丙醇；2．正已烷；3．冰乙酸；4．苯胺（C6H5NH2)：如果测定的空白试验吸收值超过0.022时，在苯胺中加入锌粉进行蒸馏，弃去开始和最后的10％蒸馏部分，放入棕色玻璃瓶内贮存在（0℃~4℃）冰箱中，该试剂可稳定几个月；5.3-氨基-1-丙醇（H2NCH2CH2OH);6．异丙醇-正己烷混合溶剂（6：4)(V:V）;7．溶剂A；量取异丙醇-正己烷混合溶剂约500mL、3-氨基-1-丙醇2mL、冰乙酸8mL和水50mL于1000mL的容量瓶中，再用异丙醇一正己烷混合溶剂定容至刻度。一、准备试剂粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

1．分光光度计（有10mm比色池，可在440nm处测量吸光度）;2．振荡器（振荡频率120~130次/min（往复）);3．恒温水浴；4．具塞三角烧瓶（100mL、250mL);5．容量瓶（25mL，棕色）;6．吸量管（1mL、3mL、10mL);7．移液管（10mL、50mL);8．漏斗（直径50mm);9．表面玻璃（直径60mm)。二、准备仪器设备粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

1.称取1～2g试样（精确到0.001g)，置于250mL具塞三角烧瓶中，加入20粒玻璃珠，用移液管准确加入50mL溶剂A，塞紧瓶塞，放入振荡器内振荡1h（每分钟120次左右）。用干燥的定量滤纸过滤，过滤时在漏斗上加盖一表面玻璃以减少溶剂挥发，弃去最初几滴滤液，收集滤液于100mL具塞三角烧瓶中。2．用吸量管吸取等量双份滤液5~10mL（每份含50~100pg的棉酚）分别至2个25mL棕色容量瓶a和b中，如果需要，用溶剂A补充至10mL。3．用异丙醇-正己烷混合溶剂稀释瓶a至刻度，摇匀，该溶液用作试样测定液的参比溶液。三、测定步骤粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

4．用移液管吸取2份10mL的溶剂A分别至2个25mL棕色容量瓶a0

和b0中；

5．用异丙醇-正己烷混合溶剂补充瓶a0至刻度，摇匀，该浴液用作空白测定液的参比溶液。6．加2mL苯胺于容量瓶b和b0中，在沸水浴上加热30min显色。7.冷却至室温，用异丙醇-正己烷混合榕剂定容，播勾并静置1h。8.用10nm比色池，在被长440nm处，用分光光度计以a0为参比溶液测定空白测定液b0

的吸光度，以a为参比溶液测定试样测定液b的吸光度，从试样测定液的吸光度值中减去空白测定液的吸光度值，得到校正吸光度A。三、测定步骤粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

四、分析测定结果粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

2．注意事项（1）每个试样取2个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。结果表示到20mg/kg。（2）同时对同一试样进行两次测定，所得结果之间的差值；游离棉酚含量＜500mg/kg时，不得超过平均值的15%；在750mg/kg＞游离棉酚含量＞500mg/kg时，不得超过75mg/kg；游离棉酚含量＞750mg/kg时，不得超过平均值的10%。（3）国家标准GB13078一91规定，不同饲料游离棉酚允许量为：棉子饼、粕<1200mg/kg，肉鸡、生长鸡配合饲料≤100mg/kg，产蛋鸡配合饲料≤20mgkg，生长肥育猪配合料≤60mg/kg。四、分析测定结果模块五有毒有害物质检测

单元5饲料中铅的检测粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

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1．硝酸（GB626，优级纯）;2．硫酸（GB625，优级纯）3．高氯酸（GB623，优级纯）;4．盐酸（GB622，优级纯）;5．甲基异丁酮；6.6mol/L硝酸溶液：量取38mL硝酸，加水至100mL;7.1mol/L碘化钾榕液；称取166g碘化钾（GB1272)，溶于1000mL水中，贮存于棕色瓶中；8.lmol／L盐酸溶液；量取84mL盐酸，加水至100mL;9.50g/L抗坏血酸溶液：称取5.0g抗坏血酸溶于水中，稀释至100mL，贮存于棕色瓶中；10.铅标准贮备液：精确称取0.1598g硝酸铅，加6mol/L硝酸溶液10mL，全部溶解后，转入1000ml容量瓶中，加水定容至刻度，该溶液为每毫升0.1mg铅.11．铅标工作液，精确吸收1mL份标准备液，加入100ml容量瓶中，加水至刻度，此济液为每毫升lμg。一、准备试剂粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

1.消化设备（两平行样所在位置的温度差小于或等于5℃）；2.高温炉；3.分析天平（感量0.0001g)；4.实验室用样品粉碎机；5.原子吸收分光光度计；6.容量瓶（25mL、50mL、100mml、1000mL）；7.振荡器；8.吸液管（1mL、2mL、5mL、10mL、15mL；9.消化管；10.瓷坩埚。二、准备仪器设备粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

一、试样处理1．配合饲料及鱼粉试样处理称取4g试样，精确至0.001g，置于瓷坩埚中缓慢加热至炭化，在500℃高温炉中加热18h，至试样呈灰白色。冷却，用少量水将炭化物湿润，加入5mL硝酸、5mL高氯酸，将坩埚内的溶液无损地移入烧杯内，用表面皿盖住，在沙浴或加热装置上加热，得消解完全后，去掉表而皿，至近干涸。加1moL/L盐酸溶液10mL，使盐类溶解，把溶液转入50mL容量瓶中，用水冲洗烧杯多次，加水至刻度。用中速滤纸过滤，待用。三、测定步骤粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

一、试样处理2．磷酸盐、石粉试样的处理称取5g试样，精确至0.001g，放入消化管中。加入5mL水，使试样润湿，依次加入20mL硝酸，5mmL硫酸，放置4h后加入5mL高氯酸，放在消化装置上加热消化。在150℃温度下消化2h。然后将温度缓缓升到300℃进行恒温消化，至试样发白近干为止，取下清化管，冷却。加入1mol/L盐酸溶液10mL，在150℃温度下加热，使试样中盐类溶解后，将溶液转入50mL容量瓶中，用水冲洗消化管，将洗液并入容量瓶中，加水至刻度。用中速滤纸过滤，备作原子吸收用。同时于相同条件下，做试剂空白溶液。三、测定步骤粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

二、标准曲线绘制精确吸收1μg/mL的铅标准工作液0mL、4mL、8mL、12mL、16mL、20mL,分别加到25mL容量题中。加水至20mL。准确加入1mol/L的碘化钾溶液2mL，振动摇匀。加人1mL抗坏血酸溶液，振动摇匀，准确加入2mL甲基异丁酮溶液，激烈振动3min，静置萃取后，将有机相导入原子吸收分光光度计。在283.3nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。三、测定步骤粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

三、测定步骤粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

2．结果表示每个试样取2个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。结果表示到0.01mg/kg。3．重复性同一分析者对同一试样同时进行两次测定，所得结果之间的差值如下：铅含量在≤5mg/kg时，不得超过平均值的20%;铅含量在5~15mg/kg时，不得超过平均值的15%;铅含量在15~30mg/kg时，不得超过平均值的10%;铅含量在＞30mg/kg时，不得超过平均值的5%。三、测定步骤模块五有毒有害物质检测

单元6饲料中氟的检测粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

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1.3mol/L乙酸钠溶液：称取204g乙酸钠，溶于约300mL水中，待溶液温度恢复到室温后，以1mol/L乙酸调节pH至7.0，移入500mL容量瓶，加水至刻度；2.0.75mol/L柠檬酸钠溶液：称取110g柠檬酸钠，溶于约300mL水中，加高氯酸14mL，移入500mL容量瓶，加水至刻度；3．总离子强度缓冲液：3mol/L乙酸钠溶液与0.75mol/L柠檬酸钠溶液等量混合，现用现配；4.lmol/L盐酸溶液；量取10mL盐酸，加水稀释至120mL;一、准备试剂和溶液粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

5．氟标准溶液(1）氟标准贮备液：称取经100℃干燥4h冷却的氟化钠0.2210g，溶于水，移入100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀，放入冰箱内保存，此溶液每毫升相当于1.0mg氟；(2）氟标准溶液：临用时准确吸取氟标准贮备液10mL于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。此液每毫升相当于100μg氟；(3）氟标准稀溶液：准确吸取氟标准溶液10mL于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀，每毫升相当于10ug氟。一、准备试剂和溶液粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

1．磁力搅拌器;2．甘汞电极（232型或与之相当的电极);3．氟离子选择电极（测量范围5×10-7~10-1mol/L,CSB–F-1型或与之相当的电极)；4.酸度计（测量范围0~1400mV,PHS-2型或与之相当的酸度计或电位计）;5．分析天平（感量0.0001g);6．纳氏比色管（50mL)。二、准备仪器与设备粮食工程技术专业教学资源库GrainEngineeringTechnologyTeachingResourceDatabase

一、氟标准工作液的制备分别吸取氟标准稀溶液0mL、1.0mL