《生物样本库多能干细胞管理技术规范gbt+42466-2023》详细解读

《生物样本库多能干细胞管理技术规范gb/t42466-2023》详细解读contents目录1范围2规范性引用文件3术语和定义4缩略语5总体要求6采集与接收7建系8复苏和培养contents目录9冷冻与储存10质量控制11分发12运输附录A(资料性)人和小鼠多能干细胞生物样本库的质量控制检测项目参考文献011范围01021.1适用对象涉及多能干细胞的科研机构、医疗机构、生物样本库及相关企业等均可参考本标准。本标准适用于生物样本库中多能干细胞（包括胚胎干细胞和诱导多能干细胞等）的采集、处理、储存、运输和使用等管理活动。1.2管理环节涵盖了从多能干细胞的获取、鉴定、质量控制，到储存、运输和分发等全过程的管理要求。明确了各环节的操作规范和技术标准，确保多能干细胞的安全性、有效性和可追溯性。对多能干细胞、生物样本库、采集、处理、储存、运输、使用等术语进行了明确定义，避免了术语混淆和误解。有助于统一行业术语，促进国内外交流和合作。1.3术语和定义022规范性引用文件主要引用文件《生物样本库质量和能力通用要求》(GB/T37864)该标准规定了生物样本库在质量管理和能力建设方面的通用要求，包括组织管理、设施设备、人员培训、样本采集、处理、储存、运输和废弃等方面的内容。《干细胞通用要求》(GB/T39718)该标准规定了干细胞的通用要求，包括干细胞的定义、分类、命名、标识、制备、储存、运输、检测、质量控制和废弃等方面的内容。这些要求对干细胞的研究和应用具有重要的指导意义。主要引用文件《人间充质干细胞》(GB/T40788)该标准针对人间充质干细胞进行了详细规定，包括其定义、特性、制备方法、质量控制标准以及临床应用等方面的内容。这些规定为人间充质干细胞的规范化和标准化提供了重要依据。主要引用文件《细胞库质量管理规范》(GMP)该规范是细胞库质量管理的基本准则，涵盖了细胞库的设施、设备、人员、物料、环境等方面的管理要求，确保细胞库的质量和安全。《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则(试行)》该指导原则为干细胞制剂的质量控制和临床前研究提供了具体的指导和建议，包括干细胞制剂的制备、检测、质量控制以及临床前研究的设计和实施等方面的内容。以上规范性引用文件共同构成了《生物样本库多能干细胞管理技术规范GB/T42466-2023》的标准化体系，为该规范的实施提供了有力的支撑和保障。0102030405其他相关引用文件033术语和定义生物样本库是指用于存储生物样本（如组织、细胞、血液、DNA/RNA等）的设施，这些样本可用于生物医学研究、疾病诊断和治疗等。生物样本库具备样本接收、处理、存储、运输和废弃等功能，确保样本的质量和安全。定义功能3.1生物样本库定义多能干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞，可以分化为多种类型的细胞，如神经细胞、心肌细胞、肝细胞等。来源多能干细胞主要来源于胚胎干细胞和诱导多能干细胞等。3.2多能干细胞管理技术规范是指针对生物样本库多能干细胞的管理和操作所制定的标准、规程和指南，旨在确保干细胞研究的质量、安全性和可重复性。管理技术规范包括干细胞的采集、分离、培养、鉴定、存储、运输和应用等方面的规定和要求。3.3管理技术规范内容定义044缩略语01020304BSC生物样本库（Biobank）PSCs多能干细胞（PluripotentStemCells）FBS胎牛血清（FetalBovineSerum）GMP良好生产规范（GoodManufacturingPractice）4.1常见缩略语03SOPs标准操作程序（StandardOperatingProcedures）01CQAs关键质量属性（CriticalQualityAttributes）02KPIs关键性能指标（KeyPerformanceIndicators）4.2规范专用缩略语QA/QC质量保证/质量控制（QualityAssurance/QualityControl）注以上缩略语在《生物样本库多能干细胞管理技术规范gb/t42466-2023》中频繁出现，理解和掌握这些缩略语对于准确理解和实施该规范具有重要意义。同时，这些缩略语也在生物样本库和多能干细胞管理领域具有广泛的应用价值。4.2规范专用缩略语055总体要求生物样本库的建设和管理应符合国家相关法律法规的要求，确保合法合规。遵守国家法律法规在多能干细胞的管理过程中，应始终遵循伦理原则，保护捐赠者和受者的权益。遵循伦理原则5.1法规与伦理要求5.2质量管理体系要求建立质量管理体系生物样本库应建立完善的质量管理体系，确保样本的质量可控、可追溯。持续改进质量管理体系应持续改进，以适应多能干细胞研究和技术的发展。生物样本库应配备具有相关专业知识和经验的管理和技术人员，确保工作的专业性。生物样本库应具备符合要求的设施和环境条件，确保样本的安全和稳定。专业人员设施与环境5.3人员与设施要求信息化管理系统生物样本库应建立信息化管理系统，实现样本信息的实时更新和共享。数据安全信息化管理系统应具备完善的数据安全保护措施，防止数据泄露和被非法获取。5.4信息化管理系统要求066采集与接收明确采集目的和计划根据研究或治疗需要，制定详细的采集计划，包括采集时间、地点、人员分工等。伦理审查确保采集活动符合伦理规范，保护供者权益，避免不必要的伤害。知情同意向供者充分说明采集目的、方法、可能的风险和后果，并获得其书面知情同意。6.1采集前准备123采集过程中应严格遵守无菌操作原则，防止污染。无菌操作根据供者情况和采集目的，选择合适的采集方法和技巧，确保采集到足够数量和质量的多能干细胞。采集方法与技巧对采集到的多能干细胞进行及时处理，如分离、纯化、冻存等，以保证其活性和功能。采集物处理6.2采集操作接收标准与流程制定明确的接收标准和流程，对采集到的多能干细胞进行质量评估和验收。登记与信息录入对接收的多能干细胞进行详细登记，包括供者信息、采集时间、数量、质量等，并建立相应的信息数据库。保密与隐私保护确保供者信息的安全性和隐私性，未经授权不得随意泄露或用于其他用途。6.3接收与登记077建系明确建系目标确定所需干细胞类型、来源及预期应用。伦理审查确保干细胞来源合法、合规，符合伦理要求。质量控制建立严格的质量控制体系，确保干细胞质量。7.1建系前准备采用适当方法从生物样本中分离出干细胞。干细胞分离在适宜条件下进行干细胞培养，保持其增殖能力和多向分化潜能。干细胞培养通过形态学观察、分子生物学方法等鉴定干细胞的特性和纯度。干细胞鉴定7.2建系过程干细胞存储建立干细胞库，对干细胞进行长期存储和管理。质量控制与监测定期对干细胞进行质量检测和监测，确保其质量和安全性。记录与报告详细记录建系过程、质量检测结果等信息，并向上级主管部门报告。7.3建系后管理临床应用将建立的干细胞系应用于临床治疗和研究，探索其疗效和安全性。科研应用利用建立的干细胞系开展基础研究和应用研究，推动干细胞领域的发展。技术改进与优化不断改进和优化建系技术，提高干细胞的质量和建系效率。7.4建系技术应用与拓展088复苏和培养确保实验室环境符合干细胞复苏要求，包括温度、湿度和无菌条件等。准备复苏所需的器材和试剂，如吸管、培养皿、培养基、血清等，并进行无菌处理。根据干细胞类型和冻存时间，制定复苏方案，包括复苏液的配制、温度控制等。8.1复苏前准备03将干细胞悬液接种至培养皿或培养瓶中，放入适宜的培养箱中进行培养。01将冻存的干细胞从液氮罐中取出，迅速放入预热至适宜温度的复苏液中，并不断轻轻摇动，使干细胞快速融化。02将融化的干细胞悬液转移至无菌操作台，用吸管吸出并加入适量的培养基中。8.2复苏操作根据干细胞类型和生长状态，提供适宜的培养条件，包括温度、湿度、CO2浓度等。定期更换培养基，保持干细胞的良好生长状态。对培养中的干细胞进行形态学观察、生长曲线测定等，以评估其生长情况和质量。8.3培养条件在干细胞达到适宜密度后，进行传代或冻存处理。对培养后的干细胞进行质量检测，包括细胞活力、纯度、无菌检测等。将检测合格的干细胞用于后续实验或治疗等应用。8.4培养后处理099冷冻与储存细胞状态检查确保细胞处于对数生长期，形态正常，无污染。冷冻液配制选择适合多能干细胞的冷冻保护剂，如二甲基亚砜（DMSO）等，配制合适浓度的冷冻液。冷冻器具准备准备无菌的冷冻管、程序降温盒等器具，确保无菌操作。9.1冷冻前准备将细胞与冷冻液混合均匀，制成细胞悬液。细胞悬液制备将细胞悬液分装至冷冻管中，并做好标记，包括细胞名称、代数、冷冻日期等。分装与标记将冷冻管放入程序降温盒中，按照设定的降温速率进行降温。程序降温将降温后的冷冻管转移至液氮罐中长期保存。液氮保存9.2冷冻过程定期检查液氮罐的液氮量，确保细胞处于稳定的低温环境。液氮罐管理建立详细的细胞库存档记录，包括细胞名称、代数、冷冻日期、储存位置等信息。细胞库管理定期对储存的细胞进行复苏和检测，确保细胞的活性和功能正常。质量控制确保储存设施的安全防护措施到位，防止意外事故发生。安全防护9.3储存管理复苏准备细胞复苏细胞检测记录与报告9.4复苏与检测准备无菌操作台、培养基、离心管等器具，预热培养基至适宜温度。对复苏后的细胞进行形态观察、生长曲线测定、遗传稳定性检测等，确保细胞质量符合要求。从液氮罐中取出冷冻管，迅速放入37℃水浴中解冻，然后将细胞转移至培养基中。详细记录复苏过程和检测结果，并向上级报告。1010质量控制建立完善的质量控制体系，包括质量手册、程序文件、作业指导书和记录等。明确质量控制的目标、原则、方法和措施，确保干细胞库运行符合规范要求。10.1质量控制体系对干细胞库设施、设备、试剂、耗材等进行定期检查和验证，确保其符合质量要求。对干细胞样本的采集、处理、储存、运输等各环节进行严格控制，确保干细胞质量。10.2质量控制内容VS采用先进的质量控制技术和方法，如细胞活性检测、遗传稳定性检测、微生物污染检测等。定期对干细胞库进行内部审核和外部评审，及时发现并纠正存在的问题。10.3质量控制方法建立完善的质量控制记录制度，对干细胞库的各项操作进行详细记录。定期向上级管理部门提交质量控制报告，汇报干细胞库的运行情况和质量状况。10.4质量控制记录与报告1111分发确保干细胞的储存环境符合规定标准，包括温度、湿度和光照等条件。对干细胞进行质量检查，确保其活性、纯度和安全性达到要求。准备分发所需的器材和试剂，如细胞培养皿、移液器、冻存管等，并进行无菌处理。11.1分发前的准备01020411.2分发过程的操作规范遵循无菌操作原则，避免干细胞受到污染。按照规定的程序进行干细胞的复苏、洗涤、离心和重悬等操作。对干细胞进行计数和活力检测，确保其数量和质量符合要求。将干细胞分装到适当的容器中，标明细胞名称、数量、日期和操作者等信息。03对分发的干细胞进行详细的记录，包括细胞来源、数量、去向和用途等信息。对于出现问题的干细胞，及时进行召回和处理，并记录相关信息。定期跟踪干细胞的使用情况，确保其安全性和有效性。对分发过程进行总结和评估，不断改进和优化操作流程。11.3分发后的跟踪与记录1212运输确保干细胞处于适宜的保存状态，如使用适当的保存液和温度控制。选择合适的运输容器，确保其具有良好的密封性和保温性能。制定详细的运输计划，包括路线、交通工具、人员配备等。12.1运输前准备123对运输过程中的温度、湿度等环境参数进行实时监控。确保运输过程中干细胞的稳定性和安全性，避免剧烈震动和碰撞。定期对运输容器进行检查，确保其完好无损。12.2运输过程中的监控010203在干细胞到达目的地后，及时对其进行质量检查，确保其符合相关标准。对运输过程中出现的问题进行记录和总结，以便改进未来的运输方案。将干细胞妥善存放于目标地点的生物样本库中，确保其长期保存的质量。12.3运输后的处理13附录A(资料性)人和小鼠多能干细胞生物样本库的质量控制检测项目细胞形态学检测观察细胞形态，确认细胞是否保持未分化状态，无分化迹象。细胞表面标志物检测通过流式细胞术等方法，检测细胞表面标志物表达情况，验证细胞多能性。遗传稳定性检测采用核型分析、基因突变检测等方法，评估细胞的遗传稳定性。微生物与内毒素检测对细胞培养上清液进行微生物培养、内毒素检测等，确保细胞无微生物污染。人多能干细胞生物样本库的质量控制检测项目细胞形态学检测观察小鼠多能干细胞形态，确认细胞未分化状态。遗传稳定性检测采用核型分析等方法，评估小鼠多能干细胞的遗传稳定性。微生物与内毒素检测对小鼠多能干细胞培养上清液进行微生物培养、内毒素检测等，确保细胞无微生物污染。同时，还需关注小鼠多能干细胞特有的检测项目，如种系嵌合能力等。细胞表面标志物检测通过流式细胞术等方法，检测