广东虫草与冬虫夏草及蛹虫草的成分比较

广东虫草与冬虫夏草及蛹虫草的成分比较目前,全球已发现的虫草属(Cordyceps)种类有450多种,我国已报道的就超过了100种,广东地区约占全国的30%[1,2]。研究表明,虫草富含腺苷、虫草素、虫草酸等活性成分和多种氨基酸、微量元素、维生素等营养成分[3~5],虫草属真菌具有抗肿瘤、抗病原、抗氧化、以及增强人体免疫功能等多种药理作用[4,6,7]。尽管虫草资源丰富且功效显著,但被开发利用的种类还十分有限,只有冬虫夏草(C.sinensis)和蛹虫草(C.militaris)得到广泛的研究和利用[8~10]。广东虫草(C.guangdongensisT.H.Li,Q.Y.Lin&B.Song)是作者在广东地区采集的一种野生虫草,经分离纯化后,成功获得菌种并栽培获得与野生状态类似的虫草子实体[11,12]。本文对栽培获得的广东虫草子实体的腺苷、虫草素、虫草酸等有效成分和粗蛋白、水解氨基酸等营养成分进行了分析,并与冬虫夏草和蛹虫草进行比较,为其开发利用提供依据。材料与方法材料广东虫草和蛹虫草子实体由广东省微生物研究所提供 ,冬虫夏草子实体采自西藏自治区那曲地区，均于60C烘至恒重，粉碎,过20目筛。HPLC流动相试剂为色谱纯，其余试剂均为分析纯。成分测定虫草素和腺苷虫草素和腺苷含量用HPLC岛津LC-20A)检测,测定条件:色谱柱C18(4.6mmx250mm,5卩m),流动相乙腈：水(7:93),流速1.0mL/min,柱温30°C,二极管阵列检测器,检测波长260nm,进样量10卩L。注射不同浓度的虫草素和腺苷,根据标样峰面积绘制标准曲线。0.5g样品粉末置25mL容量瓶内，加入适量50%乙醇,摇匀,超声提取30min(AutoscienceAS5150A),用双蒸水定容,摇匀,提取液过0.45卩m滤膜,收集滤液，按上述条件上HPLC根据标准曲线计算虫草素和腺苷含量。虫草酸HPLC岛津LC-20A)测定条件:色谱柱为氨基柱(HRC-NH2),流动相乙腈：水(80：20),流速2.0mL/min,柱温35C,示差折光检测器,进样量20卩L。注射不同浓度的甘露醇，根据标样峰面积绘制标准曲线。2g样品粉末置50mL离心管内，加入适量50%乙醇,摇匀,超声提取30min,4300g离心10min,吸出上清液,再加入20mL50%乙醇,摇匀,超声30min,4300g离心10min,吸出上清液。合并两次提取液,减压浓缩,用50%乙醇定量至25mL。提取液过0.45卩m滤膜,收集滤液，按上述条件上HPLC根据标准曲线计算虫草酸含量。粗蛋白参照杨月欣等的方法测定[13]。水解氨基酸参照GB/T5009.124-2003的方法测定[14]。维生素维生素B1和维生素B2分别按荧光法GB/T5413.11-1997和GB/T5413.12-1997测定[16,17],维生素A、D和E按GB/T5009.82、GB/T5413.9-1997和GB/T5009.82-2003测定[18~20]。微量元素及重金属Hg用塞曼法(GB/T5009.17-2003)测定[21],其余元素按GB/T5009.11-2003处理样品，用IPC-MS法测定[22,23]。结果与分析有效成分广东虫草、冬虫夏草和蛹虫草的腺苷、虫草素和虫草酸的含量见表1。这3种虫草的腺苷含量均高于0.01%,达到《中国药典》(2005)的要求[24],且蛹虫草＞广东虫草＞冬虫夏草。虫草酸含量为广东虫草＞冬虫夏草＞蛹虫草,广东虫草虫草酸的含量(151.00mg/g)分别是冬虫夏草和蛹虫草的 1.18倍和3.87倍。粗蛋白广东虫草、冬虫夏草和蛹虫草的粗蛋白含量分别为27.5%、24.3%和26.3%。广东虫草的粗蛋白含量比冬虫夏草和蛹虫草分别高了3.2%和1.2%。水解氨基酸广东虫草、冬虫夏草和蛹虫草均含有16种水解氨基酸（色氨酸在水解时受到破坏,未测得）,但各含量有一定差异,总量以冬虫夏草最高,广东虫草最低（表2）。广东虫草、冬虫夏草和蛹虫草的必需氨基酸分别为4.67%、4.95%和4.88%。维生素广东虫草中维生素B1和B2含量分别为16.4卩g/g和9.6ug/g,其维生素B1的含量高于冬虫夏草和蛹虫草，维生素B2则高于蛹虫草（表3）。维生素A、D和E的含量低于检测最低限量，未测得准确值。微量元素表4为锰、铁、铜、锌等微量元素在3种虫草中的含量。冬虫夏草中锰和铁的含量远远高于广东虫草和蛹虫草,冬虫夏草和蛹虫草中锌的含量高于广东虫草。钴、锡和硒在3种虫草中均未检出。重金属广东虫草、冬虫夏草和蛹虫草中 Pb和As的含量见表5,Hg在3种虫草中均未检出。讨论虫草酸即甘露醇可消除体内的自由基,具有良好的抗氧化能力,是虫草重要的有效成分,已用于制定虫草类产品的质量标准。研究表明,虫草酸在冬虫夏草和蛹虫草中的含量差异较大,不同产地的野生冬虫夏草最低为2.87%,最高为16.71%,平均含量为6%-10%[25],蛹虫草多为6%-10%[26],很少高于10%,广东虫草虫草酸含量为15.1%。大多数真菌都具有良好的金属富集能力[27],因此生长环境对虫草的微量元素和重金属含量有重要的影响。野生冬虫夏草的微量元素含量远远高于两种人工栽培的虫草很可能是由于冬虫夏草生长环境中微量元素含量较高引起的。广东虫草可人工栽培