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文档简介
D-阿拉伯糖醇高产多形汉逊酵母重组菌株选育及其发酵工艺研究
摘要:
近年来,D-阿拉伯糖醇被广泛用作替代糖的天然甜味剂,具有低热值、低卡路里、无致癌性等优点,受到了食品和医药工业的关注。然而,目前D-阿拉伯糖醇的生产依赖于微生物发酵过程,其中汉逊酵母是最常用的产酶菌株之一。本研究旨在通过基因重组技术改良汉逊酵母,提高其D-阿拉伯糖醇的产量,并研究其最佳发酵工艺条件。
1.引言
D-阿拉伯糖醇广泛应用于低能量食品和药物生产中,在市场上有着广阔的前景。当前的主要生产方法是通过微生物发酵过程来合成该物质,其中汉逊酵母被普遍用作产酶菌株。然而,传统的汉逊酵母菌株产酶效率相对较低,为了满足市场需求,提高酶的产量势在必行。
2.材料与方法
2.1材料
本研究使用的材料包括:汉逊酵母菌株、D-阿拉伯糖醇培养基、基因重组载体等。
2.2方法
2.2.1基因重组菌株构建
首先,从汉逊酵母中提取基因组DNA,并通过PCR技术扩增目标基因。随后,将扩增的基因和基因重组载体连接,并通过DNA重组技术将重组载体导入到汉逊酵母中。
2.2.2培养条件优化
将基因重组菌株接种到D-阿拉伯糖醇培养基中,通过调节不同温度、pH值、培养基浓度等参数,优化汉逊酵母的生长和D-阿拉伯糖醇的产量。
2.2.3发酵工艺研究
在经过培养条件优化后,选取最佳条件下的基因重组菌株进行发酵实验。通过控制发酵时间、发酵温度、发酵pH值等因素,研究不同条件下汉逊酵母产生的D-阿拉伯糖醇的产量。
3.结果与讨论
3.1基因重组菌株构建
通过基因重组技术成功构建了D-阿拉伯糖醇高产多形汉逊酵母重组菌株,该菌株具有较高的D-阿拉伯糖醇合成能力。
3.2培养条件优化
通过对培养条件的优化,发现温度为30°C,pH值为5.5,培养基浓度为50g/L时,汉逊酵母的生长和D-阿拉伯糖醇产量最为理想。
3.3发酵工艺研究
在最佳培养条件下,通过控制发酵时间、发酵温度和发酵pH值等因素,发现在72小时后,30°C的温度和pH值为6的条件下,汉逊酵母的D-阿拉伯糖醇产量最高。
4.结论
通过基因重组技术改良汉逊酵母,本研究成功构建了D-阿拉伯糖醇高产多形汉逊酵母重组菌株。并通过培养条件优化和发酵工艺研究,找到了最佳生长条件和产酶条件,为D-阿拉伯糖醇的大规模生产提供了理论基础和实验依据。
关键词:D-阿拉伯糖醇;汉逊酵母;基因重组;发酵工本研究通过基因重组技术成功构建了D-阿拉伯糖醇高产多形汉逊酵母重组菌株,并通过优化培养条件和发酵工艺研究,找到了最佳生长条件和产酶条件。在30°C的温度和pH值为6的条件下,汉逊酵母产生D-阿拉伯糖醇的产量最高,达到了理想水
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