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文档简介

细菌的形态与结构第一节细菌的大小与形态一、球菌(Coccus)球形或近似圆球形,有的呈矛头状或肾状,单个球菌的直径约在0.8~1.2µm左右。由于繁殖时细菌细胞分裂方向和分裂后细菌排列方式不同可分为:1.双球菌:在一个平面上分裂成双排列,如肺炎双球菌、脑膜炎双球菌。2.链球菌:在一个平面上分裂,成链状排列,如溶血性链球菌。3.四联球菌:在两个相互垂直平面上分裂,以四个球菌排呈方形,如四联加夫基菌。4.八迭球菌:在三个垂直平面上分裂,八个菌体重叠呈立方体状,如藤黄八叠球菌。5.葡萄球菌:多个不规则平面上分裂,菌体无秩序堆积呈葡萄状排列,如金葡菌。二、杆菌

菌体呈园柱状,根据分裂繁殖后排列不同分为:单杆菌、链杆菌。菌体两端多呈钝圆形,少数两端平齐(如炭疽杆菌),或尖细(如梭杆菌),或未端膨大呈棒状(如白喉杆菌)。三、螺旋状菌1.弧菌:菌体只有一个弯曲,呈弧状或逗点状。如霍乱弧菌。2.螺菌:菌体有数个弯曲,如鼠咬热螺菌细菌的基本形态第二节细菌的结构一、基本结构细胞壁细胞膜细胞质核体间体细胞壁

细胞壁为细菌表面比较复杂的结构。位于细胞最外层,包围整个菌体的一层坚韧而具有弹性的膜壁,称为细胞壁。细胞壁的结构革兰氏阳性菌:主要成分是肽聚糖又称粘肽。占细胞壁干重的50~80%。还有大量磷壁酸。脂类含量少。革兰氏阴性菌:细胞壁较薄,约10~15nm,粘肽含量极微,约占细胞壁干重的5~20%。不含磷壁酸。结构比较复且蔬松。在粘肽层外有由脂蛋白、外膜和脂多糖三者组成的多聚物。附着于外膜的脂多糖由特异性多糖、核心多糖及类脂体A组成。2.细胞壁与染色反应的关系与革兰氏染色反应的关系:革兰氏阳性菌:细胞壁主要成分为粘肽,脂质含量少,经高浓度洒精脱色后,细胞壁通透性改变不大,结晶紫-碘复合物仍被保留在细胞内而呈兰紫色染色结果。革兰氏阴性菌:

细胞壁主要成分为脂质,粘肽含量极少,经高浓度洒精脱色后,细胞壁通透性增加,孔隙增大,结晶紫-碘复合物被洗出细胞外,最后被品红复染为红色。与抗酸染色反应的关系抗酸染色概念与原理:结核分支杆菌细胞壁中含有分支杆菌酸或腊质成分,二者具有抵抗盐酸洒精的脱色的作用使菌体染为红色,故称结核分支杆菌染(抗酸染色)。抗酸染色结果:结核分支杆菌为红色其它细菌为兰色3.细胞壁与药物反应的关系

青霉素和头孢菌素:能与细菌竞争合成胞壁过程所需的转肽酶,使细菌不能合成完整细胞壁,而导致细菌死亡。4.细胞壁的功能保持细菌的一定形态。与物质交换有关,可溶性小分子自由通过。保护细菌免受外界不良环境的影响。

5.细胞壁缺陷型细菌L型细菌:细菌通过变异而丧失形成细胞壁的能力,呈高度多形态性的细菌变种原生质体:在培养基中加入溶菌酶或青霉素使细胞壁完全除去剩下胞浆膜围绕的软性脆弱的个体。球状体:经溶菌霉处理后除去细胞壁的硬质粘肽部分,形成的一个疏松外套围绕的个体。二、特殊结构

1、荚膜概念:细菌在生长繁殖过程中分泌到细胞外,包围整个菌体的一种粘性物质称荚膜。荚膜厚度随菌种不同而异微荚膜只能在电子显微镜下看见

一个荚膜内含多个菌体者称为菌胶团。成分:水分(90%),固体成分为多肽(炭疽杆菌)和多糖(肺炎双球菌,志贺氏痢疾杆菌为多糖多肽质类复合物)功能:抗干燥;菌种特征;具有Ag性;有荚膜的病原菌可增强毒力荚膜2、鞭毛概念:细菌由胞浆中的基础颗粒生长出来,穿过胞浆膜、细胞壁,向外伸出,比菌体长若干倍,呈波状弯曲的丝状物,称细菌的鞭毛。功能:运动器官;具有抗原性;有鞭毛的病原菌可增强毒力。类型(鞭毛位置数目排列方式是菌种的征):3、芽胞(1)芽胞的概念:

某些杆菌生长发育到一定阶段,由胞浆胞质浓脱水缩后,在菌体内形成的一个折光性强、通透性低、园形或卵园形的坚实小体,叫细菌芽胞。带有芽胞的菌体称芽胞体,未形成芽胞的菌体称繁殖体。(2)形成条件及发芽:

芽胞形成必须具备一定条件,一般在营养缺乏时容易形成芽胞。菌种不同其形成条件亦不同。芽胞是细菌的休眠状态,当环境条件适宜时,又可发芽成一个菌体。(3)芽胞的抵抗力及意义

芽胞对外界环境的抵抗力比繁殖体强得多,特别耐高温和渗透压作用,一般化学药品也不容易渗透进去。其原因如下:①芽胞壁有多层结构其通透性很低,化学药品不易进入,所以消毒剂不能用于杀灭芽胞。

②含水量极少,其内的酶类和蛋白质不易遇热凝固变性,故短时高温仍不能杀灭芽胞(如破伤风芽胞可耐受1-3h煮沸)。③芽胞内酶活性与新陈代谢极低,故干燥和营养缺乏时可长时间存活。芽胞在土壤中可存活几年至几十年,故土壤中经常有破伤风梭菌芽胞和炭疽杆菌芽胞存在。芽胞对外界环境的抵抗力极强。被芽胞污染的器械等,用一般的化学消毒法不能彻底杀死芽胞。杀灭芽胞最有效的方法是高温灭菌法(判断高压灭菌器是否有效常以能否杀灭芽胞为标准)。(4)芽胞类型:

芽胞类型是菌种的特征,一般有以下几种:中央芽胞偏端芽胞顶端芽胞游离芽胞4、柔毛(菌毛)

借助于电子显微镜可以观察到细菌的柔毛,它比鞭毛多而且短,分为普通柔毛和性毛两种。一般为有鞭毛的细菌才具有。细菌生理细菌的化学组成细菌的物理性状细菌的营养细菌的新陈代谢细菌的生长繁殖第一节细菌的化学组成

结合水水份(75-85%)自由水无机物干物质

(15-25%)有机物第二节细菌的物理特性比面积大光学性质多相胶体性质渗透压带电现象布朗氏运动第三节细菌的营养一、营养物质的吸收与运转扩散:物质由高浓度向低浓度方向的运输方式。分为:单纯扩散易化扩散

主动运输:物质由低浓度向高浓度方向的运输方式。它需要酶的作用,如渗透酶各周围间隙蛋白,在运输大分子物质(糖、氨基酸、无机离子)中起着重要作用。运输示意图为:

主支运输转动方式

营养物质释放营养物质渗透酶载体复合物细胞内周围间隙蛋白载体回位二、细菌的营养需要水分—新陈代谢所需媒介。含碳化合物—用来合成菌体的糖、蛋白质、核酸等,亦作为能量来源。含氮化合物—用来合成菌体的各种含氮化合物。矿物质—在细菌代谢中起着酶激活物的作用,用来构成酶的辅基,对于维持原生质胶体状态和细胞渗透性具有较大作用。Vit—在代谢中起重要作用(如B簇Vit起着辅酶或辅基的作用。三、细菌的营养类型自养型这类细菌酶系统完善,能利用无机碳(CO2、C、H2CO3)合成菌体有机碳。分为光能和化能自养型两类。异养型这类细菌酶系统不完善,只能利用有机碳作为养料。分为光能异养菌和化能异养菌两大类。绝大多数病原菌都属于化能异养菌。第四节细菌的新陈代谢一、细菌的酶胞外酶、胞膜酶、固有酶、适应酶与医学有关的酶类:卵磷脂酶、透明质酸酶、胶原酶、溶纤蛋白酶、凝血浆酶、溶血素、尿素酶

二、细菌的呼吸1、细菌呼吸的概念:细菌借助于体内的酶类,从物质的氧化还原过程中获得它所需要的能量的过程,称细菌的呼吸。ATP2、细菌呼吸类型:专性需氧菌微需氧菌兼性厌氧菌厌氧菌专性厌氧菌各型细菌呼吸特点专性需氧菌:需充足O2,生长于表面.。微需氧菌:需低浓度O2,生长于表面以下数mm处。兼性厌氧菌:生长于整个培养基中。厌氧菌和专性厌氧菌:生长于培养基底部。3、厌氧菌培养的原理1、厌氧菌缺乏细胞色素和细胞色素氧化酶二者具有较高的氧化还原电势,能氧化高电势的化合物产生能量。在有氧环境中,培养基中的营养物质多为氧化型状态,氧化还原电势随之升高。故厌氧菌不能利用这些营养物质,造成能量不足而不能生长。2、缺乏过氧化氢酶和过氧化物酶

细菌在有氧环境的代谢中常产生H2O2,这是一种氧化剂,有杀菌作用,缺乏二酶,故厌氧菌不能分解H2O2,而不能生长。3、有氧环境中-SH被氧化-SH是菌体许多酶类的辅酶(如CoA、琥珀酸脱氢酶、氨基酸转移酶等),故厌氧菌不能生长。三、细菌的代谢产物(一)分解产物的检测1.糖代谢测定糖发酵试验:多糖经胞外酶分解为双糖单糖再经胞内酶分解为有机酸、醇、CO2和H2O。细菌分解糖的能力是不同的。

⊕—产酸不产气

—产酸产气

-—阴性VP试验:大肠杆菌与产气杆菌均分解葡萄糖⊕,为区分两菌可采用VP试验及甲基红试验。产气杆菌能使丙酮酸脱羧、氧化(在碱性溶液中)生成二乙酰,后者可与含胍基的化合物反应,生成红色化合物,称VP阳性。甲基红试验:产气杆菌使丙酮酸脱羧后形成中性产物,培养液pH>5.4,甲基红指示剂呈桔黄色,为甲基红试验阴性,大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸,培养液呈酸性pH<5.4,指示剂甲基红呈红色,称甲基红试验阳性。枸橼酸盐利用试验:能利用枸橼酸盐作为唯一碳源的细菌如产气杆菌,分解枸橼酸盐生成碳酸盐,同时分解培养基的铵盐生成氨,由此使培养基变为碱性,使指示剂溴麝香草酚蓝(BTB)由淡绿转为深蓝,此为枸橼酸盐利用试验阳性。2、蛋白质代谢测定H2S试验:含S氨基酸菌产生H2S与基中醋酸铅PbS黑色沉淀物。吲哚试验:色氨酸菌吲哚明胶试验:明胶菌液化紫乳试验:酪蛋白菌胨化(二)合成代谢产物及临床意义热原质毒素与酶色素抗生素细菌素第五节细菌的生长繁殖一、细菌生长繁殖的条件1、营养物质供给细菌适量的H2O、糖类、蛋白质或氨基酸、无机盐及Vit等。2、温度细菌生长的最适温度随菌种不同而异,一般病原菌要求与体温相同,如牛羊病原菌需37℃,鱼类病原菌则要求22℃。3、酸碱度(PH)PH对细菌发育影响很大,大多数病原菌最适酸碱度为PH7.2-7.6,少数细菌可在特殊PH条件下生长,如霍乱弧菌在PH6.4-9.6时均能生长(最适为7.8-8.0),乳酸杆菌在PH3.4-4.5时可生长,霉菌则在PH3.0-6,0生长良好。4、渗透压细菌只有在等渗环境中才能生存。若环境渗透压过高,则菌体被脱水造成质壁分离;若环境渗透压过低,则细菌臌胀破裂。5、气体O2、CO2、N二、细菌的繁殖方式和速度多数细菌为横分裂式繁殖(1→2→2²→2³→2ⁿ)。少数细菌如酵母进行出芽繁殖。近年来,电子显微镜观察可见,某些细菌也存在有性结合。绝大多数细菌繁殖速度为15-30min一代。但菌种不同其繁殖速度亦不同,如大肠杆菌20min繁殖一代,结核杆菌较慢,需0.5-18h才能繁殖一代。三、细菌群体的人工培养用人工的方法,将细菌从自然界、动物体或病料中分离出来,其目的是为了研究细菌的形态、生理特性、生物学特性或制取细菌的某种代谢产物等。这对于传染病的诊断、流行病学调查、菌苗制备、微生物的工业生产都具有重要意义。为此,了解和掌握细菌分离培养的有关基础知识是十分必要的。(一)培养基的种类和常用培养基培养基的概念:将细菌所需的各种营养物质按一定比例混合在一起,并调节到适宜的PH,这种人工配制的适合细菌生长繁殖的细菌营养物,称为培养基。培养基必需符合以下条件:营养物适宜的PH环境温度和渗透压无菌培养基种类

1、基础培养基含有培养一般细菌的最基本成分。又分为:液体培养基、固体培养基和半固体培养基三种。在液体(肉汤)培养基中,加入2-3%琼脂即为固体培养基,加入0.2-0.5%琼脂即为半固体培养基。2、营养培养基于基础培养基中加入高营养物质如葡萄糖、血液、血清、腹水、生长因子等,以满足营养要求较高的细菌生长需要。有的细菌还需加入特殊物质,如结核杆菌需加入鸡蛋清、马铃薯、甘油等才能良好生长3、选择培养基

利用细菌对某种物质敏感程度的不同,可在培养基中加入抑制某些细菌生长的药物,而选择性地让欲分离的细菌旺盛生长的培养基如胆盐和蔷薇色酸可以选择性地抑制G+菌的生长,而不影响Gˉ菌的生长。在培养基中加入二药后可选择性地分离出肠道杆菌。

4、鉴别培养基

利用细菌分解底物及其代谢产物的不同,可在培养基中加入某种物质和指示剂,即制为鉴别培养基,以测定不同细菌的生化反应。5、厌气培养基将培养基与空气及氧隔离,或降低培养基中的氧化还原电势,供厌氧菌生长。除去培养基中氧的方法:a、降低培养基中氧化还原电势:如肝汤或加入谷胱甘肽、硫基醋酸盐等。

b、化合去氧法:如焦性没石子酸、好氧厌氧菌混合、种子发芽等。

c、隔绝阻氧法:如液体石腊等。(二)细菌群体的生长现象划线接种分点接种涂抹接种液体接种穿剌接种倾注接种注射接种活体接种细菌的接种方法1、细菌在固体培养基上的生长现象:

观察细菌在平板上的菌落特征:形态、大小、边缘、表面构造(湿润度和光滑度)、隆起度、透明度、颜色等,及在血平板上的溶血现象(β溶血、α溶血)。菌落特征2、细菌在半固体培养基中的生长现象有鞭毛的细菌,沿穿剌线呈模糊羽毛状生长。无鞭毛的细菌,沿穿剌线呈清晰的线状生长。3、细菌在液体培养基中的生长现象观察肉汤培养物的混浊度、管底沉淀、肉汤表面菌膜或菌环,以及有无汽泡等。⑸⑹⑺⑻⑴⑵⑶⑷3、细菌群体的生长曲线将一定数量的细菌接种在适宜的液体培养基中,在适宜温度下孵育,每隔一定的时间取样计算,如以时间为横坐标,细菌数的对数为纵坐标,则可绘制出一条曲线,称细菌生长曲线。细菌生长曲线由四个时期组成::迟缓期:细菌进入新环境,数目不增加,一般需2-6h。对数生长期:细菌代谢最旺盛繁殖快,细菌数以对数的速度增加,细菌抵抗力最强病原菌毒力最强,形态染色特征典型。此期需6-10h。稳定期:细菌数目保持恒定不变,G๋菌可变为Gˉ菌。此期持续8h。衰退期:活菌数下降。

细菌(微生物)的分布细菌种类多,繁殖快,适应环境的能力强,是自然界中分布最广泛的一群微小生物。微生物在自然界中的分布可概括为:

“无孔不入,无处不有”

第一节土壤中的细菌土壤是细菌生存的天然场所(因为土壤中有水分、营养物质、空气、一定的PH环境和温度)自然界中,以土壤的含菌量(种类)最多,土壤素有“天然培养基”之称。土壤也是一切自然环境中细菌的总发源地,也是人类利用细菌的主要来源。在肥沃的土壤中,每克土壤含菌量达几十亿-几仟亿(沙漠含菌量仅10万/g)。细菌在土壤各层分布不均:表面含菌量少;距表面10-20cm土壤含菌量最多土壤中的细菌多数为非病原菌,它们在自然界的物质循环中起着重要的作用,是动植物与人类生存的必要条件之一。土壤中仅有少数病原菌,它们来自人和动物体(粪、尿、痰、尸体等)。多数病菌在土壤中很能容易死亡。主要为球菌和芽胞杆菌,如炭疽杆菌、破伤风杆菌、气性坏疽可长期存活。所以,当人体创伤处污染泥土时,要严防破伤风和气性坏疽感染。第二节空气中的细菌一、空气细菌来源

空气中的细菌来自土壤、尘埃和高声说话、喷啑及咳嗽飞沫。在人口密集的公共场所或医院,空气中细菌种类和数量显著增多。二、空气中的病原菌及空气感染

空气中一般没有病原菌,但疫区或患者周围空气中有大量病原菌。如乳牛的唾液沫(结核)随咳嗽或喷啑可喷射5m远,且飘浮很长时间。带有病原菌的尘埃也会飞扬到大气中。空气中非病原菌常常污染药物制剂、培养基、生物制剂(品),引起食品、饲料变质以及造成手术感染。所以在外科手术、细菌接种、制备生物药剂及生物制品等工作中,应严格无菌操作杜绝污染。空气细菌卫生检查有时用甲型溶血性链球菌作为指示菌,表明空气受到人上呼吸道分泌物中微生物的污染程度。在疫区或患者周围空气中有大量病原菌。如乳牛的唾液沫(结核)随咳嗽或喷啑可喷射5m远,且飘浮很长时间。带有病原菌的尘埃也会飞扬到大中。三、空气消毒法1、紫外线照射:在工作前照射0.5-1h,停照后0.5h方可入内工作。2、化学喷雾:用3-5%来苏儿或石碳酸(酚)或2%乳酸叶雾。3、化学药物熏蒸:①KMnO4+福尔马林→按1:2混合熏蒸,即1000³,250g(高)+500ml(福)→熏蒸24h。②1-2ml乳酸/㎡熏蒸。

第三节水中的细菌一、水中细菌来源二、水中的病原菌三、水的自洁作用四、水的细菌学检查水的自洁作用①水中泥沙沉降作用;②水面日光紫外线照射;③水中营养物耗尽;④水中生物拮抗作用;⑤水中噬菌体灭菌作用;⑥原虫澡类吞噬作用;⑦清洁支流冲淡作用。水质细菌学检查三项指标指标名称意义国家标准菌总数检定1ml自来水中所含各种活细菌数<100个大肠杆菌价能检出1个大肠杆菌的最小自来水量>300ml大肠杆菌指数在1000ml自来水中检出的大肠杆菌数<3个第四节细菌在动物体的分布人体细菌分布

正常菌群及其意义

正常情况下,寄居于动物体对机体无害且有益和必需的微生物类群,称为正常菌群或正常微生物群。正常菌群对机体的意义表现在三个方面:

正常菌群对机体的有利作用正常菌群转化为条件致病菌菌群失调及菌群失调症1、正常菌群对机体的有利作用①促消化作用:

将不溶必蛋白和糖类转化为可溶性状态,促进机体吸收。②营养作用:

大肠杆菌及乳链球菌能合成VitB1、B12泛酸、叶酸及VitC、K等,供机体利用;双岐杆菌产酸造成酸性环境可促进对VitD、Ca、Fe的吸收。

③生物屏障作用:

即对病原菌的拮抗作用,如大肠菌素可抑制痢疾杆菌生长;唾液链球菌产生的H2O2抑制脑膜炎球菌生长。④免疫作用:

微生物具有免疫原性、促分裂和佐剂的作用。可剌激机体免疫系统发育和成熟。2、正常菌群转化为条件病原菌①机体免疫机能低下:如大面积烧伤,过度疲劳,受凉,长期患消耗性疾病。②正常菌群寄居部位发生变迁:如外伤,手术,留置导尿管等使大肠杆菌进入腹腔、泌尿道或血液等。③不适当的抗菌素药物治疗:如长期或滥用抗菌素治疗。33、菌群失调及菌群失调症菌群失调:指机体、菌群、环境三者之间的动态平衡发生改变,导至体内正常菌群中各种细菌的数量和比例发生大幅度的变化,生态体系表现出的不平衡状态。菌群失调症:指严重的菌群失调使机体发生功能紊乱表现出明显临床症状者。菌群失调症又叫菌群交替症(二次感染)。菌群失调经常发生而菌群失调症则少见。患二重感染的机体抵抗力很弱,细菌对抗菌素药物不敏感,治疗难度大,应严加预防,避免发生。第五节畜产品中的细菌1、乳汁中的细菌:健康动物乳汁中细菌数量和种类少。乳汁易被污染,其原因(来源)有:皮毛、容器工具、挤奶员卫生习惯及挤奶前的尘埃等。传染病和乳房炎病畜带金葡、rts、结核、布氏杆菌等。

2、肉(蛋)中的细菌:健康肉(蛋)无菌。但污染环节多。传染病肉含相应病原菌(尤其是蛋中的沙门氏菌)。第六节细菌在物质转化中的作用外界环境因素对细菌的影响致病菌可随污染的环境经一定途径侵入机体引起疾病(传染病);又可从患病动物体、带菌动物、及病亡动物体排出污染环境。因而,细菌在自然界中受许多环境因素的影响,其生命活动与外界因素有着及其密切的关系。当环境条件适宜时,能促进细菌的生长繁殖,当环境条件改变时,其代谢随之发生相应变化。由于外因素作用的强度和时间的不同,可引起细菌的变异、生长繁殖抑制、甚至死亡。概念

消毒:指用化学或物理的方法,杀灭物体中的病原微生物的方法。灭菌:指用物理或化学的方法,杀灭物体中所有微生物的方法。防腐:指用化学药品防止或抑制细菌生长繁殖的方法(又称抑菌)。无菌:是没有活菌的意思,指采取杜绝一切微生物进入动物体或物体的方法(无菌技术或无菌操作)这是防止手术感染及人工培养杜绝杂菌污染的有效措施。抑菌作用:某些物质或因素具有阻碍细菌生长的作用。杀菌作用:某些物质或因素具有杀灭细菌生长的作用。抗菌作用:药物具有的抑菌或杀菌作用。过滤除菌:通过滤器过滤后,液体或气体中无任何细菌存在的方法。

第一节物理因素一、温度对细菌的影响㈠低温对细菌的影响细菌对寒冷的抵抗力较强。因此,低温不能用于灭菌。

低温常用于保存菌种。但是,反复冻融对微生物不宜。各种细菌对低温的抵抗力亦不同。温度㈡高温对细菌的影响高温对细菌有明显的至死作用。影响高温灭菌的因素:细菌对高温的耐受性与细菌种类、发育时期、菌体浓度及细菌所处界质有关。

分类

1、干热灭菌法:

灭菌对象为玻璃器皿、金属器械及不宜遇水的油、脂、凡士林等。分类:烧灼、焚烧灭菌法热空气灭菌法红外线、微波2、湿热灭菌①煮沸消毒法:温度在100℃左右,3-5min杀灭繁殖体,芽胞煮沸3h以上。若在水中加入2-5%酚,则10-15min可杀灭芽胞;若在水中加入1-2%Na2CO3,可提高沸点既可促进芽胞的摧毁,亦可防止生锈。灭菌对象:饮水、玻璃器皿、外科器械②流通蒸汽消毒法:又叫常压蒸汽消毒法,用普通蒸笼或阿诺氏(Arnold)流通蒸汽灭菌器,在1个大气压下,用100℃左右的水蒸汽,30min,可杀灭繁殖体。用于食品、食具及不耐用高温的物品消毒。③间隙灭菌法:利用连续3次的流通蒸汽消毒法,达到彻底灭菌的目的。即将待灭菌物品放入蒸笼(灭菌器)内,加热(约100℃)15-30min,取出置室温24h,次日重复灭菌。连续3次(10磅20min)。用于一些不宜100℃以上,温度灭菌物质,以达到杀灭芽胞的目的。常用于含糖、牛乳、血清等培养基的灭菌。④巴氏消毒法:指利用不太高的温度,杀死食品中的病原菌及一般杂菌,同时又不致严重损害营养物质和风味的消毒方法。牛奶(酒类)常用此法杀死其中的结核杆菌或巴氏杆菌。方法有3:一是61.1-62.8℃,15-30min。二是71.7℃,150-30s。三是96℃,6S⑤高压蒸汽灭菌法:利用密闭高压蒸汽灭菌锅进行灭菌加热后随着锅内的压力持续必增高,温度随之上升,杀菌力亦随之增强,而达到杀菌和杀灭芽胞的目的。常用15磅(121℃)30min普通培养基生理盐水玻璃器皿手术器械工作服实验动物尸体灭菌对象第二节化学因素对细菌的影响一、消毒剂消毒剂使用范围:体表(皮肤、粘膜、伤口)器械排泄物周围环境

消毒剂杀菌机制:①使菌体蛋白变性沉淀。②与菌体内的酶类结合,影响细胞代谢或酶丧失活性。③降低菌细胞的表面张力,使胞浆膜通透性示增加,菌体破裂溶解。常用消毒剂种类酸类消毒剂碱类消毒剂其它消毒剂H+OH--SH醇脱水Hg(一)酸类消毒剂无机酸(三大强酸)具有腐蚀性。但硼酸腐蚀性较小(杀菌力亦弱),常用1-2%硼酸用粘膜消毒。有机酸如甲酸,醋酸,乳酸等均有杀菌作用,常用乳酸水蒸气或溶液杀灭细菌或病毒。

(二)碱类消毒剂碱类消毒剂对所有细菌及芽胞和病毒都有杀灭作用。尤其常用于病毒的消毒:

10-20%石灰乳

20-30%草木灰水

1-3%NaOH(三)其它常用消毒剂0.1%升汞用于非金属器械消毒0.1%KMnO4和3%H2O2用于粘膜和创伤消毒70-75%乙醇用于体表和体温表的消毒1-3%碘液用于粘膜消毒5-10%碘液可杀灭放线菌0.2-0.5%过氧乙酸用于塑料、玻璃、人造纤维消毒及皮肤消毒。

3-5%酚、3-5%来苏儿用于环境消毒或空气消毒。甲醛杀菌力较强,常用于器械消毒。40%甲醛溶液用于烈性传染病的消毒,

4-10%甲醛溶液浸泡30min可杀灭繁殖体及真菌。20%甲醛溶液浸泡6h以上,可杀灭芽胞体。消毒房间:1-2ml福尔马林/m³加等量水薰蒸或加入KMnO4。二、防腐剂用于防腐的药物称为防腐剂。生物制剂(如疫苗、类毒素、抗毒素等)中常加入防腐剂,以防止杂菌生长。常用防腐剂有0.5%石炭酸、0.01%硫柳汞和0.1~0.2%甲醛等。

第三节生物因素对细菌的影响寄生;一种生物从另一种生物获营养,赖以生存,并对后者呈现有害作用者。共生:两种生物生活在一起,互为有利,互不损害者。拮抗:两种生物生活在一起,一种生物能产生一种对他种生物呈现毒害作用的物质,抑制或杀灭他种生物者。一、噬菌体噬菌体是能感染细菌、放线菌、真菌、螺旋体的一类病毒。噬菌体分布广泛。噬菌体有严格的宿主特异性,只寄居于易感宿主菌体内。噬菌体对理化因素的抵抗力较强。噬菌体感染菌细胞后可引起细胞裂解。

二、抗生素某些微生物在代谢过程中产生的一类杀灭或抑制另一种微生物的化学物质叫抗生素。抗生素来源:主要为放线菌,少数为细菌和真菌或某些植物。抗生素的作用原理

①抑制细菌细胞壁的合成,如青霉素②影响细菌细胞膜的通透性,如多粘菌素③抑制菌体蛋白质的合成,如氯、四④抑制细菌核酸合成,如灰黄霉素。细菌的致病性与传染明确几个概念:

第一节病原菌的致病性一、细菌的毒力(一)侵袭力指病原菌突破机体的防御屏障,在机体内生长繁殖,蔓延扩散的能力。侵袭力对机体无直接毒害作用。侵袭力由病原菌的毒性酶和荚膜构成。1.细菌的酶2.荚膜(二)毒素1、外毒素病原菌在生长繁殖过程中分泌到周围环境中的一种有毒代谢产物。产生外毒素的细菌种类:某些G+菌如破伤风、白喉、肉毒、魏氏梭菌等及少数G-菌如志贺氏痢疾杆菌、的N毒,霍乱弧菌的肠毒素等。外毒素特点:

⑴毒性强,小剂量即可致死易感机体。⑵对易感动物组织细胞有高度的特异性,常常选择性地作用于某些组织上或器官,引起特殊的病变。⑶外毒素是一种蛋白质。一切破坏蛋白质的因素都有可能使之变性凝固,不耐热,60-70℃20min即被破坏或减弱。⑷溶于水,⑸具有抗原性。⑹外毒素经0.2-0.5%甲醛处理后可丧失毒性,而仍然保留其抗原性制成类毒素。外毒素特点2、内毒素

概念:

存在于某些G-菌细胞壁的最外层,是菌体的结构组成部(脂体A,在生活状态时不释放出来,只有当菌细胞自溶、死亡或用人工的方法(如反复冻融、加热、长时间碾磨、超声波等),使菌体裂解后,才释放出来,故称内毒素。

内毒素的特点:

⑴毒性低。⑵无特异性致病作用对组织器官无选择性。⑶内毒素为类脂—多糖—蛋白质复合物,主要成分是脂多糖(简称LPS),故为易被蛋白酶破坏⑷性质稳定,耐热性强,不被100℃1h所破坏。⑸抗原性弱。⑹内毒素经甲醛处理后不能制成类毒素。外毒素与内毒素性质的主要区别区别要点外毒素内毒素存在部位由活细菌产生而释放或分泌到菌体外为细胞结构成分,菌体溶解后释放细菌种类以G+菌多见以G-菌多见化学组成蛋白质脂多糖理化特性不耐热,不稳定,易受氧化剂破坏耐热,稳定,能被酸水解毒性作用强。对组织器官具有高度特异性症状独特弱。无特异中毒症状抗原性强。剌激产生大量抗弱。甲醛处理制成类毒素不能制成类毒素二、病原菌毒力的测定最小致死量(MLD):能使特定动物于感染后的一定时间内发生死亡的最小活微生物量或毒素量。半数死量(DL50):在特定时间内能使半数实验动物于感染后发生死亡的活微生物量或毒素量。第二节病原菌引起传染的必要件1、病原菌的毒力与数量2、易感动物3、传染途径(侵入门户)呼吸道传染消化道传染皮肤粘膜创伤传染接触传染节肢动物传染第三节感染的发生发展和结局一、感染的来源

内源性外源性二、感染的结局一是机体免疫力将病原微生物消灭,使传染告终,机体获得痊愈,并遗留有或强或弱、或长或短的免疫力。二是病原菌战胜机体的免疫力,毒害机体,以至造成长期病症,甚至死亡。三、感染的类型1、显性传染概念:又叫临床感染或传染病,指侵入机体的病原菌毒力强,数量多,而机体的免疫力薄弱时,则病原菌在机体内生长繁,产生毒素,以致使机体组织细胞受到严重损害,生理功能紊乱,并出现明显的临床症状,称明显传染。类型:链接局部传染全身性传染

局部传染病原菌侵入机体后,在一定部位定居繁殖,产生毒性产物,引起局部病理损害的过程。原因为,病原菌毒力不强数量不多,机体的免疫力较强而将其限制于局部。

全身传染指侵入机体的病原菌毒力强,数量多,机体免疫力薄弱时,病原菌向周围扩散和蔓延,至适宜病原菌生长的靶器官,引起全身性传染,并出现全身临床症状者,称全身传染。病原菌在全身性传染的过程中有以下几种病理表现菌血症:病原菌自局部病灶侵入血流,并不在血液中繁殖,只能短暂经过,但也能传至机体的其它部位。如伤寒病初期。败血症:病原菌侵入血液,并在血中大量生长繁殖,造成机体严重的病理损害,引起显著的临床症状。毒血症:病原菌在局部生长繁殖过程中产生的毒素侵入血流和淋巴液,运至敏感的组织或器官,引起独特的中毒症状,而细菌不进入血流,如破伤风。脓毒血症:于感染化脓菌发生败血症的同时,化脓菌经血液循环到达其它脏器或组织,引起化脓性全身病变的传染

2、隐性感染当入侵机体的病原菌数量不多毒力较弱,机体有较强的免疫力时,病原菌被迅速消灭或部分在机体一定部位生长繁殖,引起轻度病理损害,但机体生理功能无破坏,不出现或仅出现不明显的临床症状,称隐性感染。

隐性感染的意义:通过隐性感染,机体仍可获得一定程度的特异性免疫力,在防止同种病原菌感染上有重要意义。机体可随时向环境排出病原菌。故隐性传染在传染病的发生和蔓延方面有着重要的临床意义。

3、带菌状态在隐性感染或传染痊愈后,病菌在体内继续存在并不断排出体外者处于带菌状态的机体称带菌者。带菌者是体内带有病原,但无临床症状。这种机体不断排出病原菌,不易引起人们的注意,常成为传染病流行的重要传染源。分为:健康带菌恢复期带菌者第四节病原菌的排出途径在局部传染时,因病灶破潰随分泌物和脓汁排出病原菌。在全身性传染时,发病动物机体的各种分泌物和排泄物(如鼻漏、眼漏、尿液、粪便、乳汁等)都能排出大量病原菌,是极其危险的传染源,务必引起高度重视,以避免传染病的蔓延。细菌感染的诊断一、检测细菌或其抗原直接涂片显微镜检查分离培养生化反应抗原检测二、检测抗体微生物(细菌)的分类分类系统:界、门、纲、目、科、属、种、型细菌的遗传与变异第一节细菌的变异现象形态变异

形态变异生理变异菌落的变异第二节细菌的遗传变异机制病毒

概述

一、病毒的概念:病毒(Viruses)是一类结构简单,只含一种核酸(DNA或RNA)、对抗生素不敏感、营严格寄生生活、非细胞形态的最微小生物。病毒特点个体微小结构简单专性寄生抵抗力特殊第一节病毒的形态与结构一、病毒的大小与形态砖形(痘病毒)弹状(狂犬病病毒)水泡性口炎病毒)球形(绝大多数病毒)二、包含体病毒在宿主细胞内增殖后,于细胞中形成的一种用光学显微镜即可看到的特殊“斑块”三、病毒的结构与功能

1、核酸(芯髓):为单股或双股RNA(或DNA),导入活细胞后可形成新的完整病毒,并致细胞病变。2、衣壳:包围芯髓的蛋白质称衣壳,为二十面体或螺旋对称。具有抗原性、保护作用、吸附作用。核酸和衣壳统称为核衣壳。3、襄膜:由脂质、蛋白质和糖类组成,故对乙醚敏感。有的病毒在襄膜外还有剌突。4、触须:某些无襄膜的病毒所具有。第二节病毒的增殖病毒缺乏生物细胞所具有细胞器、新陈代谢必须的酶系统和能量。其增殖,只能靠宿主细胞提供原料、能量、生物合成场所(细胞器),在病毒核酸指控下,合成病毒的核酸与蛋白质等成分,然后在宿主细胞内装配为成熟的具有感染性的病毒体,再以特定的方式释放到细胞外,感染其它易感细胞,病毒的这种增殖方式称为复制。所需时间称为复制周期。病毒复制的过程一、吸附首先是病毒与宿主细胞之间通过静电引力发生的非特异性吸附。其次是病毒与宿主细胞之间有选择性和有特殊亲和力的特异性吸附。它是病毒感染具有明显选择性的理论基础。二、穿入①通过胞饮作用进入细胞,如牛痘病毒②通过病毒与细胞膜融合后进入细胞,如疱疹病毒③病毒与细胞膜上受体作用进入细胞,如脊髓灰质炎病毒④病毒直接完整进入细胞内,如呼肠孤病毒三、脱壳病毒脱壳包括脱去襄膜和衣壳两个过程①脱襄膜,有的在与细胞膜融合时发生并向胞浆内释放核衣壳如疱疹病毒;有的在吞饮泡内发生如痘病毒。②脱衣壳,发生在吞饮泡内或细胞浆内。四、生物合成包括核酸和蛋白质合成。一般为:DNA病毒(除痘病毒和虹病毒外)在细胞核中复制。RNA病毒(含痘病毒和虹病毒)在细胞质中复制。病毒脱壳后释放核酸,这时在细胞内查不到具有感染性的完整病毒子,此期称隐蔽期或黑暗期。

五、装配及释放①无襄膜的DNA病毒如腺病毒,核酸与衣壳在细胞核内装配,细胞溶解后一次释放。②无襄膜的RNA病毒如脊髓灰质炎病毒,核酸与衣壳在细胞浆内装配,细胞溶解后一次释放。

③有襄膜的DNA病毒如单纯疱疹病毒,在核内装配为核衣壳。释放方式有三种:一是移至核膜以芽生方式进入胞浆,获得核膜成分作为襄膜。并由此渐渐释放到细胞外;二是通过核膜裂隙进入胞浆,从胞浆膜上获得襄膜,沿核周围与内质网相通的部位从细内逐渐释放。三是复合病毒如牛痘病毒的DNA与蛋白质均在胞浆中合成,形成“未成熟颗粒”经再分化成为成熟颗粒,其中一部分通过细胞表面释放,大部分则通过细胞与细胞之间接触而扩散释。④有襄膜的RNA病毒如副流感病毒,核酸与蛋白质在胞浆中装配螺旋状核衣壳,并在感染过程中使病毒特异性Ag成分(如血凝素、神经氨酸)整合于细胞膜上。当病毒以芽生方式通过细胞膜时,获得襄膜,并产生剌突。第三节干扰现象与干扰素一、干扰现象一种病毒(活病毒或灭活病毒)作用于宿主细胞后,可导致另一种在免疫学上有关或无关的病毒株不能在其中正常增殖的现象,称病毒的干扰现象。二、干扰素概念:干扰素(IFN)是病毒或其它因素如干扰素诱生剂,剌激脊椎动物组织细胞(体外或体内)产生的一种能干扰病毒增殖的特殊蛋白质。产生机理:⑴病毒与细胞DNA中干扰素基因的“抑制物”结合,从而消除抑制作用,导致产生特异性mRNA合成干扰素。⑵干扰素被释放以后进入另一个细胞,与细胞“作用因子约束物”结合导致产生干扰素。作用机制:

干扰素的作用机制不象抗病毒那样直接灭活病毒。干扰素对病毒体身没有作用,既不能直接阻止其吸附或穿入,也不能阻断释放,而是作用于宿主细胞,使其产生抗病毒蛋白质,这种蛋白质附着于细胞的核蛋白体上,选择性地抑制病毒mRNA译制为病毒蛋白质,从而影响病毒结构蛋白和酶类的合成,使复制受到阻抑而呈现抗病毒的作用。即最初感染的细胞由于病毒核酸的剌激被诱导产生干扰素,它透过细胞膜向外扩散并进入血液循环进入其它细胞。干扰素具有广谱抗病毒作用,又具有细胞种属特征。即某一种动物产生的干扰素只能保护同种属或近缘种属动物细胞。干扰素是一种活性很强的生物制剂,但对没有Ag性(或Ag很弱),故治疗病毒性疾病。亦具有抗肿瘤和调节免疫机能的作用。作用机制第四节病毒的抵抗力与分类一、病毒对理化因素的抵抗力病毒对理化因素的抵抗力与细菌繁殖体相似用理化因素使病毒丧失感染性的过程称灭活灭活后的病毒仍然保留其它生物学活性1、温度:病毒耐寒不耐热。大多数病毒可在4℃以下良好生存,尤其在干冰温度(-70℃)和液氮(-196℃)下更能长期保持其感染性。而大多数病毒于55-60℃10-30min灭活,100℃迅速灭活。有的在室温下只能存活数小时(流感、麻疹病毒),有的在自然界中可存活数日或数月(肠道病毒群、肝炎病毒)。但猪瘟Vi可耐受50℃2h,70℃1h,100℃0.5-1h。2、PH:大多数病毒在PH6-8的范围内保持稳定。在PH<5.0>9.0的环境中迅速灭活。病毒种类不同对PH的稳定性亦不同。例如呼肠孤病毒能抗PH3.0;口蹄疫病毒在PH6.0-6.5及8.0-9.0迅速灭活,猪水泡病毒在PH2.2,24h仍具有感染性。3、氧化剂:多数病毒对氧化剂敏感,常用H2O2、K2MO4、漂白粉、碘化物等灭活病毒。酚可用于几种病毒的消毒,但不宜于脊髓灰质炎病毒。4、甘油和抗生素:常用50%甘油生理盐水并加“双抗”保存病毒病料。二、病毒的分类1、按病毒的性质综合来分类:双股或单股、有无包膜、立体或螺旋体对称、子粒多少、颗粒大小、对乙醚敏感性等方面对病毒分类。2、依传染途径不同分类:呼吸道病毒、肠病毒、虫媒病毒等。3、根据寄生宿主不同分类:细菌病毒、植物病毒、动物病毒。第五节病毒的分离培养一、病料的采集与送检尽早采取病料部位适宜

冷藏速送

二、病毒的分离三、分离病毒的鉴定细胞致病作用(CPE)红细胞吸附现象干扰现象

非特异性免疫机制非特异性免疫:又叫先天性免疫,指动物生来就对某些病原微生物及其产物的不感受性。非特异性免疫的特点:具遗传性免疫力较巩固发挥作用快,作用范围广是特异性免疫的基础起着一道防御线的作用二、非特异性免疫的表现种的免疫品种的免疫个体的免疫三、非特异性免疫的机制体表的防御功能体表屏障机械阻挡和排除作用淋巴结屏障血脑屏障分泌物的局部抗菌作用正常菌群的拮抗作用炎症及吞噬作用

正常体液因素的作用组织的不感受性

抗原与抗体

第一节抗原一、抗原的概念与特性凡能剌激机体产生抗体和致敏淋巴细胞,并能与相应的抗体和致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质,称抗原或叫免疫原,即具有抗原性的物质叫抗原。抗原的特性:免疫原性:抗原能剌激机体产生抗体和致敏感淋巴细胞的特性,即产生免疫应答的特性。反应原性:指抗原能与相应的抗体和致敏淋巴细胞(即能与相应的免疫反应产物)发生特异性结合反应的特性。

二、抗原的性质异物性大分子胶体特异性完全性三、抗原的特异性与类属性四、抗原类型完全抗原和半抗原

细菌抗原

异种动物血清

同种异体组织细胞抗原

自身抗原

天然抗原与人工抗原

异嗜性抗原和肿瘤抗原

第二节抗体

机体的免疫系统在Ag剌激下产生,并能与相应Ag发生特异性结合的免疫球蛋白称抗体。主要存在于血清、淋巴液、脑脊液、粘膜分泌物和组织液中,尤其以血清中含量最高。含有Ig的血清叫抗血清(免疫血清)。Ig主要存在于血清Υ球蛋白部分。一、免疫球蛋白的结构

免疫球蛋白单体分子由四条肽链构成:两条重链(H链)两条轻链(L链)形成“T”或“Y”字形结构对称

7S单体分子结构示意图

ss

ss

v区

ss

c区

ss

枢纽区

Ig单体分为两个端:

Ig单体中四条肽链两端游离的氨基或羧基的方向是一致的,分别命名为:多肽链的氨基端(N端,L链的1/2与H链的1/4)多肽链的羧基端(C端,L链的1/2和H链的3/4)Ig单体上分为三个区域:可变区(V区):即抗原结合区或抗原结合部。1/2L链的和1/4H链的1/4。稳定区(C区):氨基酸排列顺序比较稳定。L链的1/2和H链的3/4。

枢纽区(绞链区):使抗体分子由“T”字形变成“Y”字形,暴露补体结合点。稳定区的作用①激活补体②具有抗原性,这是制备第二抗体和标记抗体的重要基础③吸咐吞噬细胞④在IgE能与肥大细胞和碱性粒细胞结合木瓜蛋白酶作用于C区

使Ig裂解为三个片段:

两个单价的具有抗体活性、能结合抗原的Fab段一个包含补体结合部及与亲细胞性功能区的Fc可结晶片段

二、抗体的性质“两价抗体”

分子量大

双重性

不均一性

破坏蛋白质的因素能破坏抗体三、免疫球蛋白的功能

与特异性抗原结合激活补体结合组织细胞通过胎盘四、抗体的分类

按作用对象:按理化特性:按来源:抗细菌性IgIgG天然Ig

抗病毒性IgIgA免疫Ig

抗外毒素IgIgM自身Ig

亲细胞性IgIgE

抗IgIgD

按反应表现:凝集素、沉淀素、补体结合Ig五、五种Ig的特性IgG

由一个7s单体构成。IgG约占血清Ig总量的75%。IgG在血清中出现稍迟,但含量高,维持时间长,分解缓慢,对构成机体的免疫力起着重要的作用。可抗菌、抗病毒、抗毒素,是体液免疫的主要因素。诊断用的血清所含抗体主要为IgG。IgG是人唯一能通过胎盘传递的抗体人初乳中含大量IgG。IgA

含量仅次于IgG,占血清Ig总量的10-20%。分两型:血清型IgA,存在于血清中,为单体。分泌型IgA,为2个单体和一个蛋白片组成的双聚体。它存在于哺乳动物的初乳、唾液、泪液鼻和气管分泌物、胆汁、胃肠道和泌尿道粘膜上及血清中。分泌型IgA含量高于血清型IgA6—8倍。分泌型IgA在消化道呼吸道和泌尿道抗传染免疫中起着十分重要的作用,是粘膜局部抗传染免疫的重要体满面液因素,又称“局部抗体”。IgM

存在于血清中,I占血清Ig总量的5-10%,由五个单体组成,故有巨球蛋白之称。在血清中出现最早,但消失快。IgM与细胞结合的特性最强。IgM对细菌有调理作用。IGM是一种高效能的Ig,IgM有较强的凝集作用和补体结合作用。IgE

含量极微,为单体。是亲细胞性Ig它通过Fc段与肥大细胞、碱性粒细胞、血小板血管内皮细胞等靶细胞上的受体连在一起,当细胞上的IgE分子再次与相应Ag相遇时,引起细胞损伤,导致组织胺等一些具有药理作用的活性物质释放引起过敏感反应,故IgE又叫致敏素。IgD

含量甚低,功能尚不清楚,可能与某些过敏性疾病和自身免疫病有关。特异性免疫

第一节免疫系统骨髓免中枢免疫器官胸腺疫腔上襄器官脾脏外周免疫器官淋巴结弥散淋巴结

T淋巴细胞免疫活性细胞B淋巴细胞巨噬细胞一、免疫器官1、中枢免疫器官(一级免疫器官):提供免疫活性细胞并控制机体的免疫反应组成:骨髓、胸腺、腔上襄及襄的类同组织2、外周免疫器官(二级免疫器官):是后天淋巴细胞定居、增生及对Ag异物产生免疫应答的主要场所组成:淋巴结和脾脏二、免疫细胞T细胞、B细胞、N细胞、K细胞及参与免疫应答过程中的过滤细胞和效应细胞单核细胞和粒细胞起主要协同作用。在免疫细胞中,受Ag剌激后,能特异识别决定簇,并通过分化增殖,形成能产生Ig和致敏淋巴细胞的的一类细胞称免疫活性细胞。1、T细胞由骨髓干细胞进入胸腺后在胸腺激素作用下经10-30天分化增殖而形成,经血液循环迁移至外周免疫器官胸腺依赖区(淋巴结副皮质区和脾小体中央动脉周围),定居繁殖。受Ag剌激后发生分化增殖,大部分形成致敏淋巴细胞,少部分形成记忆细胞。寿命较长,可存活数年数月有等。分为五个亚群T1……T5其中T1可辅助B细胞产生Ig。2、B细胞:由骨髓干细胞进入腔上襄后在腔上襄激素作用下分化增殖而形成,经血液循环迁移至外周免疫器官非胸腺依赖区(淋巴小结生发中心和脾脏红髓)定居繁殖受Ag剌激后发生分化增殖,大部分形成浆细胞少部分形成记忆细胞。寿命较短仅数天(3d)。3、参与免疫反应的其它细胞:K细胞:又叫杀伤淋巴细胞或抗体依赖性细胞毒性淋巴细胞。来源于骨髓干细胞。

K细胞重要特点:细胞膜上只有IgG的Fc受体,当特异性IgGFab段与靶细胞(如寄生虫、肿瘤细胞)膜结合后,则IgGFc段与K细胞表面的Fc受体结合,从而触发K细胞将靶细胞杀死或破坏。NK细胞:又叫自然杀伤淋巴细胞或无标志细胞。来源于骨髓干细胞。对各种靶细胞如组织细胞、瘤细胞、微生物及培养细胞均有非特异性杀伤作用,但无需Ig致敏。NK细胞主要以自身产生的淋巴毒而破坏或杀伤靶细胞,其杀伤作用较T、K弱。巨噬细胞的:吞噬或杀灭病原微生物。杀伤肿瘤细胞。识别和处理Ag住处信息。释放淋巴因活化因子激活免疫活性细胞可适当调节Ag浓度(浓缩集中或降解破坏)以免造成免疫麻痹产生干扰素。第二节特异性免疫应答过程一、特异性免疫它具有三大特点:具有严格特异性和针对性具有一定的免疫期主要表现为体液免疫和细胞免疫Ag

巨噬细胞处理

超级Ag

B淋巴细胞

TH(抗原桥)

T淋巴细胞记忆细胞记忆细胞

浆细胞敏敏淋巴细胞回忆反应回忆反应

Ig淋巴因子

体液免疫细胞免疫二、免疫反应的总过程第三节体液免疫

免疫系统在Ag剌激下,以B细胞活动为主,产生特异性Ig,以及Ig与相应Ag结合的特异性免疫反应。一、抗体产生的一般规律具有高度特异性初次反应再次反应和回忆反应

二、体液免疫的作用1、Ag-Ig复合物激活补体系统(溶菌)2、Ag-Ig复合物增强吞噬细胞吞噬作用3、Ag-Ig复合物中和外毒素、病毒4、Ag-IgG复合物可协同K细胞杀伤靶细胞5、某些Ig可造成有害的免疫损伤。三、机体获得抗体的方式通过显性或隐性传染后可相应Ig通过乳汁接受Ig人工预防接种后,机体可产生相应Ig

第四节细胞免疫细胞免疫:机体的免疫系统在Ag剌激下以T细胞活动为主,产生致敏淋巴细胞,后者释放淋巴因子的特异性免疫反应。又称细胞介导免疫。一、淋巴因子种类及其特点二、细胞免疫的临床意义1、抗细胞内寄生病原体感染:结核、布氏、鼻疽杆菌、真菌(念珠菌、球孢子菌等)和病毒等抗感染。2、引起迟发型变态反应:反应部位局部组织损伤、坏死、溃疡等变态反应。3、异体组织移植排斥反应:由于毒性T细胞的产生和淋巴毒素因子的释放所故。4、抗肿瘤免疫和自身免疫疾病。第五节抗传染免疫的特点一、天然自动免疫:动物自然感染某种传染病痊愈后,或隐性感染后,所获得的对该疾病的免疫力特点:免疫力持续时间较长,强度较大,如动物耐过炭疽、腺疫、猪瘟等传染病后,甚至可以终身免疫。二、人工自动免疫:动物接种了某种菌苗、疫苗或类毒素等生物制品后,所产生的一种免疫力。特点:免疫力持续时间的长短,因生物制品的性质、机体的反应性等因素不同而异,如接种活苗的免疫期一般较长可达一年以上,接种死苗则较短,通常只能持续4-6个月;其免疫状态往往可因病原微生物大量侵入所破坏而发生传染,因此应加强管理和检疫制度。三、天然被动免疫:动物在胚胎时期通过胎盘或出生后通过初乳,由免疫的母体被动获得Ig而形成的一种免疫力。特点:持续时间短,只有几个月,因而仅为幼畜所有。四、人工被动免疫:动物在注射了高免血清或康复动物血清后,所获得的一种免疫力。特点:产生迅速,注射免疫血清后数小时即可建立免疫力,但持续时间极短,仅2-3周,多用于紧急治疗或紧急预防。人工自动免疫和人工被动免疫区别要点变态反应第一节概述一、概念变态反应:机体再次接受同种Ag剌激后,发生的一种机能紊乱及组织损伤的特异性免疫病理反应,即改变常态的反应,严重时,可导致机体发生过敏性休克,甚至死亡。所致疾病称为变态反应性疾病或免疫性疾病。变应原完全Ag:

异种动物血清异种组织细胞微生物寄生虫动物皮毛饲料半Ag:

青霉素磺胺阿司匹林奎宁碘二硝基氯苯非那西酊生漆变应原进入机体的途径呼吸道消化道皮肤粘膜注射二、变态反应的过程致敏阶段:

机体初次接触变应原,产生Ig或致敏淋巴细胞,称致敏阶段,般为2-3周反应阶段:敏感机体再次接触同种Ag时,发生的变态反应,称反应阶段。

三、变态性疾病的表现有的是全身性的,如青霉素过敏性休克、血清过敏症等;有的是局部性的,如呼吸道反应包括酵喘和过敏性鼻炎等,消化道反应包括采食引起的过敏症等,皮肤变态反应包括荨麻疹和结核等的传染性变态反应;异体植皮脏器移植产生的免疫排斥反应第二节各型变态反应及特点根据Ig和组织细胞参与情况、抗原抗体反应情况及补体是否参加等,可将变态反应分为:第Ⅰ型变态反应第Ⅱ型变态反应

称速发型第Ⅲ型变态反应第Ⅳ型变态反应

称迟发型第Ⅴ型变态反应第Ⅵ型变态反应第Ⅰ型变态反应——过敏反应通常包括由异种动物血清及青霉素等药物引起的全身过敏反应。其特点:①是发现最早,临床上最常见;②反应发生快,通常于接触过敏原后数min或数h内发作,但消失亦快;③有较明显个体差异;④变应原可以是完全Ag也可以是半Ag;⑤参与抗体为IgE或IgG4过敏性Ig,它们吸于靶细胞上,使机体处于致敏状态;⑥补体不参加,故只引起机能紊乱而无后遗性组织损伤;⑦反应重,局部或全身性反应,严重者可休克而死亡。第Ⅱ型变态反应——细胞溶解反应①变应原可以是体内细胞本身成分,如A、B血型交叉输血时,可激活补体将红细胞溶解;②外源性变应原如某些病毒、细胞蛋白或多糖,更多见是由于大量应用某些药物与血细胞等靶细胞结合成为完全Ag;③不释放介质,在补体、吞噬细胞或在K细胞参与下杀死靶细胞,造成组织损伤。第Ⅲ型变态反应——血管炎型①参与Ig为IgG或IgM或IgA。Ag-Ig复合物存在于血液循环中或组织间隙里;②Ag-Ig复合物激活补体或招来中性细胞,释放溶酶体酶,引起组织损伤;③Ig不需固定在细胞上而是游离于血液循环中,随时可与Ag结合形成有害免疫复合物第Ⅵ型变态反应——细胞介导迟发型变态反应①无Ig和补体参加,而与致敏淋巴细胞有关②反应较慢,持续时间长,一般于第二次接触Ag后6-48h,反应达高峰可持续1-2天。③见于胞内寄生菌如结、布、鼻、真菌等引起的传染性变态反应,由血吸虫及蛔虫等侵袭后引起的肉芽肿,组织排斥反应及接触性皮炎等。血清学反应血清学反应:抗原抗体在体外结合的反应,因实施反应的某些重要因素是含抗体的动物血清,故名血清学反应。血清学反应具有严格的特异性和较高的敏感性,因此可用抗原或抗体的已知一方检测未知的另一方,作为传染病的辅助诊断和微生物的鉴定。一、凝集反应

1、直接凝集反应:

细菌、红细胞等颗粒性Ag与相应Ig混合以后,在电解质参与下,经过一定时间Ag颗粒相互凝集形成肉眼可见凝集块。参与凝集反应的Ag称凝集原,Ig称凝集素。平板法和试管法2、间接凝集反应先将可溶性Ag或Ig吸附于一种与免疫无关的有一定大小的颗粒载体表面制成固相Ag或Ig,再与相应的待检Ig或Ag结合产生的反应。分为两类:间接血球凝集反应(HA)间接血球凝集抑制反(HI)间接血球凝集反应(HA)+

+阳性间接血球凝集抑制反(HI)++阳性阴性二、沉淀反应胶体状态的可溶性Ag(如细菌和寄生虫的浸出液、组织浸出液、培养滤液、动物血清等)与相应Ig混合后,经一定时间,形成肉眼可见的沉淀物。临床上常用于诊断炭疽、梅素、鼠疫、猪丹毒、气肿疽等传染病。沉淀反应分为以下三种:实验管:

4mm小管已知Ig层叠未知Ag交界面白色沉淀环对照管:

4mm小管已知Ig层叠生理盐水交界面无沉淀环1、环状沉淀反应(Ascoli反应)2、絮状沉淀反应:将Ag和相应在试管内或凹玻片上混匀,经过一定时间性,出现肉可见絮状或颗粒状不溶性沉淀物为阳性。如诊断梅毒的康氏反应,及用标准类毒素测定抗毒素血清效价的絮状试验等。3、琼脂扩散试验单相琼扩:将已知(1:10稀释),加入等量的1%琼脂(56℃)管(或平板)中,凝固后,于其上(打孔)加待检Ag(孔中),置37℃湿合感作,2-3h后可见白色沉淀带。双相琼扩:1%琼脂凝胶制成平板后,在上面按设计图形打孔,在孔内分别加Ag和Ig,放密闭湿盒中,将使之双相扩散而形成沉淀带。

单相琼扩双相琼扩含已知Ig琼脂被检血清(Ig)待检Ag已知Ag三、补体结合反应溶菌反应:

某些细菌(霍乱弧菌)与相应的抗体混合以后,如有补体参加,则细菌发生溶解的反应,称溶菌反应。溶血反应:

红细胞与相应的抗体(溶血素)混合以后,如有补体以参加,则红细胞发生溶解的反应,称溶血反应。补体的特点1、补体是酶类物质,但均以无活性的前体形式存在于血清中2、动物血清中尤其以豚鼠血清含量最高,故多用豚鼠的新鲜血清作为补体的来源3、补体性质不稳定,易失活,经56度30分处理即灭活4、补体本身没有特异性能与任何一组抗原抗体复合物相结合,一但结合后不再游离。5、补体不与单独的抗原或单独的抗体相结合。补体结合反应的概念补体结合反应(简称补反CFT):是指在补体参加下,以绵羊红细胞(Ag)和抗绵羊溶血素(Ig)作为指示系统的抗原抗体反应。补体结合反应的原理补反包括两个系统五种成分:一是被检系统(溶菌系)中的已知Ag、待检Ig及仅供一组Ag-Ig系统反应的定量补体。二是指示系统(溶血系)中的红细胞和溶血素。首先是溶菌系统的抗原与抗体复合物与补体相互混合后产生的反应。其次为了测知溶菌系统中补体是否被利用,再加入溶血系(绵红细胞和抗绵溶血素)作为指示系统,以观察因补体游离所产生的溶血情况。如果反应的结果是不溶血为诊断阳性,发生了溶血为诊断阴性。操作与结果操练时,分两步进行:将待检系统的Ag、Ig与补体三种成加入试管内,于37度水浴作用3

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