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文档简介

仪器分析实验维生素B2的测定维生素B2维生素B2,又称核黄素，为橙色结晶性粉末。荧光测定的依据：1.结构与荧光的关系2. F

=2.3

I0

abc

当入射光强度I0

和光程一定时，上式为：

F

=Kc

即荧光强度与荧光物质的浓度成之正比，但这种线性关系只有在极稀的溶液中。对于较浓溶液，由于猝灭现象和自吸收等原因，使荧光强度和浓度不呈线性关系。标准曲线法

荧光强度vs.浓度标准曲线荧光强度核黄素浓度样本激发滤光片发射滤光片Fs-F0最大最大的激发波长最大的发射波长荧光发射处于第一激发单重态中的电子跃回至基态各振动能级时，将得到最大波长为λ3的荧光。很明显，λ3的波长较激发波长λ1或λ2都长，而且不论电子开始被激发至什么高能级，最终将只发射出波长λ3为的荧光。荧光的产生在10-7-10-9s内完成。荧光、磷光能级图S0S1S2T1吸光

1吸光

2荧光

3第一片滤光片（兰字）λ（nm）360400480530FsF0Fs-F0第二片滤光片λ（nm）420450470510550600FsF0Fs-F0固定第二片滤光片λ（nm）：固定第一片滤光片λ（nm）：实验内容1.标准曲线的制作维生素B2系列标准液的配制：操作规范灵敏度选择：（旧仪器统一选10，新仪器选4）滤光片的选择：Fs-F0最大标准曲线的绘制：c对Fs-

F0作图，线性2.样品含量的测定样品溶液的制备（称量，定容，样品处理，最后定容）样本的测定及浓度计算实验注意事项基本操作要规范：吸量管的使用，溶液转移，定容试剂取后，得放回原处保持试验台整洁移液管的使用常见移液管：标有温度和容量(注意是否标有吹)用途：准确移取一定体积的液体操作：洗涤(蒸馏水)、润洗(3次)、移液、洗涤干净注意事项：1、整个操作过程中，保持移液管的垂直；2、读数时视线与凹液面平齐溶液下端1-2cm二、吸量管吸量管的全称是“分度吸量管”，它是带有分度的量出式量器（带刻度的移液管。吸量管的使用方法与移液管大致相同。实验注意事项基本操作要规范：吸量管的使用，溶液转移，定容试剂取后，得放回原处保持试验台整洁实验报告格式1、实验目的（简单）2、实验原理（详细）3、试剂仪器（简单）4、实验步骤（简单）5、数据处理（详细，表格，图）6、结果讨论

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