生物安全管理与防护课件

生物平安管理与防护主要内容 实验室感染史 生物平安管理现状与意义 这几个概念你了解吗 生物平安柜的分类和正确使用 几个误区要关注 生物平安防护的要点实验室相关性感染Laboratoryassociatedinfections实验室感染实验室获得性感染Laboratoryacquiredinfections又称实验室感染简史实验室感染简史1886年Koch报告第一例霍乱病的实验室感染：德国柏林的一名学生在处理霍乱弧菌培养物时被感染并发病1893年Reincke报告第一例实验室伤寒感染1899年Birt和Lamb报告第一例布氏杆菌引起的实验室获得性感染1905年Johnston报告第二例布氏菌实验室感染并作了评价1931年Findlay报告第一例实验室感染肝炎的病例1932年有报告实验室工作人员被恒河猴咬伤后患猿猴疱疹病毒性脑炎，这是该病毒感染人类的第一例1943年在巴西的黄热病实验室，两周内8名实验室人员发生了委内瑞拉马脑炎1967年在德国有26名实验室人员因接触黑尾长猴的血液和组织而感染一种病毒(马堡病毒)，最终有9人死亡实验室感染简史1969年尼日利亚北部一家医院3名护士感染砂粒病毒，其中2人死亡。这是该病毒感染人的首次报告〔1951、1965、1976〕美国实验室相关感染调查5000个实验室累计感染总数：3921例与事故相关的<20%未确认的例数>80%〔气溶胶？〕最常报告的感染：乙型肝炎、肺结核、伤寒、委内瑞拉马脑炎、布鲁氏菌病实验室感染简史1999年Walker等报告实验室人员感染率1994～1995年为16.2人/10万·年1988～1989年为82.7人/10万·年2003年后新加坡、台湾和北京先后发生了实验室人员感染SARS-CoV的报告2004年中国CDC病毒所形态室SARS-CoV感染事件导致9人感染，其中1人死亡，747人被隔离实验室感染简史实验室感染的证据分析①宋、杨均在同一实验室工作，该室一直从事SARS-CoV工作②封锁病毒所后，未再出现任何SARS病人③第二代病例魏某胸水中别离到SARS-CoV，其全基因序列与实验SARS-CoV高度同源④宋、杨从未接触过野生动物⑤宋、杨潜伏期内北京没有任何其他SARS病例主要原因：病毒灭活不彻底，灭活方法没有进行有效的评评价，没有规定对每一批病毒的灭活效果进行监测和质控责任追究：13名处级以上领导被免职名处级以上领导被免职生物平安目标促进致病微生物/化学毒物/放射线/基因的平安操作并教育人们在下述环境平安操作： 实验室 调查现场 生产设施 医疗卫生设施最终目标：实验室平安事件零发生！我国的实验室生物安全管理现状1975年开展基因工程工作，生物技术取得飞速发展，有关生物安全的立法工作却相对滞后，长期实际处于无人管理的状态1990年7月国家科委立足我国国情和重组DNA技术的研究发展趋势，借鉴国外已有准则或条例，制定了我国的《重组DNA工作安全管理条例》1993年12月我国第一部生物技术管理法规——基因工程安全管理办法》正式颁布实施；2000年8月，我国签署了《生物安全议定书》，成为签署该议定书的第70个国家。2000年政府将生物安全列为健康和环境保护的新领域2001年5月国务院颁布了《农业转基因生物安全管理条例》2002年1月农业部发布《农业转基因生物安全评价管理办法》、《农业转基因生物进口安全管理办法》和《农业转基因生物标识管理办法》三个配套规章，于2002年3月20日起施行2002年以来的相关法律、法规、文件目录人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法2006.8.15病原微生物实验室生物安全环境管理办法2006.3.8人间传染的病原微生物名录2006.1.11可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定2005.12.28传染病病人或疑似传染病病人尸体解剖查验规定2005.4.30病原微生物室验室生物安全管理条例2004.11.12医疗废物管理行政处罚办法2004.5.27卫生部、劳动和社会保障部“关于保障接触病毒或细菌科研人员医疗服务有关问题的通知”2004.5.9医疗废物集中处置技术规2003.12.26医疗废物专用包装物、容器标准和警示标识规定2003.11.20医疗卫生机构医疗废物管理办法2003.10.15兽医实验室生物安全管理规范2003.10.15医疗废物分类目录2003.10.10医疗废物管理条例2003.6.16传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法2003.5.6传染性非典型肺炎病毒的毒种保存、使用和感染动物模型的暂行管理办法2003.5.6实验动物管理条例1988.11.14生物安全柜(YY0569—2005)2005.7.18生物安全柜(JG170—2005)2005.3.25生物安全实验室建筑技术规范2004.8.3实验室生物安全通用要求2004.4.5微生物和生物医学实验室生物安全通用准则2002.12.3实验动物环境与设施2001.8.29中华人民共和国刑法修正案(六)2006.6.29中华人民共和国传染病防治法2004.8.28突发公共卫生事件应急条例2003.5.9实验室生物安全手册(第3版）2004感染性物质运输2004医学实验室——安全要求2003指令2000／54／EC2000实验室生物安全指南（第3版）2004NIH重组DNA分子相关研究指南2002.4生物危害一级防护：生物安全柜的选择、安装和使用（第2版）2000.9微生物和生物医学实验室生物安全手册（第4版）1999.4我国的实验室生物平安管理现状以上立法工作对促进和加强我国生物平安起到了重要的指导作用，使得实验室的生物平安相关工作有法可依!我国的实验室生物平安管理现状2021年9月8日，评审“十一五〞国家科技支撑计划重点工程“实验室生物平安关键技术和标准的研究〞课题，内容涉及实验室空气污染防护、实验室感染性污水平安输送、实验室污染空气实时监测、实验室实时监控网络、实验室污染物泄漏以及实验室外环境样本采集等六个研究方向建立生物平安实验室、加强实验室的生物平安管理，对于我国的实验室生物平安、生物防护〔国防〕、传染病预防与控制、动物防疫、出入境检验检疫、医院感染控制和实验室网络建设等，均具有十分重要的意义：

1、为建立和管理病原微生物和其他研究生物安全平台提供保障2、为医院感染控制提供科学、平安的平台3、为加强各实验室对突发公共卫生事件应对能力提供科学、平安的实验平台生物平安实验室的重要意义实验室生物平安防护biosafetyprotectionforlaboratories实验室工作职员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、使用个体防护设置、严格遵从标准化的工作及操纵程序和规程等方面采取综合措施，确保实验室工作职员不受实验对象侵染，确保四周环境不受其污染。微生物危害评估hazardassessmentformicrobes对实验微生物和毒素可能给人或环境带来的危害所进行的评估。由人为操作或人类活动而导致生物体或其产物对人体健康和生态环境的现实损害或潜在风险。这里的危害包括对操作者、其他相关人员、环境和其他生物的危害生物因子将要或可能形成的危害，是伤害概率和严重性的综合。又称生物风险F由动物、植物、微生物等生物给人类健康和自然环境可能造成不平安的防范;包括由现代生物技术的开发和应用可能产生的负面影响所采取的有效预防和控制措施防止危险生物因子造成实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施生物平安实验室〔biosafetylaboratory)是指通过防护屏障和管理措施，从事传染性物质操作的实验室，包括:研究用实验室、动物实验室、临床检验实验室、公共卫生实验室、传染病监测实验室等什么是生物平安柜？生物平安柜(Biological SafetyCabinet,BSC)指防止操作者和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶的负压过滤排风柜。 它是实验室最根本也是最重要的平安设备。I级生物平安柜classⅠbiosafetycabinet至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作时柜正面玻璃推拉窗翻开一半，上部为观察窗，下部为操纵窗口，外部空气由操纵窗口吸进，而不可能由操纵窗口逸出。工作状态时保证工作职员不受侵害，但不保证实验对象不受污染。II级生物平安柜classⅡbiosafetycabinet至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。工作时正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部操纵窗口。外部空气由操纵窗口吸进，而不可能由操纵窗口逸出。工作状态下遵守操纵规程时既保证工作职员不受侵害，也保证实验对象不受污染。III级生物平安柜 classIIIbiosafetycabinet至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气，正面上部为观察窗，下部为手套箱式操纵口。箱内对外界保持负压可确保人体与柜内物品完全隔尽。物理抑制设备physical containment device用物理或机械方法防止致病微生物逸出的设备。高效空气过滤器HEPA(highefficiencyparticulateair)filter在额定风量下，对粒径大于即是0.3μm的粒子捕集效率在99.97%以上及气流阻力在245Pa以下的空气过滤器。实验室感染又称实验室相关性感染(laboratoryassociatedinfections)，或实验室获得性感染(laboratoryacquiredinfections)其中由于微生物气溶胶所致的实验室感染占有重要地位。有研究说明原因的实验室感染只占全部感染的18％，不明原因的实验室感染却高达82％。对不明原因的实验室感染的研究说明，医学实验室的许多操作可以产生气溶胶，由于其气溶胶分子小，易漂浮在空气中，大多数可能是病原微生物形成的感染性气溶胶在空气扩散而污染实验室的空气，当工作人员吸人了污染的空气，便可以引起实验室相关感染。在病原微生物实验室中，产生的微生物气溶胶可分为两大类：一类是飞沫核气溶胶，另一类是粉尘气溶胶。 微生物气溶胶的定义 是指液体或固体微粒均匀地分散在气体中形成的相对稳定的悬浮体系。微生物气溶胶是一群形体微小，构造简单的单细胞或接近单细胞的生物悬浮于空气中所成的胶体体系。粒子大小在0.01～100μm，一般为0.1～30μm。 2、微生物气溶胶的特点１〕生物气溶胶无色无味、无孔不入，不易发现，实验人员在自然呼吸中不知不觉吸入而造成感染。假设治疗控制不及时会造成严重后果。２〕与其自然感染的疾病相比，有些微生物气溶胶感染的病症不典型，病程复杂，难以及时诊治，影响预后。３〕有些气溶胶感染只有呼吸道粘膜免疫才有预防作用，非呼吸道免疫途径预防作用效果欠佳。现有常规疫苗的预防效果不理想，如肺炭疽。４〕呼吸道传播的传染病的微生物特别是高致病性病毒常常发生变异，尤其是其抗原性、致病性都可能发生改变，在空气中存活力增强。５〕气溶胶传播容易发生病原体在人与人、人与动物、动物与动物之间的传播。６〕可以远距离或较远距离传播，这是其与其他传播途径的显著区别，也是气溶胶传播难以预防的另一重要原因。气溶胶的产生

任何形成液体薄膜和引起明显压力差的操作均可产生

细菌接种环接种、注射器、移液管、离心机、标本混匀、匀浆、振荡、开启培养皿、标本涂片、倾倒和泼洒

86.6%实验室操作可产生气溶胶如何减少或杜绝气溶胶对人体危害呢 标准预防 标准操作 科学使用离心机 根据实验室级别配置相应级别的生物平安柜 合理的建筑布局和流程 使用警示标识生物平安标识但凡盛装生物危害物质的容器、运输工具、进行生物危险物质操作的仪器和专用设备等都必须粘贴标示有相应危害级别的生物平安标识。生物平安标识的使用在生物平安实验室入口的明显位置必须张贴生物危害标志。标志上应明确标示实验室生物平安水平等级，实验室生物平安责任人、紧急联系方式等。生物平安柜〔BSCs〕英文全称：Biosafetycabinets。用途：保护操作人员、环境和实验物品提醒：应与“超净工作台〞区分开种类：共分Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级三种。Ⅱ级分类：分为A1、A2、B1和B2四型。

BSC 排气 循环 排处 连接

所有生物学污染的管道均为负压状态。Ⅰ100%0%室外硬管ⅡA130%70%室内无ⅡA230%70%室外套管ⅡB170%30%室外套管ⅡB2100%0室外硬管Ⅲ100%0均可均可HEPA过滤器 (high-efficiency particulateairfilters)：高效空气滤过器。洁净空气是通过HEPA过滤器从生物平安柜排出HEPA过滤器可滤掉99.97%的直径为0.3微米的颗粒；但化学气体或烟雾可通过HEPA过滤器

生物平安柜的定期检测由专业人员定期检测〔建议年检〕，主要以三方面为例：进气流流速检测〔除A1型外，应不低于0.5m/s〕气流模式检测过滤器防漏检测

生物平安柜的定期检测气流模式检测合格标准：

工作区的下沉气流没有死点或回流

整个工作开口区烟雾都是向内流动

从外部进入的烟雾不会直接进入操作区域

操作区的烟雾不会自前窗上沿或边缘逃逸

生物平安柜的定期检测 HEPA过滤器摘除后需要在至少1000℃的温度下焚烧。在燃烧之前推荐进行下述处理： 在摘除前用喷漆喷头给过滤器的裸露外表喷雾。 在摘除过程中将过滤器“装袋〞。亚太地区三分之一实验室的生物平安柜处于不平安状态！误区一追求高大上，生物平安柜选型不当

生物平安柜的分类

所有生物平安柜级别一定是经NSF认证的。等级I级II级III级危险程度P1~P3级P4级性能及特征由于流向操作者的逆向气流少，预防感染性能良好，工作区由于外部混入杂菌而不适于无菌作用，只是提供对工作人员和环境的保护。具有防止操作者被感染及保证工作台内清洁的性能，可进行无菌操作，应用于范围广阔，提供对操作者、试验样品和环境的保护能处理最高危险的生物材料的工作台完全密闭型，对操作所有限制主要试验项目风速、风流试验的HEPA效率试验样品、操作者和环境保护测试，风速/风量试验，HEPA效率试验样品、操作者和环境保护测试HEPA效率试验

生物平安柜的分类一级 二级 三级 所有的生物平安柜级别一定是经NSF认证的。Ⅱ级生物平安柜的细分及特征 Ⅱ级生物平安柜有4种类型：Ⅱ级生物平安柜的细分及特征由强化的平安性能，Ⅱ级A2型是研究实验室最常用的生物安柜于易于使用原分类现行NSF分类入口风速排气/循环方式应用比例ClassII,TypeAClassII,TypeA1≥0.38m/s70%气体循环，30%气体排放室内5%ClassII,TypeB3及A/B3ClassII,TypeA2≥0.50m/s70%气体循环，30%气体由管道排放至废气通道80%ClassII,TypeB1ClassII,TypeB1≥0.50m/s30%气体循环，70%气体由管道排放至废气通道可适用于有微量挥发性有毒化学物质和痕量放射性核素作为微生物学研究的添加剂的工作场合，但是对这些化学物质和放射性核素的处理应在安全柜的直接排风区内，或者当垂直气流循环时，它们不会影响操作。5%ClassII,TypeB2ClassII, ≥0.50TypeB2和 m/s0%气体循环，100%气体由管道排放至废气通道适用于使用挥发性有毒化学物质和放射性核全 10%素作为微生物学研究的添加剂的工作场合。2023/11/17误区二专业知识欠缺，生物平安柜安装问题多

适宜的安装地点 远离门、可翻开的窗、空调通风口、风扇、实验室内人员走动频繁处。 排气区尤其容易造成气流干扰。 平安柜顶部和天花板间至少保持40cm。误区三有了生物平安柜，一切就“OK〞？BC的“灵魂〞——气流平衡〔气流稳定性〕下降气流流速测试流入气流流速测试

生物平安柜的操作技术物品平行摆放原那么&不同样品柜内移动原那么洁净物污染物防止震动原那么缓慢移动原那么明火使用原那么

正确使用生物平安柜 个人防护 平安柜内物品摆放原那么 紫外灯的使用 尽量防止使用明火 操作宜缓慢 柜内移动物品时应尽量防止交叉污染 防止震动 操作结束后选用适宜的消毒剂清洁平安柜内外表 平安柜只有在工作正常时才能使用本生灯× 不能在生物平安柜内使用明火； 使用明火将造成气流动乱，破坏HEPA过滤气源吹向台面的模式。红外高温灭菌器√误区四生物平安柜监控成“空白〞生物平安柜临床应用、维护与保养以下情况时，应对生物平安柜进行现场检测： 生物平安实验室竣工后，投入使用前，生物平安柜已安装完毕 生物平安柜被移动位置 对生物平安柜进行检修 生物平安柜更换HEPA过滤器后 生物平安柜一年一度的常规检测

生物平安柜的监测设备人员环境

人员、试验品和环境保护的微生物挑战测试；

下降气流流速测试；

流入气流流速测试；

工作舒适度有关标准；

高效过滤器完整性测试；

柜体泄漏的测试。生物平安柜临床应用、维护与保养维护与保养：每次实验结束后应对工作室进行清洗和消毒。过滤器一旦受损，应及时更换。高效空气过滤器有一定的使用寿命，随着使用期的延长，细菌和尘埃积聚在过滤器上，会导致高效空气过滤器压力损失的增大。高效空气过滤器的使用寿命到期后，应立即更换。由于过滤器可能带有污染物，操作时应注意平安防护，最好请专业人员来更换。1. 可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全柜(Ⅱ级生物平安柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。2. 处理高浓度或大容量感染性材料均必须在生物平安柜(Ⅱ级生物平安柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。上述材料的离心操作如果使用密封的离心机转子或平安离心杯，且它们只在生物平安柜中开闭和装载感染性材料，那么可在实验室中进行。3. 当微生物的操作不可能在生物平安柜内进行而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置(护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备)。二级生物平安防护实验室平安设备和个体防护4.在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出，更不能携带回家。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。5.当手可能接触感染材料、污染的外表或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束前方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。实验室设计和建造的特殊要求1. 每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。2. 实验室围护结构内外表应易于清洁。地面应防滑、无缝隙。3. 实验台外表应不透水，耐腐蚀、耐热。4. 实验室中的家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器的台(架)。5. 实验室应有可开启的窗户，应设置纱窗。6. 在实验室所在的建筑内应高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求。7. 应设置洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。8. 实验室门宜带锁、可自动关闭，门有可视窗。9. 实验室出口应有在黑暗中可明确辨识的标识。10.应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗。二级生物平安防护实验室操作要点1. 实验室人口须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物平安级别、负责人姓名和、进人实验室的特殊要求及离开实验室的程序；2. 禁止非工作人员进人实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准前方可进入；3. 禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化装及储存食物；4. 接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手；5. 以移液器吸取液体，禁止口吸；6. 制定锋利器具的平安操作规程；7. 按照实验室平安规程操作，降低溅出和气溶胶的产生；8. 每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒；9.所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行灭活，如高压灭活。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭防漏的容器内储存、运输及消毒灭菌；10.如有条件工作人员应接受必要的免疫接种(如卡介苗等)；11.必要时收集从事危险性工作人员的根本血清留底，并根据需要定期收集血清样本，应有检测报告，如有问题及时处理；12.将生物平安程序纳入标准操作标准或生物平安手册，由实验室负责人专门保管，工作人员在进入实验室之前要阅读标准并按照标准要求操作；13.工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训；14.实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒；15.人员暴露于病毒时，及时向实验室负责人汇报并记录。为何需使用生物平安柜?

考虑对操作人员，操作样品，操作环境的保护。美国国家卫生研究院NIH标准与美国国家疾病控制中心CDC实验室生物平安级别标准中要求：应用于临床、诊断、教学、研究、或者生产设施，开展有关内源性和外源性病源的工作，假设因暴露而吸入该病源,会引发严重的、可能致死的疾病。

1. 需使用ClassII级生物平安柜2. 实验人员受过专业训练3. 应有管道化的排气系统，排出的空气不再循环至建筑物内的任何其他区域。4. 建议生物平安柜每年经过测试和确证生物平安设备分类 1.超净台 2.抽风橱 3.CLASSI一级生物平安柜 4.CLASSII二级生物平安柜 5.CALSSIII三级生物平安柜〔又称手套柜〕1、超净台 正压柜 气流从顶部或底部经过过滤器后从操作区正面流向工作台面，被样品污染的气流排出柜外，没有循环气流。 超净台保护样品不受污染，适用于普通实验室或1级生物平安水平中对人员和环境无保护要求的实验。1、超净台2、CLASSI一级生物平安柜全柜•负压柜•气流经操作人员向内进入工作台面，被污染的气流通过HEPA过滤器外排出柜外，没有循环气流。CLASSI级BSC保护操作人员和环境不受污染，适用于生物平安水平中对实验样品无保护要求的实验。3、CLASSII二级生物平安柜 层流负压柜 它们可以平安的保护样品、人员和环境。 II级生物平安柜分为A型〔30%排在室内〕和B型； B型中又分为B1〔70%接管道外排〕B2〔100%接管道外排〕B3〔30%接管道外排〕CLASSII A生物平安柜•进入气流最低流速平均为0.38米/秒)；•30%气流经HEPA过滤后外排在室内；•被污染的管道和气流通道为正压状态生物平安柜空气流向CLASS IIB1生物平安柜•进入的气流最低流速平均为0.5米/秒；•70%气流通过专用的管道经HEPA过滤后接管道外排至室外；•所有受生物污染的管道和气流通道均在负压状态下或被负压的管道或气流通道包围。CLASSII B2生物平安柜•进入气流最低流速平均为0.5米/秒；•所有向内进入的气流和向下的气流均通过HEPA过滤后排到室外而不在柜内循环，也不能排入实验室；100%接管道外排。•所有的被污染的管道和气流通道都在负压状态下或被直接外排的负压管道或气流管道所包围。CLASSIIB3生物平安柜•进入的气流最低流速为0.5米/秒；•外排到室外的气流〔30%〕经过HEPA高效过滤；•所有经生物污染的管道和气流通道均为负压状态；•与CLASSIIA型气流方向相同，但与CLASSA型不同的是，它30%外排气是接管道排到室外的。II级生物平安柜Airflow4.CLASSIII生物平安柜〔手套柜〕•全封闭的、气密结构的通风柜；•通过橡胶手套进行操作；•柜内保持至少120Pa的负压；•供气通过HEPA抽入内；•外排的气流经过双层HEPA过滤或经HEPA后再经燃烧处理。•CLASSIII型BSC适用于BSL3、BSL4的生物实验。生物平安装置异同高效空工作人无涡流实验对手套箱气过滤员安全单向流象不受式操作空气污染口抽风橱无是是否否I级有是否否否II级有是是是否III级有是是是是Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级生物平安柜的区别BSC表面风速（m/s）%气流在循环 排除排风系统Ⅰ级0.360100硬管道Ⅱ级A1型0.38-0.517030派到室内或套管式的连接向室外排风0.517030派到室外或套管的Ⅱ级A2型式的连接Ⅱ级B1型0.513070硬管道Ⅱ级B2型0.510100硬管道Ⅲ级型NA0100硬管道根据保护类型的需要选择适宜的生物平安柜保护类型BSC的选择针对危险组1-3微生物的人员保护Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级针对危险组4微生物的人员保护，手套箱实验室Ⅲ级针对危险组1-3微生物的人员保护,防护服实验室Ⅰ级、Ⅱ级产品保护Ⅱ级,仅当涉及层流时用Ⅲ级针对微量的不稳定的放射性核/化学药品的保护Ⅱ级B1,向室外排风的Ⅱ级A2针对不稳定的放射性核/化学药品的保护Ⅰ级、Ⅱ级B2，Ⅲ级对各级生物平安水平实验室的要求生物安全柜生物安全级别一级二级三级四级Ⅰ级不需要随意需要不需要Ⅱ级不需要最好有需要需要，在防护服实验室中使用Ⅲ级不需要不需要最好有需要，在安全柜室使用洁净台洁净工作台

1、环境空气→工作台→过滤→样本→直接吹向操作者→排入室内

2、保护产品，不保护操作人员及操作环境

3、通过样本的空气过滤对直径大于0.3微米的颗粒，过滤效率99.9%无医院药房或无菌设备的组装。生物平安柜 1、环境空气→进入工作台→过滤→样本→高效过滤→排入室内或室外 2、经过样本的空气及排放出的空气均经过滤，对直径大于0.3微米的颗粒，超高效过滤器的过滤效率为99.999%。 3、采用负压装置，形成气幕防护屏障，保护操作人员平安应用于有一定生物危险的操作。洁净工作台≠生物平安柜 1、环境空气〔流动/排出方式〕 2、使用目的〔产品、操作人、环境〕 3、空气滤过能力 4、气幕屏障 5、应用实验室生物平安的个人防护微生物实验室生物平安防护1、临床微生物实验室中引起实验室获得性感染的微生物种类：

细菌：布鲁菌、铜绿、结核、肠道致病菌等

病毒：经血、呼吸道传播的病毒，其他病毒

真菌：二相真菌、孢子菌等

其他：衣原体、钩端螺旋体等

寄生虫：弓形体、疟原虫、血吸虫等2、引起微生物实验室中工作人员发生实验室获得性感染的途径： 经空气传播：吸入〔气溶胶、实验物〕 经口传播：“手—口〞，食入 直接接种：针刺、划伤或咬伤 黏膜接触：〔眼结膜〕 节肢动物媒介：蚊、蜱、跳蚤等3、临床微生物实验室中引起微生物感染机体的方式：

接触损伤皮肤和黏膜：

吸入：

食入：

接触感染动物：4、微生物实验室中病原微生物危险度评价依据： 对人或动物毒性的强弱： 特定病原体是否存在国内： 引发临床病症轻重、病程长短、预后情况 潜伏、慢性、不典型难诊断，无法预防～5、微生物实验室中病原微生物危险度分类标准：

Ⅳ级危险：个体/群体极大危害

Ⅲ级危险：个体极大危害/群体极小～

Ⅱ级危险：个体中度危害/群体较小～

Ⅰ级危险：个体/群体没有或极小～国家根据实验室防护水平，将实验室分为一级、二级、三级、四级。临床诊断、检测检验工作可以在二级实验室中进行。但是，发现高致病性病原微生物的其病原学的别离鉴定工作应当转移到三级以上的实验室中进行。实验室生物平安防护分级 一级生物平安防护实验室，简称BSL1或P1 二级生物平安防护实验室，简称BSL2或P2 三级生物平安防护实验室，简称BSL3或P3 四级生物平安防护实验室，简称BSL4或P4一级生物平安防护实验室平安设施和个体防护：一般无须使用生物平安柜等专用平安设备工作人员在实验室应穿工作服，带防护眼镜工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套 实验室结构和设施、平安操作规程、平安设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物 包含微生物举例麻疹病毒乙型肝炎病毒衣原体沙门氏菌HIV血清学检测志贺氏菌二级生物平安防护实验室BSL-2实验室二级生物平安防护实验室设计和建造的特殊要求：•消毒设施〔高压灭菌锅、化学消毒装置等〕•洗眼装置•可自动关闭的门锁•门口有发光指示装置•换气装置〔3-4次/小时〕满足一级实验室(标准微生物操作规程)各款要求，在此根底上特别注意：1.制定出入制度2.实验室人口贴上生物危险标志3.制定实验室特定的生物平安操作规那么4.每年一次最新培训制度二级生物平安防护实验室特殊微生物操作规程5.使用塑料器材代替玻璃器材6.禁止用手处理破碎的玻璃器具7.培养基、组织、体液及其它具有潜在危险性的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及消毒、灭菌8.用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽，禁止用手直接从注射器取下。9.用过的针头必须直接放入防穿透的容器中。10.非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒11.工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗，卡介苗等)12.必要时收集从事危险性工作人员的本底血清13.严格执行实验室工作人员年度采血检测HIV抗体和备案制度。每半年进行一次HIV抗体检测，并保存样品14.对从事艾滋病实验室工作的人员，因工作中意外事故造成HIV职业暴露者，所在单位应负责解决抗病毒及其它相应治疗的医疗费用15.实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒16.人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案17.禁止将无关动物带入实验室二级生物平安防护实验室平安设施和个体防护：处理以下致病微生物时应在生物平安柜(Ⅱ级)中进行，包括:高浓度容量有喷溅可能性上述材料的离心操作如使用密封的离心机转子或平安离心杯，且只在生物平安柜中开闭，可在实验室中进行Ⅱ级生物平安柜必须每年进行一次年度现场检测 当微生物的操作不可能在生物平安柜内进行时，须使用面部保护装置 应有相应的SOP 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服，不得穿着外出。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃 当手可能接触感染材料、污染的设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室，工作完全结束前方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用以下操作必须在P2实验室或全排式生物平安柜中进行：1、含漱液、血清和血液等样品的诊断检测2、溶解、固定或用其他方法处理灭活的病毒和(或)有传染性的病毒基因片段3、常规的细菌和毒素检查4、可能产生气溶胶的样品处理5、临床样品的包装、分装6、离心管和离心机转头的封闭和开启 实验室结构和设施、平安操作规程、平安设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素。通常已有预防的疫苗 包含微生物举例结核分枝杆菌鼠疫杆菌Q热病原体澳大利亚立克次氏体牛分枝杆菌炭疽杆菌HIV(血清学检测除外)加拿大立克次氏体三级生物平安防护实验室BSL-3实验室三级生物平安防护实验室 必须安装Ⅱ级或以上生物平安柜，感染性材料的操作应在生物平安柜中进行。 当操作不得不在柜外进行时，必须个体防护与使用物理抑制设备综合防护措施 在进行感染性组织培养、有可能产生感染性气溶胶的操作时，必须使用个体防护设备〔如呼吸保护装置等〕。 入室工作前/后有专用更衣室，室内有必备品〔消毒剂、冲洗液、药品等〕。排除的空气不循环，实验室内负压以下操作必须在P3实验室中进行：1、用细胞培养的方法别离病毒2、收集或浓缩病毒或其培养产物3、用活病毒或病毒的全基因接种动物4、咽拭子样品的诊断检测P3实验室示意图 实验室结构和设施、平安操作规程、平安设备适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素 与上述情况类似的不明微生物，也必须在四级生物平安防护实验室中进行，带有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别的实验室中处理 包含微生物举例黄病毒 埃博拉病毒(主要为接触传播) 中欧蜱传脑炎病毒四级生物平安防护实验室四级生物平安防护实验室 在Ⅲ级生物平安柜中进行操作。 入室必须换上全套实验室服装。 实验室必备的配套装置与装备。BSL–4被戏称为“魔鬼实验室〞分为五个区共有10道门 粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位 衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理 污染物泼溅：发生小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消毒处理；发生大范围污染物泼溅事故时，应立即通知实验室主管领导和平安负责人到达事故现场查清情况，确定消毒的程序，、美国国立美国疾病源操作一级屏障二级屏障卫生研究病控制所中心P1BSL—1不会经常引发健康成人疾病标准的微生物操作不要求开放实验台、洗手池P2BSL—2人类病源菌，因皮肤伤口、吸入、黏膜曝露而发生危险BSL—1操作外加：1、限制1级、2级生物BSL-1外加：高压灭菌锅进入2、有生物危险警告标志3、“锐器”安全措施4、生物安全手册，其中规定废安全柜实验服、手套、若需要则采取面物消毒和医疗观察部保护措施P3BS