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文档简介

大肠杆菌转化实验报告实验原理转化（Transgormation）是将外源DNA分子引入受体细胞，使受体细胞获得新的遗传性状的过程。感受态细胞在0℃，CaClz的低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形，而转化混合物中的DNA形成抗DNase（DNA酶）的羟基-钙磷酸复合物，并黏附于细胞表面，经42℃短时间热冲击处理，可促使细胞迅速收缩，吸收DNA复合物，完成转化。实验流程1、在无菌工作台内，向各管含质粒的感受态中，加入500微升新鲜的LB培养液（无抗性）；

2、放置于摇床中，在37℃的条件下，培养一个小时；

3、在等待培养的时候，我们可以对涂布器进行灭菌处理；

4、一小时后，培养完成，取出感受态，对其进行一个短暂的离心；（从摇床中取出感受态）（对感受态进行离心）

5、将前面准备好的培养皿进行标记，用移液器吸取100μl菌液，相应抗性（kana30-50μg/ml，amp50-100μg/ml）的固体培养基上，用涂布器旋转涂抹均匀，在超净工作台中进行风干；

（给培养皿做好标记）

（吸取100μl菌液）

（借助涂布器涂抹均匀）

6、用酒精棉对涂抹器进行擦拭，再次进行高温灭菌；

7、密封培养皿后，将培养皿倒置，在37℃的恒温孵育箱中，进行培养12-16小时；8、次日，对菌落的生长情况进行观察。

注意事项1、实验过程中应穿着专用工作服和使用一次性手套；2、用酒精棉对涂布器进行擦拭时，要注意，涂布器上的酒精熄灭后要稍等

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