规模场猪伪狂犬病净化技术规范

规模场猪伪狂犬病净化技术规范范围本文件规定了规模场猪伪狂犬病净化中的术语与定义、净化的净化条件、净化标准等。本文件适用于规模场开展猪伪狂犬病的净化。规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18641伪狂犬病诊断技术术语和定义猪伪狂犬病猪伪狂犬病是由属疱诊病毒科、疱疹病毒甲亚科（α疱症病毒）、暂定水痘病毒属的猪伪狂犬病毒（porcinePseudorabiesvirus，PRV）引起的猪的急性传染病。猪感染PRV具有年龄差异性，仔猪更容易感染，突然死亡，并出现特征性的神经症状，如共济失调、抽搐等；成年猪主要出现呼吸窘迫或亚临床症状；在怀孕母猪可导致胎儿吸收、木乃伊胎或者流产。猪伪狂犬病净化猪伪狂犬病净化是指通过监测、检验检疫、隔离、扑杀等一系列综合措施，在特定区域或场所消灭和清除猪伪狂犬病毒，从而达到并且维持在该范围内猪只个体不发病和无感染的状态。从狭义上来说，猪伪狂犬病净化是指在一个猪场，通过制定监测方案，检测出患病（感染）猪只，通过淘汰根除猪伪狂犬病的过程，主要是针对种猪场或规模猪场进行净化；从广义上来说，是通过监测、检验检疫、隔离、淘汰、培育健康猪群、强化区域性生物安全等综合措施，在特定区域消灭猪伪狂犬病的过程。猪伪狂犬病毒gB抗体PRV囊膜蛋白gB诱导机体产生的中和抗体。囊膜蛋白gB是猪伪狂犬病毒中一种保守蛋白，并且是病毒感染过程中的必需成分，主要参与病毒与宿主细胞膜的融合过程。猪伪狂犬病毒gE抗体囊膜蛋白gE诱导机体产生中和抗体。囊膜蛋白gE是猪伪狂犬病毒中的一个非必需糖蛋白，gE缺失后不会影响病毒在宿主细胞上的增殖。猪伪狂犬病毒gE基因缺失疫苗疫苗的毒株是利用基因工程等手段敲除PRVgE基因的突变株。猪免疫了gE缺失疫苗后不能产生抗gE糖蛋白的抗体。以gE抗体为标靶进行血清学检测，可以区分免疫抗体和野毒感染抗体。猪伪狂犬病稳定场猪群中有感染野毒的猪，但在体内免疫抗体和场内其他综合防控措施的共同作用下，感染野毒的猪不表现或只有部分表现轻微的临床症状时，即判定该猪场为猪伪狂犬病稳定场。猪伪狂犬病发病场猪群中有感染野毒的猪，并表现出高烧，继而出现厌食、精神萎靡、消化不良、口水增多、呕吐、战栗、最终出现共济失调，尤其是后腿症状最明显，呼吸道症状主要有咳嗽、打喷嚏、呼吸困难；初产母猪和母猪出现胚胎死亡、吸收胎、木乃伊胎、流产或死胎等临床症状时，即判定该猪场为猪伪狂犬病发病场。猪伪狂犬病受威胁场已转为猪伪狂犬病稳定的猪场，其周边5公里以内的其他猪场暴发伪狂犬病时；在非免疫状态下达到猪伪狂犬病净化状态的猪场，由于各种原因导致的病原进入场区时，即判定该猪场为猪伪狂犬病受威胁场。净化条件净化的准备工作使用猪伪狂犬病毒gE基因缺失疫苗和gE-ELISA抗体检测试剂盒，对猪群采血进行gE抗体监测，掌握猪群中猪伪狂犬病毒野毒的感染情况。人财物意识支持，只有具备广泛净化共识，在人力、财力、物力等方面进行协调和支持，才能有效促进净化工作的开展。区域化净化部署，伪狂犬病具有传播迅速特点，适合区域化净化模式，制定相应的净化路线，采取“检测、消毒、扑杀、无害化处理、疫病净化”的综合性防控措施，以期取得确实的净化效果。净化的四个阶段净化前期准备阶段本底调查按猪群规模的5%-10%进行采样，进行病原和抗体检测，检测方法：按照GB/T18641中章5的规定，用酶联免疫吸附实验检测gE和gB抗体，按照GB/T18641中章7的规定，用聚合酶链式反应检测PRV核酸，确定猪群的野毒感染情况和免疫抗体水平。规范免疫程序所用灭活苗或活疫苗均为猪伪狂犬病毒gE基因缺失疫苗猪伪狂犬病稳定场：0-3日龄：活疫苗滴鼻免疫，45日龄免疫，70-75日龄，若生产周期在6-7个月的猪群在120日龄再免疫一次。后备猪：配种前8周免一次，配种前4周加强免疫。种猪：一年普免4次。猪伪狂犬病发病场或猪伪狂犬病受威胁场：种公猪和种母猪：紧急接种灭活疫苗，免疫两次，两次间隔4-6周，此外，在配种前（配种前20天左右）免疫一次，在产前1个月加强免疫一次。发病猪群：紧急接种活疫苗两次，每次间隔4周。免疫控制阶段加强生物安全措施引种要求：引入种猪应取得《种畜禽生产经营许可证》和《动物防疫条件合格证》，且猪伪狂犬病阴性的种猪场引种（包括精液），确定为PRVgE抗体阴性后方可引进。隔离检疫：种猪入场后，需隔离饲养2个月，经gE抗体检测阴性再与本场猪混群，混群后每年3次检测，平均每4个月检测一次gE和gB抗体。养殖模式：采用自繁自养、全进全出、早期断奶、多点式和独立饲养等进行生产。人员和车辆管理：加强猪场门口来往人员、车辆的控制与消毒；根据养殖规模、生产条件和方式以及场区布局，合理规范饲养员、技术人员、管理人员的活动，严格执行从业人员健康年检和进场消毒；场外人员不得进入生产区。其他动物控制：猪场内不得饲养其他动物。防止流浪犬猫等动物窜入场内，采取严格的灭鼠措施，并定期开展灭虫、灭蚊、灭苍蝇工作。消毒：按照DB31/T432要求，选用优质低毒低残留的消毒剂，对猪舍、栏圈、内外环境、用具、运输工具以及其它一切可能被污染的场所和设施、设备进行严格消毒，并将消毒工作规范化、制度化。异常猪处理：隔离病猪，淘汰无治疗价值的病猪。对死亡猪只、死胎及相关物品等，进行无害化处理。饲料：按各生产阶段猪的营养需要，提供均衡、适宜的饲料。在饲料生产、储存、运输和使用过程中，防止饲料的发霉、变质和受污染。免疫与监测使用含gE缺失的灭活疫苗对猪群进行免疫，并每半年按猪群总量的5%-8%进行抽样，采血进行gE和gB抗体检测。当猪群的gE抗体阳性率下降到20%左右后分群，gE抗体阳性猪与阴性猪分开饲养。将gE抗体阳性的种猪转为商品猪，有计划地逐步淘汰野毒感染猪只。强化gE抗体阴性群的隔离和监测，最后建立起完全健康的gE抗体阴性猪群。免疫净化阶段对全场猪逐头进行gE抗体检测，淘汰（转为商品猪）全部gE抗体阳性猪只；淘汰阳性猪后建立的阴性猪群，在逐一检测后的一个月，按猪只总数的10%抽样，复查gE抗体；步骤中若无gE抗体阳性猪，则三个月后再次按猪只总数10%的比例抽样，再次进行gE抗体复查；步骤中连续的两次复查为阴性，则每半年对猪群抽样进行gE和gB抗体检测，对猪群中免疫抗体水平和野毒感染情况进行监视；步骤4.1.3.2-4.1.3.4中任意一个步骤的复查中出现了gE抗体阳性：若阳性率在1%-5%，则重新对全群逐一进行gE抗体检测，剔除全部阳性猪只；若阳性率低于1%，则按步骤4.1.3.2-4.1.3.5，以建立的阴性猪群监测方式进行。净化维持阶段常规监测方案见附录A。设立哨兵动物：在种猪舍放置猪伪狂犬gB抗体阴性仔猪，观察是否感染和发病，检测gE抗体情况，判断是否感染野毒。加强引种监测，禁止引入gE病XX性带毒种猪进一步完善和巩固生物安全措施规模场猪伪狂犬病的净化标准免疫无疫标准同时满足下列要求，视为达到免疫无疫标准生产母猪和后备种猪抽检（抽检要求见附录B），猪伪狂犬病病毒gB抗体阳性率大于90%；种公猪、生产母猪和后备种猪抽检（抽检要求见附录B），猪伪狂犬病病毒gE抗体检测均为阴性；连续两年以上无临床病例。净化标准同时满足以下要求，视为达到净化标准种公猪、生产母猪和后备种猪抽检（抽检要求见附录C），猪伪狂犬病病毒gE和gB抗体检测均为阴性；停止免疫两年以上，无临床病例发生。

（规范性附录）

规模场猪伪狂犬病常规监测方案表A.1为本文件中规模场猪伪狂犬病净化维持阶段的常规监测方案。规模场猪伪狂犬病常规监测方案猪的类别抽样比例监测频率监测项目监测结果用途公猪全群逐一检测每年3次检测，平均每4个月检测一次伪狂犬gE和gB抗体检测1）gE抗体阳性的建议转商品猪淘汰2）gB抗体不合格的，加强免疫，连续两次加强免疫不合格的，直接转商品猪淘汰后备（公猪/母猪）全群逐一检测1）4月龄（引种）2）8月龄（配种前20天）怀孕母猪和产房母猪全群的15-20%抽样每年3次检测，平均每4个月检测一次1）gE抗体结果用于分析猪群是否感染野毒2）gB抗体结果用于本场免疫方案的调整（免疫前检测就是抗体水平监测，免疫后检测就是免疫效果评估）仔猪20-30头/次，每次随机抽10窝，每窝随机抽2-3头仔猪35日龄、49日龄、63日龄分别检测一次伪狂犬gB抗体检测监测仔猪体内猪伪狂犬病毒的母源抗体水平的消长规律，用于判断仔猪群的最佳免疫时间育肥猪30头/次，每次随机抽10栏，每栏随机抽3头77日龄、90日龄、120日龄分别检测一次伪狂犬gE和gB抗体检测1）gE抗体结果用于分析猪群是否感染野毒2）gB抗体结果用于免疫效果评估

（规范性附录）

规模场猪伪狂犬病免疫无疫标准抽检要求表B.1为本文件中规模场猪伪狂犬病净化达到免疫无疫标准的抽检要求。规模场猪伪狂犬病免疫无疫标准抽检要求检测项目检测方法抽样种群抽样数量样本类型抗体检测gE-ELISA种公猪生产公猪存栏50头以下，100%采样；生产公猪存栏50头以上，按照证明无疫的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：3%）血清生产母猪后备种猪按照证明无疫的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：3%）；随机抽样，覆盖不同猪群血清抗体检测gB-ELISA生产母猪按照预估流行率的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：90%可接受误差：10%）血清后备种猪按照预估流行率的公式计算（置信区间：95%，预期流行率：90%可接受误差：10%）血清

（规范性附录）

规模场猪伪狂犬病净化