饲料分析与质 检

本文格式为Word版，下载可任意编辑——饲料分析与质检《饲料分析与饲料质量检测技术》课程试验指导

《饲料分析与质检》课程试验

教学试验进度安排

时间组别实验内容饲料中真蛋白质的测定蛋白质溶解度的测定饲料中钙含量的测定饲料中磷含量的测定饲料中植酸磷的测定油脂酸价的测定油脂过氧化值的测定饲料离体消化率的测定动物蛋白质掺假的鉴别（显微镜检测技术）试验十11-111-2试验十一试验十二颗粒饲料稳定性、悬浮性测定协同饲料鱼粉质量的评判鱼油品质的评判待测样品待测样品2642样品鱼粉豆粕鱼粉豆粕豆粕鱼油鱼油鱼粉鱼粉学时32322232410-27试验一10-28试验二试验三试验四10-29试验五试验六10-30试验七试验八试验九10-31试验十三饲料分析与检测试验室的建制试验地点：30教学楼102、215注意：1、该试验为开放性试验（每天早中晚以及周末）；2、每个试验完成后需要及时上交试验原始记录。

试验要求：操作规范，细心观测，认真记录，确凿测定，认真分

析试验数据。2023-10-26

1

《饲料分析与饲料质量检测技术》课程试验指导

试验一、饲料中真蛋白质的测定

一、试验目的

饲料中蛋白质含量是判定饲料营养价值的一项重要指标，饲料中粗蛋白质包括真蛋白质和非蛋白质两部分含氮物质，后者主要包括游离氨基酸、硝酸盐、氨等，故不能反映出饲料蛋白质对动物的真正营养价值。通过对饲料真蛋白的测定，评价饲料原料如鱼粉等是否掺入非蛋白氮，以保证原料的质量和协同饲料的营养质量。

真蛋白质，也叫纯蛋白质，是指由氨基酸合成的一类高分子化合物。二、试验原理

蛋白质是含氮的有机化合物。蛋白质与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量可计算得样品之氮含量，再乘以一定的换算系数（6.25），即粗蛋白质含量。含氮量*6.25=蛋白含量

蛋白质在一定碱性条件下，能与重金属盐类发生盐析作用而析出沉淀，此沉淀物不溶于热水，而非蛋白氮则易溶于水。用热水洗沉淀，将水溶性含氮物洗去，剩下的沉淀物再用凯氏定氮法测定，得出真蛋白质的含量。

2CHCHNHCOOH+13HSO

3

2

2

4→

3

(NH)SO+6CO+12SO+16HO……..消化

42

4

2

2

2

(NH)SO+2NaOH→2NH+2HO+NaSO

423

4

2

2

4

HBO+NH→NHHBO

3

3

4

2

3

…….蒸馏…….滴定

NHHBO+HCl→NHCl+HBO

4

2

3

4

3

3

三、试剂及配制

（1）100g/L硫酸铜溶液：10g硫酸铜（CuSO4.5H2O）溶于100mL水中。（2）25g/L氢氧化钠溶液：2.5g氢氧化钠溶于100mL水中。（3）10g/L氯化钡溶液：1g氯化钡（BaCl2.H2O）溶于100mL水中。（4）2mol/L盐酸溶液

（5）硼酸吸收液：10g/L硼酸溶液1000ml，参与1g/L甲基红乙醇溶液7ml，与1g/L溴甲酚绿乙醇溶液10ml，40g/LNaOH溶液0.5ml，混合。

2

《饲料分析与饲料质量检测技术》课程试验指导

（6）混合指示液：1g/L甲基红乙醇溶液与5g/L溴甲酚绿乙醇溶液，等体积混合。溴甲酚绿，0.5%乙醇溶液配置：溴甲酚绿0.125g+25ml乙醇。甲基红，1%乙醇溶液配置：甲基红0.025g+25ml乙醇。

（7）盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB/T601制备。0.02mol/L盐酸标准溶液：1.67ml盐酸，分析纯，注入1000ml蒸馏水中。0.1mol/L盐酸标准溶液：8.3ml盐酸，分析纯，注入1000ml蒸馏水中。其他试剂同粗蛋白测定一致。四、测定步骤

试样的处理：确凿称取试样1g（确切到0.1mg），置于200ml烧杯中，加蒸馏水50ml煮沸，参与100g/L硫酸铜溶液20ml和25g/L氢氧化钠溶液20ml，边加边搅拌，放置1h以上或静置过夜，沉淀物以中速定性滤纸过滤，用60-80℃热水反复洗涤沉淀5-6次，直至滤液无SO42-为止（取10g/L氯化钡溶液5滴和2mol/L盐酸1滴检查滤液，至不生成白色沉淀为止）。将沉淀与滤纸包好，放在65℃烘箱枯燥2h。

试液的消化：将烘干的试样连同滤纸一起放入凯氏烧瓶中,参与硫酸铜0.4g,无水硫酸钾6g,与试样混匀，再加浓硫酸10ml和2粒玻璃珠，在电炉上消化直至溶液呈透明的蓝绿色。以下操作同粗蛋白质的测定。

空白的测定：除不加试样外，其余操作同粗蛋白质的测定。

五、结果计算

真蛋白（%）=(V1-V2)×C×0.0140×6.25×100m×V′/V

式中：V1—滴定试样时所需标准溶液的体积，ml；V2—滴定空白时所需标准溶液的体积，ml；

C—盐酸标准溶液的浓度，mol/L；V—试样分解液的总体积，ml；

V′—试样分解液蒸馏用体积，ml；

0.0140—每毫克当量氮的克数（1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数）；m：样品的质量（体积），g（ml）；6.25—氮换算成蛋白质的平均系数。

蛋白质中氮的含量一般为15～17.6%，按16%计算乘以6.25即为蛋白质，乳制品为6.38，面粉为5.70，玉米、高粱为6.24，花生为5.46，米为5.95，大豆及其制品为5.71，肉与肉制品为6.25，大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83，芝麻、向日葵为5.30。

3

《饲料分析与饲料质量检测技术》课程试验指导

试验二、饲料钙的测定（乙二胺四乙酸二钠法）

一、试验目的：

通过对饲料中钙含量的测定，保证饲料原料和协同饲料的营养质量二、试验原理：

将试样中有机物破杯，钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺、乙二胺、盐酸羟胺和淀粉溶液消除干扰离子的影响，在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准溶液络合滴定钙，可快速测定钙的含量。

三、试验试剂试验用水应符合GB/6682中三级用水规格，使用试剂除特别规定外均为分析纯。盐酸羟胺。三乙醇胺。乙二胺。

盐酸水溶液，1+3。

氢氧化钾溶液(200g/L)：称取20g氢氧化钾溶于100mL水中。

淀粉溶液(10g/L)：称取1g可溶性淀粉入200mL烧杯中，加5mL水润湿，加95mL沸水搅拌，煮沸，冷却备用(现用现配)。孔雀石绿水溶液(1g/L)。

钙黄绿素-甲基百里香草酚蓝指示剂：0.10g钙黄绿素与0.10g甲基麝香草酚蓝与0.03g百里香酚酞、5g氯化钾研细混匀，贮存于磨口瓶中备用。

钙标准溶液(0.001g/mL)：称取2.497g至105℃～110℃枯燥3h的基准物碳酸钙，溶于40mL盐酸水溶液(1+3)中，加热赶除二氧化碳，冷却，用水移至1000mL容量瓶中，稀释至刻度。

乙二胺四乙酸二钠(EDTA)标准滴定溶液：称取3.8gEDTA入200mL烧杯中，加200mL水，加热溶解冷却后转至1000mL容量瓶中，用水稀释刻度。四、测定步骤

称取试样2g～5g于坩埚中，确切至0.0002g，在电炉上防备炭化，再放入高温炉于550℃下灼烧3h(或测定粗灰分后连续进行)，在坩埚中参与10mL盐酸溶液和浓硝

4

《饲料分析与饲料质量检测技术》课程试验指导

酸数滴，防备煮沸，将此溶液转入100mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。

确凿移取试料分解液5mL～25mL(含钙量2mg～25mg)。加50mL水，加10mL淀粉溶液、2mL三乙醇胺、1mL乙二胺、1滴孔雀石绿，滴加氢氧化钾溶液至无色，再过量10mL，加0.1g盐酸羟胺(每加一种试剂都须摇匀)，加钙黄绿素少许，在黑色背景下马上用EDTA标准滴定溶液滴定至绿色荧火消失浮现紫红色为滴定终点。同时做空白试验。

附：高锰酸钾法

草酸铵定量沉淀，用高锰酸钾法间接测定钙的含量。试验步骤包括甲基红指示剂和高锰酸钾标准溶液的配制、标定，饲料的选取和制备，将得到的饲料样本称取3-5g于坩埚中，采用干法将其分解，得到分解液；确凿移取分解液10-20ml于烧杯中，加蒸馏水100ml，指示剂2滴，滴加氨水至溶液成橙色。再加盐酸使溶液变成红色，防备煮沸。缓慢参与草酸铵10ml，放置过夜，生成沉淀；滤纸过滤沉淀，将得到的沉淀连同滤纸一起转入原烧杯，加硫酸10ml，蒸馏水50ml，加热，用高锰酸钾标准液滴定，同时进行空白测定。五、结果计算