免疫学在医学中的应用

免疫学-发展简史早在1000数年前，人们就发现了\o"免疫现象"免疫现象，并由此发展起来对\o"传染病"传染病的免疫防止。中国人首先发明了用人痘痂皮接种以防止天花，并且在十五世纪中后期的明朝隆庆年间有较大改善，并得到广泛的应用。后来，这一伟大发明传输到\o"日本"日本、\o"朝鲜"朝鲜、\o"俄国"俄国、\o"土耳其"土耳其和\o"英国"英国等许多国家。后英国医生\o"琴纳"琴纳据此研究出用\o"牛痘菌"牛痘菌防止\o"天花"天花的办法，为免疫学对传染病的防止开辟了广阔的前景。全世界能在20世纪70年代末消亡天花，\o"接种"接种牛痘菌发挥了巨大作用。\o"免疫学网络教程网"[1]19世纪末，法国化学家、微生物学家\o"巴斯德"巴斯德于研究人和动物的传染病时，分析了免疫现象。并在琴纳的启发下，他发明用\o"减毒炭疽杆菌"减毒炭疽杆菌苗株制成疫苗，防止动物的\o"炭疽病"炭疽病；用减毒狂犬病毒株制成\o"疫苗"疫苗，防止人类的狂犬病。出名动物学家\o"梅契尼科夫"梅契尼科夫在长久研究昆虫和动物细胞吞噬异物的现象后，于1883年指出体内的\o"白细胞"白细胞和肝、脾组织中的\o"吞噬细胞"吞噬细胞含有吞噬和消化细菌的能力。德国细菌学家、免疫学家\o"贝林"贝林于1890年发现免疫血清中有抗白喉毒素的抗毒素存在，日本细菌学家\o"北里柴三郎"北里柴三郎也发现抗破伤风毒素的\o"抗毒素"抗毒素，两人共同研究血清疗法成功，对治疗白喉和破伤风患者获得良好效果。从此，人们开始探讨免疫机制，把细胞的吞噬作用和抗毒素的中和作用当作是特异性免疫的根据，并逐步开展\o"细胞免疫"细胞免疫和\o"体液免疫"体液免疫两大学派的争鸣。细胞免疫学派的首领是梅契尼科夫，体液免疫学派的首领是德国细菌学家\o"埃尔利希"埃尔利希。埃尔利希用生物化学办法研究免疫现象，特别是以\o"蛋白质化学"蛋白质化学和\o"糖化学"糖化学作为基础，探讨抗原和抗体的本质及其互相作用，于1896年提出抗体形成的\o"侧链学说"侧链学说，这一学说直到今天还含有实际意义。两大学派的争鸣增进了免疫学的发展。到20世纪60年代，对体液免疫的研究已经达成分子生物学的水平，已经搞清抗体的分子构造和功效。同时，对细胞免疫的研究也获得了明显的进展，过去认为小淋巴细胞是处在\o"衰老终末期"衰老终末期，而现在\o"免疫学"正常红细胞电镜图已必定它是免疫系统的一大类含有免疫活性的淋巴细胞，在发挥免疫功效中起着重要作用。此后人们进一步阐明了\o"小淋巴细胞"小淋巴细胞的构造，以及个体的发生和分化过程，特别是在杂交瘤技术方面获得了突破性的成就，这不仅丰富了普通\o"细胞学"细胞学的知识，并且为获得\o"单克隆抗体"单克隆抗体或介质物质开辟了一条新的道路。许多学者还注意到：当\o"病原微生物"病原微生物入侵的时候，机体首先能够获得特异性免疫，另首先也会出现机体免疫损害。自从德国细菌学家\o"科赫"科赫研究\o"结核杆菌"结核杆菌所引发的迟发型变态反映以来，人们逐步发现不仅细菌及其产物能够引发机体免疫损害，就连异种血清蛋白甚至许多很简朴的化学物质再次进入机体，也会使机体组织遭到破坏。20世纪中期，随着组织器官移植的开展，对\o"移植物"移植物排斥、免疫耐受性、\o"免疫克制"免疫克制、\o"免疫缺点"免疫缺点、\o"本身免疫"本身免疫、\o"肿瘤免疫"肿瘤免疫等进行了进一步的研究，认识到\o"胸腺"胸腺、\o"法氏囊"法氏囊和\o"脾脏"脾脏在机体免疫功效中的重要意义，认识到过去把免疫过程局限于抗传染免疫的片面性，也认识到免疫应答是既可防御传染和保护机体、又可造成免疫损害和引发疾病的一种生物学过程。也就是说，免疫是生物体对一切非己分子进行识别与排除的过程，是维持机体相对稳定的一种\o"生理反映"生理反映，是机体自我识别的一种普遍生物学现象。免疫学-免疫学应用免疫学广泛应用于三大方面：①传染病防止：接种菌苗、疫苗，使机体主动产生免疫力.严重急性呼吸道综合征（SARS）及艾滋病，终将有赖于疫苗的发明。②疾病治疗：涉及肿瘤、慢性传染病及超敏性疾病，可用抗体、细胞因子、体外扩增的免疫细胞及治疗性抗原疫苗治疗。③免疫诊疗：按抗原与抗体及T

细胞受体特异结合的原理；按抗原能活化特异的适应性免疫应答，发展起多个特异敏感的免疫学诊疗办法，已广泛用于ABO血型定型，传染病诊疗，妊娠确诊等等。\o"免疫学教程"[2]免疫学-免疫功效当代免疫学认为，机体的免疫功效是对抗原刺激的应答，而免疫应答又体现为免疫系统识\o"免疫学"吞噬细胞吞噬病菌别自己和排除非己的能力。免疫功效根据免疫识别发挥作用。这种功效大致有：对外源性异物(重要是\o"传染性因子"传染性因子)的\o"免疫防御"免疫防御；去除衰退或\o"损伤细胞"损伤细胞的免疫，以保持本身稳定；消除突变细胞的免疫监视。只有免疫系统在正常条件下发挥对应的作用和保持相对的平衡，机体才干维持生存。如果免疫功效发生异常，必然造成机体平衡失调，出现免疫病理变化。免疫系统在发挥免疫功效的过程中，识别是个重要的前提。一切生物都含有这种能力。单细胞生物只含有分辨食物、入侵微生物和本身细胞成分等低档的识别功效。脊椎动物的机体免疫系统逐步完善，不仅含有完整的\o"免疫器官"免疫器官和\o"免疫细胞"免疫细胞，并且免疫活性细胞还能产生\o"特异性抗体"特异性抗体和\o"琳巴因子"琳巴因子，从而精确地识别自己，排除异物以达成机体内环境的相对稳定，这对保护自己、延续\o"种族"种族和生物进化都有重大意义。高等生物的免疫系统充足发展，它对内外环境的多个抗原异物刺激既体现出多样性和适应性，又体现出特异性和回想性，这对生物的进化过程、\o"生物种系"生物种系的生存和适应含有重大影响。免疫功效是免疫系统在识别和去除“非己”抗原的过程中所产生的多个生物学作用的总称。重要涉及：1.免疫防御（Immunologicaldefence)是机体排斥外来抗原性异物的一种免疫保护功效。正常时可产生抗感染免疫的作用，防御功效过强会产生超敏反映，过弱则产生免疫缺点（后两种状况均属\o"异常反映"异常反映）。2、免疫自稳是机体免疫系统维持内环境相对稳定的一种生理功效。\o"免疫学"巨噬细胞正常时：机体可及时去除体内\o"损伤"损伤、\o"衰老"衰老、\o"变性"变性的血细胞和抗原－抗体复合物，而对本身成分保持免疫耐受；异常时：发生生理功效紊乱、\o"本身免疫病"本身免疫病等。3、免疫监视是机体免疫系统及时识别、去除体内\o"突变"突变、\o"畸变"畸变和\o"病毒干扰细胞"病毒干扰细胞的一种生理保护作用。丧失：机体突变细胞失控，有可能造成肿瘤发生；或出现病毒的持续感染。免疫学-检测办法免疫学检测办法可分为体液免疫和细胞免疫测定。1．

\o"体液免疫测定"体液免疫测定重要运用抗原与对应抗体在体外发生特异性结合，并在某些\o"辅助因子"辅助因子参加下出现反映，从而用已知抗原或抗体来测知未知抗体或抗原。另外，尚涉及检测体液中的多个可溶性免疫分子，如补体、免疫球蛋白、循环复合物、溶菌酶等。2．

\o"细胞免疫测定法"细胞免疫测定法是根据多个免疫细胞（\o"T细胞"T细胞、\o"B细胞"B细胞、\o"K细胞"K细胞、\o"NK细胞"NK细胞及\o"巨噬细胞"巨噬细胞等）表面所含有的独特标志和产生的细胞因子等，测定多个免疫细胞及其亚群的数量和功效，以协助理解机体的细胞免疫水平。体液免疫检测法体液免疫检测法重要涉及：\o"免疫学"抗原抗体1.凝集反映。\o"颗粒性抗原"颗粒性抗原(细菌或\o"红细胞"红细胞等)与对应抗体特异性结合，在\o"电解质"电解质参加下形成肉眼可见的\o"凝集物"凝集物，称之为\o"凝集反映"凝集反映。1）直接凝集反映。颗粒性抗原与对应抗体直接结合所产生的\o"凝集现象"凝集现象，前者多为细胞表面的构造成分，如细菌或红细胞的表面构造抗原。（1）\o"玻片法"玻片法：多用于抗原的定性检测。（2）\o"试管法"试管法：多用于抗体的定量检测。2）间接凝集反映。将\o"可溶性抗原"可溶性抗原吸附于载体颗粒(如\o"乳胶颗粒"乳胶颗粒、红细胞等)的表面，称之为\o"致敏颗粒"致敏颗粒。当致敏颗粒与对应抗体结合，即可出现凝集现象。这个反映惯用于测定\o"细菌性抗体"细菌性抗体、\o"病毒性抗体"病毒性抗体、\o"钩端螺旋体"钩端螺旋体和\o"梅毒螺旋体抗体"梅毒螺旋体抗体及某些本身抗体(如\o"抗核抗体"抗核抗体、\o"抗肾抗体"抗肾抗体、\o"抗甲状腺抗体"抗甲状腺抗体等)。根据凝集反映的原理，尚有\o"间接凝集克制实验"间接凝集克制实验、\o"反向间接凝集实验"反向间接凝集实验、\o"协同凝集实验"协同凝集实验等。2．沉淀反映。可溶性抗原(\o"外毒素"外毒素、\o"血清"血清、\o"细菌培养"细菌培养的滤液、\o"组织浸出液"组织浸出液等)与对应抗体特异性结合，在电解质参加下，形成沉淀物，称为沉淀反映。沉淀反映的抗原多为多糖、类脂、蛋白质等。1）单向扩散实验。这是一种\o"抗原定量实验"抗原定量实验，是可溶性抗原在含抗体的琼脂介质中扩散的沉淀反映。此法惯用于检测血清免疫球蛋白和补体各成分的含量。2）双向扩散实验。这是可溶性抗原与抗体在琼脂介质中互相扩散的\o"沉淀反映"沉淀反映。本法惯用于定性实验，如检测\o"血清免疫球蛋白"血清免疫球蛋白、\o"甲胎蛋白"甲胎蛋白、\o"乙型肝炎表面抗原"乙型肝炎表面抗原等。\o"免疫学"单克隆抗体技术3）对流免疫电泳。\o"对流电泳"对流电泳是一敏感快速的检测办法，即在电场作用下的\o"双向免疫扩散"双向免疫扩散。此法惯用于检测血清中的乙型肝炎表面抗原与甲胎蛋白等。3．中和实验。特异性抗体可克制对应抗原物质的活性，抗体使对应抗原的毒性或传染性消失的反映为中和实验。例如\o"抗毒素"抗毒素中和外毒素的毒性，病毒的中和抗体可使病毒失去感染性等。诊疗风湿热的抗链球菌溶血毒素“O”实验也为一种中和实验。\o"乙型溶血性链球菌"乙型溶血性链球菌能产生一种溶解人、兔红细胞的溶血毒素“O”，该毒素的溶血毒性可被抗溶血毒素“O”抗体所中和而不出现溶血。实验时将病人血清与溶血毒素“O”混合，作用一段时间后加入人红细胞，红细胞不被溶解为阳性反映，表达病人血清中存在抗溶血毒素“O”抗体。\o"血清抗体"血清抗体效价达400单位以上时提示患者曾感染乙型溶血性链球菌，有助于风湿热的诊疗。4.免疫荧光法(荧光抗体法)。是应用\o"荧光素染料"荧光素染料(如\o"异硫氰酸荧光黄"异硫氰酸荧光黄等)来标记抗体，但不影响其活性，此种抗体称荧光抗体。用已知种类的荧光抗体浸染待检的含有抗原的细胞或组织切片，如有对应抗原存在，则抗原即与此种抗体发生特异性结合，形成复合物而粘着在细胞上，不易洗脱，在\o"荧光显微镜"荧光显微镜下成为发出荧光的可见物，可达成诊疗或定位的目的。涉及\o"直接法"直接法和\o"间接法"间接法。5．酶联免疫吸附实验。本法的原理是运用酶(惯用\o"辣根过氧化物酶"辣根过氧化物酶)标记的抗原或抗体，以测定被检标本中有无对应的抗原或抗体。有间接法、\o"双抗体法"双抗体法、\o"竞争法"竞争法三种。6．溶血空斑实验。7．免疫印迹技术。\o"免疫印迹"免疫印迹或\o"免疫转印技术"免疫转印技术(immunoblotting或Westernblot)是在\o"Southern"Southern（1975）\o"免疫学"抗体抗原反映创立的\o"DNA印迹术"DNA印迹术(Southernblotting)基础上发展起来的新型免疫生化技术。细胞免疫检测法近代免疫学广泛采用了细胞生物学、\o"免疫血清学"免疫血清学、\o"免疫标记"免疫标记、\o"免疫组化"免疫组化等多方面技术，不停发展和完善了一系列细胞免疫检测技术，用于检测各类免疫细胞的表面标志(涉及抗原及受体)、细胞的活化、\o"增殖"增殖、\o"吞噬"吞噬、杀伤功效、多个细胞因子的活性或含量等方面。这些技术为进一步研究和认识机体免疫系统的生理、病理变化，阐明某些疾病的发病机制和临床诊治提供了有用的手段。随着细胞免疫学的迅猛发展，时有新的细胞免疫检测技术出现。近年来，新发展的项目集中在对有关\o"细胞因子"细胞因子以及\o"细胞受体"细胞受体方面的检测。1．淋巴细胞转化实验。人类淋巴细胞在体外与\o"特异性抗原"特异性抗原(如\o"结核菌素"结核菌素)或非特异性\o"有丝分裂原"有丝分裂原(如\o"植物血凝素"植物血凝素，\o"PHA"PHA)等一起孵育，T细胞即被激活而向淋巴母细胞转化。T细胞转化过程可随着有\o"DNA"DNA、\o"RNA"RNA、\o"蛋白质"蛋白质的合成增加，最后造成细胞分裂。在光学显微镜下可计数转化后的淋巴母细胞数，也可用氚标记的\o"胸腺嘧啶核苷"胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入正在分裂的淋巴细胞，用液闪测定仪来拟定掺入量以拟定淋巴细胞转化率。近来有一种不用\o"同位素"同位素，又可用仪器测量的淋巴细胞增殖反映的检查法，称为\o"MTT检测法"MTT检测法。MTT是一种甲氮唑盐，它是细胞线粒体脱氢酶的底物，细胞内的酶可将MTT分解产生蓝黑色成分。该产物的多少与活细胞数成正比，成果可用\o"酶标仪"酶标仪(595nm)测量光密度，作为MTT法的指标。2．E-花环法。人类T细胞表面有\o"羊细胞受体"羊细胞受体(CD2)能与羊红细胞结合形成玫瑰花样构造。即将分离液分离出的外周的单个核细胞悬液与羊红细胞在体外混合，经37℃培养5～10分钟后放4℃过夜，取细胞悬液计数，\o"外周血淋巴细胞"外周血淋巴细胞中约70%～80%淋巴细胞结成花环即为T细胞，此法可用来分离T细胞。3．T细胞亚群检测。4．细胞毒实验。\o"Tc细胞"Tc细胞、NK细胞、LAK细胞、\o"TIL细胞"TIL细胞等对其靶细胞有直接的细胞毒(杀伤)作用。\o"免疫学"抗体制备惯用的检测办法是51Cr(铬)释放法，将51Cr-Na2CrO4盐水溶液与靶细胞(不同的细胞需不同的\o"靶细胞"靶细胞，如NK细胞的靶细胞为K562)，于37℃培养1小时左右，51Cr即进入靶细胞，与胞浆结合，洗去游离的51Cr后，即可得到51Cr标记的靶细胞，将待测细胞毒的细胞与51Cr标记的靶细胞混合(比例约为50:1或100:1)，靶细胞杀伤越多，释放到上清液中的\o"游离51Cr"游离51Cr就越多，且不能再被其它细胞吸取，用\o"γ射线"γ射线测量仪检测上清液中的cpm值，可计算出待检细胞杀伤活性高低。细胞毒的检测对肿瘤免疫有较大价值。5．巨噬细胞吞噬功效的测定。将中药(10%斑蝥)乙醇浸出液浸渍的滤纸(1cm2大小)置于受试者前臂屈侧皮肤上，4～5小时后取下滤纸。48小时内皮肤局部可水泡，内含\o"巨噬细胞"巨噬细胞。取水泡液0.5ml加鸡红细胞悬液0.01ml，37℃经30分钟后作涂片、染色与镜检，计算吞噬百分率及每个巨噬细胞吞噬鸡红细胞的平均数。本实验有助于肿瘤病情及疗效的观察。6．移动克制实验。\o"致敏淋巴细胞"致敏淋巴细胞与其特异性抗原再次接触时，能够产生\o"移动克制因子"移动克制因子(MIF)。这种因子能够克制巨噬细胞和中性粒细胞的移动，使之定位于局部而增强其免疫作用。本实验用来观察受检者淋巴细胞在体外受特异性抗原刺激后，有无MIF产生，以测定机体对某种抗原的特异性细胞免疫反映的功效。7．时间分辨荧光测量技术。\o"时间分辨荧光测量技术"时间分辨荧光测量技术(time-resolvedfluorometry,TrF)是一项新型的超微量非放射性分析技术。该技术的敏感性和特异性与放射性核素测量技术相仿，但无放射测量的弊端，故问世虽短，进展却极为快速，有取代放射测量之势。8．细胞因子检测技术。细胞因子的检测，近年来在中医临床及实验室中已广泛应用。9．细胞受体的检测。受体是细胞表面标志之一，通过对受体的检测，能够理解细胞的功效，并为某些疾病的发病机制提供一定的理论根据。免疫学-应用新中国成立以来，免疫学在医学上的应用已有了很大进展。防治传染病的生物制品\o"免疫学"免疫学不仅满足国内的需要，并且增援其它某些国家。近年研制的新疫苗如化学疫苗、\o"乙型肝炎"乙型肝炎疫苗等，已经靠近世界先进水平。中国已经消亡天花，并且基本上消亡和控制了人间鼠疫和真性霍乱等烈性传染病。\o"脊髓灰质炎"脊髓灰质炎、\o"麻疹"麻疹、\o"白喉"白喉、\o"百日咳"百日咳、\