4种化风丹对sd大鼠空间记忆能力的影响

4种化风丹对sd大鼠空间记忆能力的影响

化风丹是国务院最保护的四大药物之一。它是由15种贵重的中药组成的，如香茶、天麻、硬蚕、蝎子、雄黄、朱沙等。主要治疗风粘液闭阻（头痛、耳鸣、脑动脉、四肢瘫痪、脑萎缩）、癫痫、中风瘫痪、面部瘫痪等。它是世界上最长的治疗脑损伤的中医药。化风丹中含矿物药朱砂和雄黄,是其治疗脑部疾病产生药理作用的重要成分。然而,朱砂、雄黄各自的主要成分HgS、α-As4S4是国际公认毒物汞、砷元素的化合物,其安全性问题深受国内外关注。由化风丹主治病症可知,神经系统是其发挥药效的重要靶器官,对于这方面的研究,目前少有相关报道。本研究从长期用药角度,给予大鼠喂食临床等效剂量万胜化风丹、廖元和堂化风丹和去朱砂化风丹60天,观察其与HgCl2、NaAsO2对大鼠空间记忆能力影响的异同。Morris水迷宫(MWM)是英国心理学家Morris于20世纪80年代初设计的,用于研究实验室大鼠空间学习与记忆能力以及评价神经递质系统、药物作用之间的关系的装置,在当代神经科学研究中占据十分重要的位置。目前,有相当多的试验者利用水迷宫来评价动物的学习与记忆能力,最常用的评价指标是定位航行实验的“逃避潜伏期”。另外,我们采用每天第1次训练的成绩作为评价指标,这样反映出的是大鼠对前一天的记忆力。1材料和方法1.1动物及实验环境健康清洁级SD大鼠,雄性,160~200g,清洁级,购自重庆滕鑫比尔实验动物销售有限公司,动物许可证号SCXK(渝)2007-0005。大鼠在实验环境中适应性常规喂养3d,保证大鼠每天充足的饲料和饮水,光照12h。筛选出达到学习标准的大鼠30只,将其随机分为5组(n=6)为万胜化风丹组(万胜组)、廖元和堂化风丹组(廖元和堂组)、HgCl2组、NaAsO2组和对照组。1.2万胜化风丹及hcgl2廖元和堂化风丹购自贵州廖元和堂药业公司,批号120315;万胜化风丹购自贵阳万胜药业有限责任公司,批号120307;HgCl2购自贵州省万山特区矿产公司,批号1110003;NaAsO2购自山东西亚化学工业有限公司,批号20130301。1.3移动图像采集系统Morris水迷宫由不锈钢水池(圆柱状)、可移动平台和图像自动采集、处理系统等组成。水池直径150cm,高70cm;平台直径15cm,高40cm;水池四个象限有不同符号的导航标识。1.4下一种动物的时间定位航行实验是通过大鼠在水中寻找平台的逃避潜伏期来检测大鼠学习能力的,方法如下:(1)将大鼠头朝池壁放入水中,放入位置取第二象限起始位置。记录动物找到水下平台的时间(s),即逃逸潜伏期。在前几次训练中,如果这个时间超过90s,则引导动物到平台,在平台上停留30s。(2)将大鼠移开,放在150W的白炽灯下5min,放回笼内。1只动物每天训练2次,上午、下午各1次,连续训练5d,并记录训练成绩。1.5统计分析实验数据以(ue0af±s)表示,应用SPSS17.0统计软件中单因素方差分析进行统计分析,α=0.05水平检验。2结果2.1一般情况下各给药组大鼠每日食量、饮水量以及排便均未发现异常,毛色柔顺有光泽,体重稳定上升,各给药组无显著性差异,实验过程中无死亡。2.2各组用药前后比较用药前大鼠潜伏期在第1天至第4天无明显变化,训练第5天各组潜伏期显著下降;用药后训练第1~5天各组潜伏期呈明显的下降趋势,且万胜化风丹组、廖元和堂化风丹组、NaAsO2组以及正常组在第2~5天与用药前比较均具有显著性差异(P<0.05)(见表2~5),HgCl2组仅在第4天与用药前比较有显著性差异(P<0.05)(见表4);与正常组比较,用药前各组在第1~5天均无显著差异,用药后HgCl2组在第2~5天均有显著性差异(P<0.05)(见表2~5),万胜化风丹组、廖元和堂化风丹组和NaAsO2仅在第4天差异显著(P<0.05)(见表4);与HgCl2组比较,用药前各组在第1~5天均无显著差异,用药后万胜化风丹组、廖元和堂化风丹组和NaAsO2组在第2~5天均差异显著(P<0.05)(见表2~5)。3空间记忆的稳定性用药前,各组大鼠每天训练的潜伏期无显著差异,即各组大鼠在用药前的空间记忆能力相当,表明筛选方式是正确且成功的,这为后期实验的顺利进行奠定了坚实的基础。3.1远期记忆能力与用药前训练成绩比较,用药后各组大鼠的潜伏期均有明显的下降趋势,表明大鼠在喂养60天后,经过1天的适应性训练,对给药前的训练结果具备一定程度的远期记忆能力。而HgCl2组大鼠的这一能力与其他组比较并不显著,从这一角度来看,HgCl2的长期应用减弱了大鼠的空间记忆能力。3.2对大鼠空间记忆能力的影响用药后,正常组大鼠每天训练的潜伏期呈显著下降趋势,万胜组、廖元和堂组和NaAsO2组与正常组的趋势相同,且无显著性差异,表明两种化风丹和NaAsO2对大鼠空间记忆能力无明显影响。而HgCl2组在第2~5天的潜伏期均显著高于正常组及其他给药组,