芦荟组培实验报告

芦荟的组织培养生物09本一、立题依据及背景芦荟,拉丁名Aloe,是百合科多年生物肉质常绿植物,叶子大,长披针形.芦荟是一种古老而神秘的植物,远在3000多年前人类就用它治疗疾病,我国从唐代就对芦荟的药用有记载。近年来,随着科学技术的发展,人们对芦荟的认识越来越深刻。经检测表明,芦荟的鲜叶中含有芦荟西酊、芦荟碱、芦荟乌辛、治愈激素、蒽类、有机酸、多糖类、氨基酸、维生素及钙、磷、钾、铁等多种矿物质和微量元素。由于芦荟的叶中含有丰富的有效物质,因而具有医疗、保健和美容等多种功能。经功能实验证实,芦荟具有较强的抗感染、杀菌能力,并能促进血液循环和新陈代谢,排除毒素及提高人体抗癌能力,以外,它还具有使皮肤收敛、柔化、保湿、消炎、增白、防皱纹、治疗粉刺的功效。因此,芦荟被人们誉为“万应良药”、“人类最伟大的医生”,形成世界性的芦荟保健热,成为开发者的开发热点。目前,芦荟广泛用于化妆品、食品、饮料、医药行业中。芦荟目前主要的繁殖方法是分株和扦插,繁殖速度较慢,因而限制了芦荟业的发展。分株和扦插的方法已经不能适应生产发展的要求,因此用组织培养快速繁殖的技术，可以提高产量，成本低，效益高。二、实验方案(一)技术路线药品称量药品称量培养容器清洗培养基配制培养容器清洗培养基配制分装分装芦荟茎尖高压灭菌芦荟茎尖高压灭菌消毒接种消毒接种分化培养生根培养愈伤组织培养分化培养生根培养愈伤组织培养移植炼苗试管苗移植炼苗试管苗(二)材料、方法与手段1材料1.1样品来源将准备好的芦荟幼苗,用自来水冲洗好后,洗净外表泥土,切除根部大部分叶片,取茎尖部分,先用75%乙醇浸泡60S,然后再用0.1%升汞消毒15min,最后用无菌水洗4次—5次。1.2培养基愈伤组织诱导培养基（一）MS+(2.5mg/1)6-BA+(0.15mg/1)NAA,PH6.2;培养基（二）MS+BA4.5mg/L+IBA0.2mg/L上分化培养基（一）:MS+(2.0mg/1)6-BA+(0.10mg/1)NAA,PH7.0;培养基（二）;MS+BA4mg/L+NAA0.5mg/L生根培养基（一）:MS+(0.3-0.5mg/1)6-BA+(0.2mg/1)IBA培养基（二）：MS+BA4.5mg/L+NAA0.2mg/L+0.25%活性炭上2.方法与手段2.1外植体获得将准备好的芦荟幼苗,用自来水冲洗好后,洗净外表泥土,切除根部大部分叶片,取茎尖部分,先用75%乙醇浸泡60S,然后再用0.1%升汞消毒15min,最后用无菌水洗4次—5次。2.2愈伤组织在无菌条件下,将灭菌好的芦荟的茎尖接种到愈伤组织诱导培养基上,培养条件:温度(27±1)℃,每天光照10hr—12hr后,光强2001x,约15天后,试管中的外植体就可膨大形成愈伤组织周后,可将愈伤组织转管进行继代培养或分化培养。两种各培养基接15瓶，每瓶接3块组织。2.3分化培养在无菌条件下,将愈伤组织取出,用无菌水冲净,切成小块,接种到分化培养基中,培养条件同愈伤组织培养,约30天后,愈伤组织可分化为小芽,并继续长出小叶片。两种培养基各接15瓶，每瓶接3块组织2.4增殖生根培养待叶片长至2cm—3cm左右时,将幼苗取出,在无菌条件下,接种到生根培养基中,约15天后,即可生根。两种培养基各接15瓶，每瓶接3株。四、研究条件植物组织培养实验室五、研究进度安排2011.10.31----2011.11.14愈伤组织的获得2011.11.14----2011.12.14得到芽以及小叶2011.12.14----2012.01.01得到有根的小苗六、预期结果1.愈伤组织不定芽诱导愈伤组织培养基1愈伤组织培养基23天6天9天12天15天2.分化培养分化培养基1分化培养基2接种数分化数分化百分比小苗情况原因分析3.增值生根培养生根培养基1生根培养基2有根小苗数生根率根系情况分析原因[参考文献][1]松男等.芦荟组织培养快繁技术研究[J