真菌孢子的产生

实验五真菌孢子的产生、萌发和计数Theproduce,germinationandcalculationoffungispores一个重232g的大秃马勃的担子果内可产生7×1012个担孢子，若每个孢子都能萌发并产生一个与母体相当的担子果，那么合起来将是地球的800倍。重要意义：真菌孢子的形态是真菌鉴定的主要依据。孢子萌发实验是杀菌剂药效测定的主要方法。研究病原真菌的生活史、病害循环以及病害的发生和流行条件，都涉及孢子的产生和萌发问题。一、真菌孢子产生的条件真菌孢子的产生往往受到很多因子的制约在自然条件下，许多子囊菌在寄生生活时产生无性孢子（即分生孢子），而当寄主组织死亡以后才形成有性孢子（即子囊孢子）。真菌营养生长和产生孢子繁殖要求的条件不同，但营养生长积累了为产生孢子所需要的养分。真菌产生孢子是由它的遗传特性决定的，同时受环境条件的影响很大。一般来说。产生孢子的条件要比生长的条件严格，产生有性孢子的条件又比产生无性孢子的条件严格。1900年，Klebabn，H在研究了许多真菌的生长和生殖（产生无性和有性孢子）以后，得到以下结论：（1）生长和生殖要求不同的条件，低等生物主要是由环境决定它们生长或生殖；（2）低等生物在适宜于它生长的条件下，不发生生殖作用。有利于生殖的条件，往往不利于生长；（3）生长条件没有生殖条件这样严格，在不能生殖的条件下，它们仍能继续生长；（4）生殖以前必需有生长，生长为生殖创造条件。二、促使真菌孢子产生的条件培养基的种类和成分培养基与孢子产生的关系最大，采用不同的培养基或者改变它们的成分，是促使孢子产生最主要的途径。（1）减低养分的浓度培养基中营养物质太多或者浓度过高，菌丝体的生长很好，有时很少产生孢子，其中一碳源的影响最大，其次是氮源。一般来说，适当降低培养基中养分的浓度，或者将真菌在养分很高的培养基中培养以后，再移植到养分较低的培养基中，都能促进孢子的产生。（2）改变碳源、氮源和它们的比例适合于菌丝生长的碳源和氮源，不一定有利于孢子的产生。复杂的碳水化合物，对于菌丝的生长不一定太好，但有利于孢子的产生。对于孢子的产生，蔗糖一般比葡萄糖好，用蔗糖、乳糖和淀粉代替葡萄糖，有时可以促进孢子的产生。（3）选用不同的培养基不同的培养基，对孢子的产生影响不同。利用植物组织或它们的煎汁作培养基，可以促进有些真菌孢子的产生。（4）微量元素和维生素等如用化学纯的药品配成的组合培养基，加微量元素和维生素等，可以促进孢子的产生。2.培养基的理化性质（1）固体和液体培养基许多真菌再固体或半固体培养基上比在液体培养基上容易产生孢子。（2）氢离子浓度改变培养基的pH值，能够影响孢子的产生。在一定限度内，增加酸度可以促使某些真菌产生孢子。（3）灭菌方法热力灭菌改变了培养基的成分，改用过滤灭菌或化学灭菌法，有时可以使真菌产生孢子。3.培养条件（1）温度适宜于真菌产生孢子的温度范围，比适于它生长的范围窄。在高温或低温下培养，或高温低温交迭培养，有时可促进孢子的产生。（2）光照许多真菌要有一定的光照才能产生孢子。光波长短对孢子的产生有不同的影响。一般以紫外线、近紫外线和蓝光的作用最明显，红光也可刺激少数真菌产生孢子。光照时间对孢子产生也有影响。实验中要注意培养皿或其他器皿的透光性。一般4mm的窗玻璃，低于300－350nm的光波很难透过；2mm的硬质培养皿，波长低于260－270nm的光就不能透过；塑料培养皿则波长300nm以下的就不能透过；透明的石英玻璃，波长低于150nm的都不能透过。4.培养方法（1）通气和振荡许多真菌接种在适当的培养液中，用通气、搅拌或振荡培养的方法，可以促进生长和孢子的产生。（2）移植方法繁殖菌种时，如挑取孢子而不是菌丝体移植，有时可以促使产生孢子的产生。（3）培养时间菌种在同一培养基上生长时期的培养，或者使菌种逐渐干燥，也能促使某些真菌的产生。（4）划碎菌落将琼胶平板表面的菌落划碎，使菌丝体受到损伤，有时可以促使孢子的产生。三、孢子萌发的条件真菌孢子的萌发，受内在因子和环境条件的影响。内在因子主要是孢子的成熟度、寿命长短、休眠期限和生机的强弱等。环境因子主要是温度、湿度、氢离子浓度、养料的种类和浓度、空气、日光以及其他光线的照射等。此外，孢子形成时的条件，也影响孢子的寿命和它的萌发。温度温度是最重要的条件，影响萌发的快慢、萌发的百分率和芽管的生长。2.湿度真菌的孢子一般要在水滴中才能萌发，有的在湿度很高的条件下虽没有水滴也能萌发。水分的多少有时还决定孢子萌发的形式。具有休眠期的孢子，有时经过干湿处理可以促使它们萌发，这可能是改变细胞壁胶体的状态而使孢子易于透水的作用。3.空气孢子萌发时需要空气，在水滴表面的要比沉在水滴中的萌发较好。4.氢离子浓度真菌孢子一般在酸性条件下萌发较好，萌发最适宜的pH值往往低于最适宜于生长的pH值。在自然条件下，酸度往往不是孢子萌发的决定性因素。5.养分和其他刺激萌发的物质真菌孢子萌发时对养分有着不同的要求，有些真菌孢子本身贮藏的养分不够，萌发时必需由外界供给养