实验八、九 微生物的生理生化反应_第1页
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文档简介

微生物的生理生化反应实验九、十一、目的要求

1.了解细菌的一般生化反应；

2.了解细菌的生化鉴定方法其原理。

二、实验材料

菌种：大肠杆菌；枯草杆菌；变形杆菌；自己划线分离的大肠杆菌。

培养基：糖发酵培养基（紫红色液体）

H2S试验用培养基（固体、试管）

蛋白胨水培养基(吲哚实验）(液体）

淀粉水解用培养基（固体、平板）

葡萄糖蛋白胨水培养基（甲基红实验）(液体）三、实验原理及方法

由于各种微生物的新陈代谢类型不同，因此，对各种物质利用后所产生的代谢产物也不同，我们可以用化学反应来测定微生物的代谢产物，这种反应称为生化反应。生化反应常用来鉴别在形态或其它方面不易区别的微生物，例如：肠道细菌中，大肠杆菌和伤寒杆菌，二者在形态上不易区分，但前者能发酵乳糖，后者不能。因此可以从它们能否发酵乳糖来区别它们，所以微生物的生化反应是微生物分类鉴定的重要依据之一。微生物的生理生化反应原理1、糖发酵试验（含碳化合物的分解利用）绝大多数细菌都能利用糖类作为能源及碳源，但是细菌的分解糖类的能力上有相当大的差异。发酵后产生的有机酸：乳酸、醋酸、丙酸等（溴甲酚紫变色范围pH5.2~6.8,pH<5.2黄色，pH>6.8紫色）

发酵后产生的气体：甲烷、H2

、CO2等（杜氏小管内有气泡）微生物的生理生化反应原理2、产硫化氢试验某些菌能分解含硫的有机物或无机物产生硫化氢（H2S），H2S遇金属盐类，如铅盐、铁盐等，则形成黑色的硫化铅或硫化铁的沉淀物。从而可断定H2S的产生与否。本实验采用含有柠檬酸铁铵的培养基穿刺培养，看是否有黑色沉淀。微生物的生理生化反应原理3、甲基红试验某些细菌在糖代谢过程中，将培养基中的糖分解为甲酸、乙酸、乳酸等，使培养基变酸，加入培养基中的甲基红指示剂[pH4.2（红色）-6.3（黄色）]，可使培养基由原来的桔黄色变为红色，即甲基红阳性反应。微生物的生理生化反应原理4、淀粉水解试验（生物大分子的分解利用）微生物对大分子的淀粉不能直接利用，必须靠产生的胞外淀粉酶将其分解后才能吸收利用。淀粉遇碘液呈蓝色，但在淀粉被细菌水解的区域，遇碘不再呈蓝色，这可作为细菌产生淀粉酶的证据。结果：有水解圈—淀粉水解实验阳性；无水解圈—淀粉水解实验阴性.用接种环取少量枯草杆菌在平板的一边划“+”字形接种（或

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