第2章 原料预处理技术-1

第一部分原材料预处理技术生物活性分子的分离与表征第2章、原材料预处理技术第2章原材料预处理技术2.1、材料的选择2.2、细胞破碎2.3、抽提2.4、离心分离2.5、透析和超滤2.1材料的选择一、材料的选择1)目标物的分布与含量变化2)实验材料的来源1)、目标物的分布与含量变化（1)细胞器中的酶分布（2）生物体不同组织中酶的含量（3）生物体不同发育期酶含量的变化（4）生物组织不同加工处理阶段生物分子的变化（5）不同产地生物体活性分子的差异典型的动物细胞图解显示各个亚细胞元件细胞器：⑴核仁⑵细胞核⑶核糖体⑷囊泡⑸糙面内质网⑹高尔基体⑺细胞骨架⑻光面内质网⑼线粒体⑽液泡⑾细胞质⑿溶酶体⒀中心粒（1）细胞器中的酶分布定位区域

酶核被膜酸性磷酸酶、葡萄糖-6-磷酸酶染色质三磷酸核苷酶、RNA核苷酸转移酶Ⅱ、RNA核苷酸转移酶Ⅲ、DNA核苷酸转移酶、尼克酰胺核苷酸腺苷酰转移酶核仁RNA核苷酸转移酶I、RNA甲基转移酶、核糖核酸酶核内可溶性部分酵解酶系、磷酸戊糖途径酶系。精氨酸酶、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶

分布于细胞核的酶分布于细胞溶质的酶

类别

酶参与糖代谢的酶酵解酶系

糖元合成酶、二磷酸果糖酶，磷酸化酶激酶、蛋白激酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶磷酸戊糖途径酶系

苹果酸脱氢酶、乳酸脱氢酶，异柠檬酸脱氢酶、柠檬酸裂合酶、1-磷酸葡萄糖尿苷酸转移酶参与脂代谢的酶

脂肪酸合成酶复合体，乙酰辅酶A羧化酶、3-磷酸甘油脱氢酶参与氨基酸、蛋白质代谢的酶

天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、精氨酸酶、精氨琥珀酸合成酶、精氨琥珀酸裂解酶、氨基酰-tRNA合成酶参与核酸合成的酶核苷激酶、核苷酸澈酶分布于内质网的酶

定位区域酶光滑内质网胆固醇合成酶系、固醇羟基化酶系，（C16-C24）脂肪酸碳链延长酶糸、肉毒碱酰基转移酶。磷酸甘油酰基转移酶。药物代谢酶系(芳环羟化、侧链氧化、脱氨、脱烷基、脱卤等反应)粗糙内质网细胞质一侧蛋白质合成酶系、三磷酸腺苷酶、5’-核苷酸酶；细胞色素b5还原酶，NADP细胞色素还原酶．GDP甘露糖α-D甘露糖基转移酶、胆固醇酰基转移酶粗糙内质网内腔侧磷酸核苷酶6-磷酸葡萄糖酶，6-D-葡萄糖酸酶、UDP-葡糖苷酰基转移酶分布于线粒体的酶

定位区域酶外膜酰基辅酶A合成酶、甘油磷酸酰基转移酶磷酸胆碱转移酶、NADH脱氢酶、细胞色素5b还原酶、单胺氧化酶．狗尿酸原羟化酶、磷脂酶A，腺苷酸激酶、己糖激酶膜间腔核苷激酶，腺苷酸激酶、L-木酮糖还原酶内膜NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、3-羟丁酸脱氢酶，3-磷酸甘油脱氢酶、细胞色索c氧化酶，ATP酶、已糖激酶．肉毒碱软脂酰转移酶基质三羧酸循环酶系、脂肪酸β氧化酶系、氨甲酰磷酸合成酶、鸟氨酸氨甲酰转移酶，丙酗酸羧化酶．谷氨酸脱氢酶分布于溶酶体的酶

类别酶水解蛋白质的酶织织蛋白酶弹性蛋白酶、胶原蛋白酶水解糖苷类的酶β葡萄糖醛酸苷酶、β-半乳糖苷酶，α甘露糖苷酶、β-N-乙酰氨基葡糖苷酶、葡聚糖酶透明质酸酶、溶菌酶、神经氨糖酸苷酶水解核酸的酶核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶水解脂类的酶磷脂酶A、胆固醇酯酶其它水解酶酸性磷酸酯酶、芳基硫酸酯酶（2）生物体不同组织中酶的含量（3）生物体不同发育期酶含量的变化

（4）生物组织不同加工处理阶段生物分子的变化新鲜植物↓晒干↓煮汤

（5）不同产地生物体活性分子的差异橘生南国为橘，生北国则为枳！2)、实验材料的来源

（动、植物、微生物）动物器官与组织植物器官与组织细胞培养产物微生物发酵培养产物动物器官与组织

动物脏器制药所用的动物器官与组织，如猪、牛、羊等动物的肝脏、胰腺、脑下垂体、脑组织以及鸡胚胎等，其他低等或高等动物包括海洋生物的器官与组织均含有丰富的药物成分。转基因动物体内外源药物基因表达产物富集的特定器官与组织，特别是乳汁等体液或分泌液等。转基因技术的发展将使人类有可能把珍贵的蛋白质药物基因转移到诸如奶牛、奶羊体内，使目的蛋白质在乳腺内表达并随乳汁分泌出来，这样的转基因动物将成为活的、可饲养的生物药物“矿藏”。植物器官与组织如植物的根、茎、叶、果实与种子等。除植物器官和组织中固有的药用成分外，已可以用转基因技术将所需药物成分的编码基因转入植物，这样的转基因植物将成为活的、可种植的生物药物“矿藏”。通过种植收获转基因植物即可获得大量有保障的、以传统方式很难获得的珍惜药物原料。细胞培养产物

允许用于生产药用成分的哺乳动物传代细胞有人胚肺二倍体细胞(2BS细胞)、中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)以及非洲绿猴肾细胞(Vero细胞等)，原代地鼠肾细胞、鸡胚成纤维细胞等用于乙脑、痘苗等疫苗的生产已有较长的历史，这些动物细胞作为基因工程药物的重组宿主细胞已得到广泛应用，有着广阔的应用基础与前景。微生物发酵培养产物

以重组酿酒酵母为宿主系统制造药品的技术已较为成熟，酿酒酵母细胞的基因组全序列已于199