早期不明原因自然流产患者氧化应激和炎症反应产物水平的研究

早期不明原因自然流产患者氧化应激和炎症反应产物水平的研究

近年来，早期自然流产的发病率有所增加。许多患者已发展为复发性流产，严重影响了女性的身心健康。氧化应激与炎症学说成为产科领域近几年来的研究热点。也有研究表明氧化应激和炎症反应参与了血管内皮的损伤,而血管形成与胚胎良好血供是早期胚胎着床及妊娠成功的关键。本研究检测正常妊娠及不明原因早期自然流产患者血浆8-异前列腺素(8-isoprostane)等氧化应激产物和高敏C-反应蛋白(high-sensitiveC-reactiveprotein,hs-CRP)等炎症标志物的变化,研究氧化应激与炎症反应在早期妊娠不明原因流产发病中的作用。1数据和方法1.1然保持了20例,年龄已20岁选择2008年12月至2010年12月在我院就诊,以B超确诊,排除生殖器官解剖异常、内分泌、遗传、全身及生殖泌尿等显性感染等因素,考虑为早期不明原因自然流产患者(流产组),共40例,年龄21～32岁,孕周为8～10周;同期选取门诊正常早孕要求人工流产的妇女(正常早孕组)35例,年龄22～31岁,孕周为孕8～10周以及健康非孕妇女(健康非孕组)20例,年龄21～35岁,作为对照。两对照组妇女均排除肝、肾疾患史及免疫性疾病史,且至少有一次正常足月分娩史,现无宫内感染及其他临床发热征象,无自然流产、死胎、死产史。全部研究对象在收集标本前未接受任何药物治疗,在受检前1个月内均无急性病史。1.2免疫酶分析方法空腹8～12h后于清晨(流产组和正常早孕组均于治疗前)取肘静脉血5mL,分离血浆置-70℃保存待检。8-isoprostane采用特异性的免疫酶分析方法测量,丙二醛(MDA)以硫代巴比妥酸反应产物比色法检测,氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)用ELISA法测定,白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)用ELISA法测定,hs-CRP用透射免疫比浊法测定,所有操作严格按试剂盒说明进行。1.3氧化应激产物与炎症反应产物的相关性数据以x¯±sx¯±s表示,组间比较采用t检验,氧化应激产物与炎症反应产物的关系采用直线相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1学意义整体观念法血浆8-isoprostane、ox-LDL流产组明显高于两对照组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);而MDA在流产组也高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);正常早孕组8-isoprostane、MDA、ox-LDL高于健康非孕组,但差异无统计学意义(P>0.05),见表1。2.2差异有统计学意义流产组炎症反应产物hs-CRP、IL-6和TNF-α水平均高于正常早孕组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);流产组3者的水平也高于健康非孕组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);而正常早孕组也高于健康非孕组,但差异无统计学意义(P>0.05),见表2。2.3ox-ldl与hs-crp、il-6、tnf-的相关性相关分析表明,流产组血浆8-isoprostane水平与hs-CRP、IL-6、TNF-α呈正相关(分别为r=0.897,r=0.864,r=0.766,均P<0.05);ox-LDL也与hs-CRP、IL-6、TNF-α呈正相关(分别为r=0.434,r=0.412,r=0.402,均P<0.05);而MDA与hs-CRP、IL-6、TNF-α无相关性(分别为r=0.198,r=0.201,r=0.109,均P>0.05)。3讨论3.1正常早孕患者血浆炎症反应变化氧化应激就是指体内氧化与抗氧化作用失衡,倾向于氧化,进而激活或损伤内皮细胞。孕早期囊胚在着床后早期,绒毛滋养细胞侵入母体子宫螺旋动脉管腔,使其转化为低阻力松弛管腔,闭合了螺旋动脉,限制了母体血液流入胎盘。因此,胎盘在一个低氧环境中发育,从而使分化细胞免受大剂量活性氧损伤而受到保护,同时胎盘组织抗氧化作用也随之增强。因此,正常妊娠期氧化和抗氧化作用保持相对平衡,不会产生氧化应激。我们检测正常早期妊娠外周血中氧化应激产物MDA、ox-LDL、8-isoprostane,发现正常早孕组上述3种产物均高于健康非孕组,但差异无统计学意义(均P>0.05);且正常早孕组上述3种产物均低于早孕流产组,其中ox-LDL、8-isoprostane差异有统计学意义(均P<0.05),MDA差异无统计学意义(P>0.05);表明正常早期妊娠期存在氧化应激,但维持在较低水平,氧化和抗氧化作用保持相对平衡,使妊娠得以继续。炎症反应是指患者无全身或局部显性感染征象,但是存在低水平、持续的炎症状态,表现为炎症因子如hs-CRP、IL-6、TNF-α等轻度升高。CRP主要是肝脏在IL-1和IL-6刺激下产生的,是反映全身炎症反应的敏感标志物。随着一些高灵敏度检测方法的出现,低水平的CRP亦可被检测出来,因此被称为hs-CRP。IL-6是一种糖蛋白,主要由淋巴细胞及单核巨噬细胞分泌,是一种重要的促炎因子,有广泛的生物学作用,它可诱导B细胞分化并产生免疫球蛋白,促进T细胞增殖生长等。TNF-α是一种多肽类物质,主要由单核巨噬细胞产生,参与机体多种生理与免疫过程的重要介质,IL-6与TNF-α在妊娠、分娩及胎儿生长发育中均具有重要作用。我们的研究发现,35例正常早孕患者血浆TNF-α、hs-CRP、IL-6的水平均高于健康非孕组,但差异无统计学意义(均P>0.05),表明正常早期妊娠期存在炎症反应;但自然流产患者血浆TNF、hs-CRP、IL-6的水平均高于正常早孕组和健康非孕组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.01),表明正常早期妊娠期炎症反应维持在较低水平,对调节胎盘组织的正常生长和功能发挥,参与正常妊娠的维持起着一定的作用。3.2早期妊娠合并心脏病理变化的机制我们发现,炎症标志物与氧化应激产物在早期妊娠流产中均显著升高,尽管MDA与hs-CRP、TNF-α、IL-6无明显相关性,但炎症标志物hs-CRP、TNF-α、IL-6与氧化应激标志物8-isoprostane、ox-LDL均具有相关性,说明早期流产同时存在氧化应激与炎症反应,且二者相关性好。据文献和以上研究结果,我们认为,炎症和氧化应激反应在早期妊娠流产的发生发展中可能起如下作用:受炎症刺激物作用和氧化应激产物8-isoprostane、ox-LDL刺激,一方面,TNF-α吸引中性粒细胞、单核细胞向损伤区域聚集,释放炎症介质;TNF-α、IL-6刺激肝脏产生CRP,并诱导巨噬细胞、血管内皮细胞产生并释放一氧化氮、中性粒细胞产生大量氧自由基,导致白细胞侵润、炎症产物CRP沉积和氧自由基聚集,又使体内过氧化反应得到增强;另一方面,TNF-α抑制脂蛋白脂肪酶活性,导致脂质代谢异常;同时8-isoprostane、ox-LDL也是炎症过程潜在的诱导剂,它直接损伤巨噬细胞、内皮细胞表达黏附分子、细胞因子、促炎因子及其它炎症反应的中介物,这些细胞因子之间也可以互相诱生形成复杂的网络体系,共同促进炎症进程;内皮细胞还通过上调其表面黏附分子促进白细胞的附壁和黏附,