-蒋宗勇：母猪氧化应激与抗氧化措施

母猪氧化应激及抗氧化措施蒋宗勇广东省农业科学院动物科学研究所2016-3-25报告提纲母猪氧化应激及其危害母猪热应激及其危害大豆异黄酮对泌乳母猪生产性能和抗氧化机能的影响大豆异黄酮对猪乳腺上皮细胞生长的影响大豆异黄酮对猪乳腺上皮细胞抗氧化机能的影响妊娠后期和泌乳期母猪体内产生大量自由基高产母猪妊娠后期（75d到分娩）胎儿生长（71%体重）和乳腺生长、泌乳期泌乳等导致母猪营养需求旺盛，而妊娠后期限饲和泌乳期采食量和营养物质摄入不足，导致分解代谢旺盛，产生大量活性氧自由基（ROS）。正常情况下，自由基与抗氧化系统保持平衡。抗氧化系统包括抗氧化剂和酶。酶包括超氧化物歧化酶（SOD）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px），过氧化氢酶（CAT）。非酶抗氧化物质包括维生素C,E,β-胡萝卜素,尿酸和饲粮多酚类等。各种抗氧化物质和抗氧化酶的总的水平即体现了该体系内的总抗氧化能力(T-AOC)。氧化应激当细胞中活性氧自由基比抗氧化系统占先时，氧化应激就产生了。活性氧自由基会破坏细胞膜不饱和脂肪酸链、蛋白质的硫巯基、DNA的核酸碱基，其氧化产物分别是

丙二醛、羰基化蛋白、8-羟基-2‘-脱氧鸟苷。为此，氧化应激的指标是

总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）、羰基蛋白、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)。不饱和脂肪酸丙二醛蛋白质羟基化蛋白质核酸8-羟基脱氧鸟苷自由基细胞膜破坏蛋白质变性DNA破坏妊娠中后期和泌乳期淋巴细胞DNA损伤严重Berchieri-RonchietalAnimal(2011),5:11,pp1774–1779母猪体内存在系统性氧化应激妊娠后期到泌乳期母猪血液视黄醇和a-生育酚含量显著低于妊娠早期，表明母猪体内系统性氧化应激。a-生育酚视黄醇Berchieri-RonchietalAnimal(2011),5:11,pp1774–1779氧化应激对母猪繁殖性能的影响

血浆丙二醛水平越高，18日龄哺乳仔猪窝重越小。YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA正常温度：妊娠舍12.4oCto18.4oC，产房21oCto23.7oC热应激：妊娠舍23.3oCto30.3oC，产房22.1oCto30.6oC氧化应激对母猪繁殖性能的影响

血浆羰基蛋白水平越高，哺乳仔猪增重越小。YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA氧化应激对母猪繁殖性能的影响

血浆8-羟基-2‘-脱氧鸟苷(8-OHdG)水平越高，母猪产活仔数越少。YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA氧化应激对母猪繁殖性能的影响

血浆8-羟基-2‘-脱氧鸟苷(8-OHdG)水平越高，泌乳18天母猪背膘越薄，说明母猪体重损失越大。YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA热应激导致母猪产生氧化应激反应

血浆丙二醛MDA含量升高YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA正常温度：妊娠舍12.4oCto18.4oC，产房21oCto23.7oC热应激：妊娠舍23.3oCto30.3oC，产房22.1oCto30.6oC热应激导致母猪产生氧化应激反应

血浆羰基蛋白含量升高YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA正常温度：妊娠舍12.4oCto18.4oC，产房21oCto23.7oC热应激：妊娠舍23.3oCto30.3oC，产房22.1oCto30.6oC热应激导致母猪产生氧化应激反应

产活仔数降低，增加死胎数正常温度：妊娠舍12.4oCto18.4oC，产房21oCto23.7oC热应激：妊娠舍23.3oCto30.3oC，产房22.1oCto30.6oC＊YanZhao,2011,thedissertationofNorthCarolinaStateUniversity,Raleigh,NorthCarolina,USA热应激导致母猪产生氧化应激反应

仔猪出生窝重和18日龄窝重降低正常温度：妊娠舍12.4oCto18.4oC，产房21oCto23.7oC热应激：妊娠舍23.3oCto30.3oC，产房22.1oCto30.6oC＊＊热应激影响母猪繁殖性能的神经内分泌机理母猪抗氧化措施

大豆异黄酮抗氧化功能总抗氧化能力T-AOC（U/ml）baaabbab试验1：大豆异黄酮提升泌乳母猪体内抗氧化能力陈丰等，2010，饲料博览，8:1大豆异黄酮提供母猪血浆过氧化氢酶活性过氧化氢氧化酶CAT（U/ml）aaaabbbb大豆异黄酮降低血浆丙二醛含量丙二醛MDA（nmol/ml）aaabbbabba

泌乳量（kg）大豆异黄酮提高母猪泌乳量、乳蛋白含量乳蛋白含量（%）ba陈丰等，2010，饲料博览，8:1bababa陈丰等，2010，饲料博览，8:1母猪大豆异黄酮提高哺乳仔猪日增重试验2：大豆异黄酮对泌乳母猪生产性能和抗氧化机能的影响选用227头初产长白母猪（平均231日龄，体重143公斤）在妊娠85天至哺乳（18天）期间饲料中添加0、15、30和45ppm大豆异黄酮（ISO）结果表明：大豆异黄酮

对妊娠母猪的产（活）仔数、产程、产活仔窝重和初生仔猪个体重没有显著影响；对妊娠母猪血液T-AOC和MDA含量无显著影响Huetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254大豆异黄酮显著促进母猪乳腺发育15~45mg/kg大豆异黄酮

显著改善母猪妊娠110天和泌乳7天母猪的乳腺发育。

对照组乳房（妊娠d110）15ppm组乳房（妊娠d110）30ppm组乳房（妊娠d110）45ppm组乳房（妊娠d110）

对照组乳房（哺乳d7）15ppm组乳房（哺乳d7）30ppm组乳房（哺乳d7）45ppm组乳房（哺乳d7）Huetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254母猪添加大豆异黄酮提高哺乳仔猪窝重*Huetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254母猪添加大豆异黄酮提高哺乳仔猪日增重aabbccHuetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254大豆异黄酮提高泌乳母猪血液抗氧化能力P<0.0001P=0.001P=0.0005Huetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254大豆异黄酮提高泌乳母猪血液抗氧化酶活性大豆异黄酮线性降低母猪血液丙二醛水平，减低泌乳母猪氧化应激Huetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254添加大豆异黄酮提高母猪乳汁抗氧化水平Huetal,2015.J.Anim.Sci.93:2246–2254大豆异黄酮线性降低泌乳第1、7、18天乳汁中丙二醛MDA含量，减少对仔猪的氧化威胁。试验3：大豆异黄酮对猪乳腺上皮细胞生长的影响阳性对照组：正常的DMEM/F12培养基阴性对照组：与处理组加入等量的DMSO（浓度20ug/ml）大豆异黄酮(YZS)：广东省农科院动物科学研究所，纯度99%异黄酮(ISO)：sigma公司，纯度99%采用免疫荧光法对乳腺上皮细胞中的特异表达蛋白角蛋白进行鉴定阳性对照阴性对照5μM10μM20μM30μM40μMGES不同剂量YZS/ISO对猪乳腺上皮细胞形态的影响（1:100）大豆异黄酮YZS对细胞的促增殖作用优于同等剂量的ISO，高剂量的ISO（30-40μM)抑制细胞的增殖大豆异黄酮促进乳腺细胞增殖大豆异黄酮空白对照阴性对照不同剂量YZS/ISO对乳腺上皮细胞P-cyclinE蛋白表达的影响（1:100）5μM