艾叶及其炮制品的挥发油成分对比研究

艾叶及其炮制品的挥发油成分对比研究

艾叶是蔷薇科植物的爱斯基亚、et总茎。是中医临床常用药。其味苦、辛,性温;有小毒。归肝、脾、肾经。有散寒止痛,温经止血之功。其炮制方法以醋制和炒炭为主。醋制后温而不燥,并能增强逐寒止痛作用,适用于虚寒之症。挥发油为艾叶的主要成分之一,具有抗炎镇痛、抗菌抗病毒、镇咳平喘、祛痰、镇静、利胆、抗癌等功效。已有文献报道,艾叶炮制后其挥发油总含量降低,但其成分组成、各成分含量以及成分的变化与药效的关系尚不明确。本文采用水蒸气蒸馏法提取艾叶及各炮制品挥发油,采用气相色谱-质谱联用技术进行分析,为从挥发油角度探讨艾叶的炮制目的提供参考。1仪器和试剂盒1.1提取器和相色谱-质谱条件美国Agilent6890GC/5973MS气相色谱-质谱联用仪;HP-5MS(30.0m×250mm×0.25mm)弹性石英毛细管柱;挥发油提取器;中药炮制控温炉(哈尔滨市测电器厂)。1.2测试剂1.3培育抗艾植物艾艾叶购自安徽沪谯中药饮片厂,产地安徽,经山东省中医药研究院李英霞副研究员鉴定为菊科植物艾ArtemisiaargyiLevl.etVant.的干燥叶。醋炒品、清炒品、清炒拌醋品、生拌醋品均为实验室自制。2方法和结果2.1最佳的采出液,把好国内热2.1.1醋炒品的制备照《中国药典》2005版一部附录ⅡD项下醋炙法,取艾叶适量,除去杂质及梗,加15%醋及适量水,拌匀,闷透,置锅内,炒干,取出,放凉。2.1.2清炒品的制备取艾叶适量,除去杂质及梗,加适量水(加水量与醋炒品中醋水总量一致),拌匀,闷透,置锅内,炒干,取出,放凉。2.1.3清炒拌醋品的制备照醋炒品制备法制备清炒品,根据饮片相当于生艾叶饮片的量,加15%醋与适量水(醋水总量同上),拌匀,闷透,摊开晾干。2.1.4生拌醋品的制备取艾叶适量,除去杂质及梗,加15%醋及适量水(醋水总量同上),拌匀,闷透,摊开晾干。2.2挥发油含量测定分别取艾叶生品、醋炒品、清炒品、清炒拌醋品、生拌醋品粉末(过二号筛),照《中国药典》2005版一部附录XD挥发油测定法甲法提取。所得挥发油用无水硫酸钠脱水。结果生拌醋品挥发油含量与生品比较无明显差异,含量均为0.87%;加热炮制品(醋炒品,清炒品,清炒拌醋品)含量较生品明显降低,均为0.51%。艾叶经加热炮制(醋炒品、清炒品和清炒拌醋品)后挥发油含量降低,而生拌醋品与生品比较无明显差异。2.3条件2.2回用温度气相色谱条件:色谱柱为HP-5MS(30.0m×250mm×0.25mm)弹性石英毛细管柱;载气为氦气(99.99%),流速为1mL/min;进样量为1μL。进样口温度:220℃;柱温:40℃;程序升温:45℃保持1min,再以15℃/min升至280℃稳定5min;传输线温度:250℃。质谱条件:电离方式为EI源,源温:250℃,电离电压为100ev,质量范围m/z38~400全程扫描。2.4挥发油中总离子的测定对各供试样品进行了分析,获得了各样品的总离子图(见图1~5),鉴定了含量大于0.1%的78个成分,并求得它们在挥发油中的相对百分含量。结果见表1。3不同制剂醋对艾叶挥发油组分含量的影响3.1GC-MS测定结果表明,含量大于0.1%的成分在生品中鉴定出42个,占挥发油总量的89.23%;醋炒品中鉴定出42个,占挥发油总量的88.10%;清炒品中鉴定出44个,占挥发油总量的88.46%;清炒拌醋品中鉴定出37个,占挥发油总量的83.00%;生拌醋品中鉴定出36个,占挥发油总量的3.2艾叶经炮制后挥发油在成分组成上发生了较大变化。醋炒品中检出了17个生品中没有的新成分,清炒品检出了17个新成分,清炒拌醋品中检出了15个新成分,生拌醋品中检出了13个新成分。醋炒品、清炒品与清炒拌醋品中有而生拌醋品中无的新成分有1个,醋炒品、清炒拌醋品与生拌醋品中有而清炒品中无的成分有2个。醋炒品、清炒品和清炒拌醋品中特有的成分各有5个,生拌醋品中特有成分有3个。因此,炮制及辅料醋对艾叶挥发油有较大的影响,且不同炮制方法(加热与加醋)影响有所差异。3.3生品中的广藿香烷(10.565%)经炮制后消失,醋炒品与清炒拌醋品中产生了新成分蓝桉醇(含量分别为12.343%、13.491%),清炒品与生拌醋品中产生了新成分愈创木烯(含量分别为11.187%、11.335%),三种成分的结构相似,且含量相近。各化合物的结构图见下图。故推测艾叶生品中的广藿香烷在醋炒品和清炒拌醋品中转化为蓝桉醇,在清炒品和生拌醋品中转化为愈创木烯。这些结构上的转化可能是加热或加醋的作用下产生的,动态变化过程及其对药理作用的影响均有待于进一步研究。3.4艾叶生品中的异龙脑(6.555%)在加醋的炮制品(醋炒品、清炒拌醋品和生拌醋品)中消失,且均产生了新的成分龙脑(含量分别为6.664%、6.323%、7.005%),二者为差向异构体,故推测生品中的异龙脑在加醋的炮制品中转化为龙脑,此构型转化可能是辅料醋的作用。有文献报道,龙脑的毒性较异龙脑小,这可能与艾叶醋制后毒性降低有关。3.5艾叶及其炮制品挥发油中均含有石竹烯及其氧化物、桉油精、4-萜品烯醇、α-松油醇等主要成分,但同一成分含量变化较大。具有平喘作用及抗菌活性的石竹烯及其氧化物经炮制后均显著增加,并以醋炒品中含量最高,在各样品中的含量分别为:R118.587%、R518.833%、R319.492%、R419.832%、R221.794%;具有解热、抗炎、抗菌作用的桉油精经炮制后均显著减少,在各样品中的含量分别为:R111.25%、R59.293%、R38.762%、R26.476%、R44.938%;具有止咳、解热、抑菌作用的α-松油醇经炮制后均减少,在各样品中的含量分别为:R13.333%、R53.265%、R32.96%、R42.946%、R22.845%;具有镇咳祛痰作用的4-萜品烯醇经炮制后均显著减少,在各样品中的含量分别为:R15.879%、R55.871%、R35.557%、R4