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文档简介

实验

血液一般检查上海交通大学医学院丁磊【目的】掌握血涂片的制备和瑞氏染色的方法。掌握外周血各类细胞的形态特点。

【器材】一次性消毒采血针、75%乙醇棉球、载玻片、推片、吸耳球、显微镜。

【试剂】瑞氏染液I液:包含瑞氏染料1.0g、纯甲醇(AR级以上)600.0ml、甘油15ml。II液:磷酸盐缓冲液(pH6.4~6.8)【标本】

EDTA抗凝静脉血或外周血。【操作】

(1)采血:静脉采血后,使用玻璃棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血,如果使用手指采血则直接用洁净玻片蘸1滴血。(2)推片:左手平执载玻片,或放在类似桌子等平坦地方,右手持推片从后方或前方接近血滴,使血液沿推片边缘展开成适当的宽度,立即将推片与载玻片呈30~45。

角,轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片,血涂片应呈舌状,头、体、尾清晰可见。SMEARDropofbloodSlide1Slide2Oncontact,slide2extendsthedropalongits1”sideSlide2Pushing

angledslide2along#1smearsthelineofbloodacrossslide1Slide2Liftawayslide2;dry#1;stain;coverslipSmearAfewcellsaredamaged;smearisnotevenlythick;&stainingisuneven.SameapplytoSPREADS(3)干燥:将推好的血涂片在空气中晃动,使其迅速干燥。天气寒冷或潮湿时,应于37℃温箱中保温促干,以免细胞变形缩小。(4)标记:在载玻片的一端用记号笔编号。(5)染色:待血涂片干透后,用蜡笔在两端划线,以防染色时染液外溢。然后将玻片平置于染色架上,滴加染液(I液)3~5滴,使其迅速盖满血涂片,约0.5~1min后,滴加等量或稍多的缓冲液(II液),轻轻摇动玻片或用吸球对准血片吹气,使染液充分混合。(6)冲洗:5~10min后用流水冲去染液,待干。(7)结果观察:将干燥后的血片置显微镜下观察。用低倍镜观察血涂片体、尾交界处血细胞平铺的部分。

细胞大小中性粒细胞10~15um嗜酸性粒细胞13~15um嗜碱性粒细胞10~12um单核细胞15~25um淋巴细胞

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