细菌内毒素检验方法验证方案

细菌内毒素检验方法验证方案2023GMP内毒素检查方法进展验证。20233符合要求。2023细菌内毒素检查方法检查项下要求逐一进展。重现性稳定性是否符合要求。适用性是否抱负。验证机构组成验证委员会依据验证工作需要，常设验证委员会，负责全部验证工作的领与协调，负责验证结果记录与评定，负责完成验证报告。6.2验证委员会组成:职责:验证委员会:负责验证方案的审批。6.4.1.3责验证数据及结果的审核。6.4.1.4负责发放验证证书。验证小组:负责验证方案的制定和实施。负责验证工作的组织与协调。负责验证数据的收集和结果评定。7所需文件已预备齐全。确分工。培训记录:8分以下几个阶段完成。:从年月日至年月日;培训9考文献培训内容日期培训人承受培训人注射用水细菌内毒素检查方法验证方案9.12023XVIIIA中药质量标准分析方法验证指导原则验证方案的编写、实施、结果的评价。验证内容:试药与试剂://试剂准品水确认结果是否到达标准:检查人:确认人:时间:时间:仪器设备:周密仪器及需校验的仪器/电子天平检查人:确认人:时间:时间:一般工器具/移液管试管时钟剪刀检查人:确认人:时间:时间:注射用水内毒素检查方法验证试验预备:试验室及人员等条件均满足内毒素试验试验条件。10.3.1.1.器内，放置入烤箱。10.3.1.2.除去玻璃器皿外表可能存在的外源性内毒素玻璃250?，待烤箱温度升至设定的温度后开头计时，干烤1小时。到达规定时间后，关断电源，待烤箱温度自然降至室温。在不翻开金属容器的状况下，可在两天内使用;假设玻璃器皿用锡箔纸包装，在不翻开包装的状况下可在两周内使用，否则须再次干烤除去可能存在的外源性内毒素。验证内容具体验证步骤果看结果是否稳定重复性是否良好。试验操作细菌内毒素标准溶液的制备取细菌内毒素工作标准品一支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，然后用砂轮在瓶颈上部轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开，启开过程中应防止玻璃屑落入瓶内。依据标准品说明书，参与规定量的细菌1542λ、λ、30秒钟。18壁，使粉末落入轻轻划痕，75%0.1ml检查用水溶解，轻轻转动瓶壁，使内容物充分溶解，避开产生气泡。1854支(管)40.1ml的、λ、0.5λ0.25λ20.1ml10.3.2.2.4.加样完毕后，将鲎试剂用封口膜封口，轻轻振动混匀，37??1?水浴或适宜恒温器中，试管架保持水平状态，保温60?2分钟。10.3.2.2.5.观看并记录结果。将试管架从水浴中轻轻取180?脱者为阴性，记录为(,)。(备注:保温存拿取试管的过程中应避开受到振荡造成假阴性结果)2λ40.25λ4即为鲎试剂灵敏度的复核结果(λc)。λc=lg-1(?X/4)式中x(lg)。反响终点浓度是系列递减的内毒素标准溶液中最终一个呈阳性结果的浓度。结果推断推断标准当λc0.5λ,2λ(0.5λ2λ)时判定该批鲎试λ(标示灵敏度)为该批鲎试剂的灵敏度。鲎试剂灵敏度复合试验验证结果如下表:检验目的检验日期检验依据室温试剂名称:生产单位批号灵敏度/效价规格鲎试剂EU/mlEU/EU/ml(稀释序号倍数)2λ1234*12340.5*12340.25λ12341照2结果计算λc=lg-1(?X/4)=结果推断当λc0.5λ,2λ(0.5λ2λ)时判定该批鲎试剂灵敏度复步验证检验人员:复合人员:日期日期检查人:确认人:日期:日期:/效价规格鲎试剂EU/mlEU/EU/ml(稀释序号倍数)2λ1234*12340.5*12340.25*123412λclg-1(?X/4)=λc0.5λ,2λ(0.5λ2λ)复步验证检验人员:复合人员:日期日期检查人:确认人:日期:日期:检验目的检验日期/EU/mlEU/EU/ml(稀释序号倍数)2λ1234*12340.5*12340.25*123412λclg-1(?X/4)=结果推断当λc0.5λ,2λ(0.5λ2λ)时判定该批鲎试剂灵敏度复步验证检验人员:复合人员:日期日期求检查人:确认人:日期:日期:鲎试剂灵敏度复合试验三次验证试验结果评价如下表:λcλcλc=确认结果是否符合要求:是?否?检查人;确认人:日期:日期干扰试验预试验:同法操作检查三次试验记录试验结果进展比照。目的:溶液应为未检验出内毒素且不超过所使用的鲎试剂的最大有效稀释倍数的溶液。10.3.3.1倍数不得超过MVD=CL/λ(λ为现在市面最高灵敏度，这里选公司能买到的最高灵10.3.3.22220.3ml4.0λEU/ml的内毒素标准溶液+0.3ml20.6ml含2λEU/ml内毒素标准液的稀释倍数为4的供试品稀释液。保温(60min)?2min后观看，并记录结果。10.3.3.322品阳性比照管不为阳性时，说明该供试品对内毒素与鲎试剂的反响村子啊存在干MVD，)或者通过其他方式排出毒素限值单位为,,,,,或,,,,时。应将做小不干扰稀释倍数换算成最大不干浓度10.3.3.,这里干扰试验预试验0.125EU。0.03EU/mlMVD0.25EU/ml第一次稀释倍数原液倍倍倍观看供试品溶液+或--其次次稀释倍数观看供试品溶液+或--观看供试品阳性比照+或--观看供试品溶液+或--结论确认结果是否符合要求:是?否?检查人;确认人:结论确认结果是否符合要求:是?否?物干扰作用。试验重复三次。操作方法:142λ、λ、0.5λ、0.25λ(方法同)。确定的不干扰稀释倍数，10.3.3.1.1420.25λ0.1ml/36落入瓶底，用砂轮在瓶颈轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开备用，防止玻璃屑落产生气泡。185440.1ml2.0λ、1.0λ、0.5λ、0.25λ20.1ml5，44支(管)，12440.1ml2.0λ、1.0λ、0.5λ、0.25λ20.1ml37?1?60?210.3.4.22.0λ0.25λ(Es)和用供试品溶液或稀释液制成的内毒素溶液的反响终点浓度的几何平均值(Et).Es=lg-1(?Xs/4)Et=lg-1(?Xt/4)浓度的对数值(lg)。10.3.4.310.3.4.3.1.Es0.5λ,2.0λ(包括0.5λ2.0λ)Et0.5Es,2.0Es(0.5Es2.0Es)时，则认为供试品在EtEs2.0Es)时，则认为供试品在该浓度下干扰试验。10.3.4.3.2.推断结果:干扰试验验证结果第一次检验依据室温/效规格价鲎试剂EU/ml细菌内毒EU/支素标准品细菌内毒EU/ml素检查用水反响结果保温时间(,)准溶液打(—)阳供试品溶打(—)阳性打(+)液性打(+)参与内毒2λ1素标准品2EU/ml34λ12数)340.5λ12340.25λ1234阴性比照12-1Es=lg(?Xs/4)=-1Et=lg(?Xt/4)=结果推断当Es0.5λ,2.0λ(0.5λ2.0λ)Et0.50.5Es2.0Es)内毒素检查。0.5Es2.0Es)时，则认为供试品在该浓度下日期日期日期:干扰试验验证结果其次次检验目的检验日期检验依据室温/效规格EU/mlEU/细菌内毒EU/ml素检查用水反响结果保温时间(,)准溶液打(—)阳供试品溶打(—)阳性打(+)液性打(+)参与内毒2λ1素标准品2EU/ml34λ12数)340.5λ12340.25λ1234阴性比照12-1Es=lg(?Xs/4)=-1Et=lg(?Xt/4)=结果推断当Es0.5λ,2.0λ(0.5λ2.0λ)Et0.50.5Es2.0Es)内毒素检查。0.5Es2.0Es)时，则认为供试品在该浓度下日期日期日期:干扰试验验证结果第三次检验目的检验日期检验依据室温/效规格价EU/mlEU/支素标准品细菌内毒EU/ml素检查用水反响结果保温时间(,)准溶液打(—)阳供试品溶打(—)阳性打(+)液性打(+)参与内毒2λ1素标准品2EU/ml34λ12数)340.5λ12340.25λ1234阴性比照12-1Es=lg(?Xs/4)=-1Et=lg(?Xt/4)=结果推断当Es0.5λ,2.0λ(0.5λ2.0λ)Et0.50.5Es2.0Es)内毒素检查。0.5Es2.0Es)时，则认为供试品在该浓度下日期日期检查人;确认人:日期日期:(NC)，20.1ml(PPC)。37??1?水浴10.3.4.5.5推断标准当阳性比照都为阳性、供试品阳性比照都为阳性且阴性221，1管为阴性，按441MVD221MVD。验证结果如下表:第一次供试品名称供试品阳性比照结果阳性比照(+)阴性比照(+)121212结果是否有效0.125EU，才符合规定检验人员:复核人员:日期日期日期:其次次供试品名称供试品阳性比照结果阳性比照(+)阴性比照(+)121212结果是否有效0.125EU，才符合规定检验人员:复核人员:日期日期日期:第三次供试品名称供试品阳性比照结果阳性比照(+)阴性比照(+)121212结果是否有效0.125EU，才符合规定检验人员: