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文档简介

课题1菊花的组织培养课题目标说明植物组织培养的基本原理,学习植物组织培养的基本技术,进行菊花或其他植物的组织培养。课题重点与难点植物组织培养过程中使用的无菌技术。(一)植物组织培养的基本过程知识要点:1细胞分化的概念;2离体植物细胞的脱分化和再分化。(二)影响植物组织培养的因素知识要点:影响植物组织培养的因素有培养基配制、外植体的选取、消毒、接种、培养、移栽和栽培等。在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体,并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。组织培养1、植物组织培养的原理是什么?植物细胞具有全能性,即生物体的细胞,具有使后代细胞形成完整个体的能力。思考:植物组织培养过程示意图2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的?没有进行灭菌处理,试管也没有做密封等。离体的植物器官、组织、细胞脱分化愈伤组织再分化根芽植物体植物组织培养过程植物组织培养条件

含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。愈伤组织植物细胞全能性的表达

脱分化:将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱出来,恢复细胞的分裂活性。再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。MS固体培养基成分及比例一、污染的定义指在组织培养过程中,培养容器内滋生菌斑,使培养材料不能正常生长发育,从而导致培养失败的现象。1、细菌污染:菌斑呈粘液状,界限比较明显,一般接种后1-2天即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌二、污染原因2、真菌污染:菌斑呈绒毛状、絮状,界限不明显,伴有不同颜色的孢子接种后3-10天才能发现。主要是霉菌污染。二、污染原因正常苗污染苗1、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入4、环境不清洁三、污染途径四、污染的预防措施(一)防止外植体带菌(二)保证培养基及接种器具彻底灭菌(三)操作人员严格遵守无菌操作规程(四)保证接种与培养环境清洁(一)防止外植体带菌1、选择好外植体采集时期和采集部位外植体采集以春秋为宜优先选择地上部分作为外植体阴雨天勿采,晴天下午采采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋2、室内或无菌条件下进行预培养(一)防止外植体带菌3、外植体严格灭菌灭菌效果试验多次灭菌和交替灭菌(一)防止外植体带菌(二)保证培养基及接种器具彻底灭菌1、分装时,注射器勿与瓶接触,培养基勿粘瓶口2、检查封口膜是否有破损看录像培养基的制备并思考制备的过程要注意些什么?(二)保证培养基及接种器具彻底灭菌3、扎瓶口要位置适当、松紧适宜4、保证灭菌时间和高压锅内温度5、接种工具用前彻底灭菌6、工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌试评价下列操作正确与否(四)、保证环境的清洁1、污染瓶经高压灭菌后再清洁2、接种环境定期熏蒸消毒、紫外灯照射或用臭氧灭菌和消毒3、定期对培养室消毒、防止高温植物组织培养特点①培养条件可以人为控制

②生长周期短,繁殖率高

③管理方便,利于工厂化生产和自动化控制④可以保持母本的优良性状思考:以下培养基出现的现象反应了什么问题?激素配比模式生长素与细胞分裂素的比例决定着发育的方向,是愈伤组织、长根还是长芽。如为了促进芽器官的分化,应除去或降低生长素的浓度,或者调整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。高利于根和愈伤组织的形成生长素/细胞分裂素适中有利于根芽的分化低有利于芽的形成生长调节物质的使用甚微,一般用mg/L表示浓度。在组织培养中生长调节物质的使用浓度,因植物的种类、部位、时期、内源激素等的不同而异,/L,细胞分裂素005—10mg/L。四、练习1在植物组织培养的过程中,为什么要进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作?植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,

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