6细胞侵袭实验指导_第1页
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文档简介

本实验采用罗氏全新的方法来监测细胞侵袭,将CIM-Plate16RTCADPAnalyzer使用,这个独特的装置可在无标记条件下对细胞侵袭进行实时监控。CIM-Plate16由上室和PET膜下层,并覆盖80%表面积。趋化剂添加到下室,上室内添加研究的细胞和选择性添加细胞外基质侧细胞数目的增多,电阻抗增大,表现为细胞指数的变化,并被RTCADPAnalyzer记录下RTCAsoftwareIDadministrator登录,密码为小写的administrator。userone和usertwo登录时无需密码。点击确认后,可根据实验experimentnote页面下,填写本次实验的相关信息,包括实验名称,所使用细胞板的IDnumber信息等,备注栏内填写一些简单的实验设计。到Layout页面下,输入本次实验的设置,选中A1-H1,填写细胞系名称,细胞类型是HT-108020000个细胞,点击apply,信息复制到第二排。此时可见16孔板设置完成的实验信息。示为IDLE,表示未完成,请勿更改背景检测步骤参数。从冰箱中取出AssemblingtoolCIMplate上板。拆开上板,可见板上和盖子上均有Matrigel50µlmatrigel4个孔后,马上从孔内轻轻吸出30µlMatrigel。如果出现气泡,用枪头小心剔除。取出CIMplateAssamblingtool160µl预温好的完全培养基,动作缓慢且在最后轻抬枪头,可见整个液面形成漂亮的弧形。将CIM-Plate16AssemblyTool90度,小心不要干扰液面forstartingnextstep.回到Message页面,看是否有任何报错信息。取出CIMplateAssamblingtool10020000CellPlotadd可见不同组得到的实验信号。的信号就非常明显。根据包被Matrigel的浓度由高到低,细胞侵袭能力逐渐增强。验细胞必须在前一天进行细胞传代,并保证消化时细胞融合达60%-80%MatrigelMatrigel置于冰上。侵袭所有需要接触Matri

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