医学微生物学：第32,33章 逆转录病毒 狂犬病毒 HPV

逆转录病毒逆转录病毒一组含有逆转录酶（reversetranscriptase）的RNA病毒。对人致病的逆转录病毒主要有：

1.人类嗜T细胞病毒（HTLV），为成人

T淋巴细胞白血病的病原体。

2.人类免疫缺陷病毒（HIV），是人类

艾滋病（AIDS)的病原体。

逆转录病毒

①

球形，有包膜，表面有刺突，直径80-120

nm。

②

基因组有两条相同的单正链RNA，病毒体含

逆转录酶和整合酶。

③

复制有独特的逆转录过程，病毒DNA整合到

细胞DNA中，构成前病毒。

④

具有gag、pol和env3个结构基因和多个调

节基因。

⑤

宿主细胞受体决定病毒的组织嗜性，成熟病

毒以芽生方式释放。

共同特性第一节

人类免疫缺陷病毒

（humanimmunodeficiencyvirus,HIV）HIV-1：大多数AIDS由HIV-1引起。

HIV-2：主要在西非和西欧流行。

型别逆转录病毒科（Retroviridae）慢病毒属（Lentivirus）分类首次分离：HIV-1于1983年从一例淋巴腺综合症患者的淋巴结中分离出。

自1983年美国发现首例艾滋病病例之后，艾滋病在全球范围内迅速蔓延。据联合国艾滋病规划署统计，全球已有3900万艾滋病感染者。截至2014年底，在总感染人数中，撒哈拉以南非洲地区所占比例最高，约为71%；其次是亚洲和太平洋地区，约为14%。艾滋病防治形势依然严峻AIDS——全球重要的公共卫生问题联合国艾滋病规划署2015年发布的《2015年世界艾滋病日报告》显示，随着各国防治艾滋病的努力不断增强，2015年全球新增艾滋病病毒感染者人数及艾滋病相关疾病致死人数继续下降。其中2014年全球新增艾滋病病毒感染人数约为200万，约120万人死于与艾滋病有关的疾病，较2004年分别下降35%和42%。AIDS——全球重要的公共卫生问题

对全球188个国家的疫情进行分析，把188个国家按照每10万人口艾滋病感染总数、新发感染数和死亡数这个相对数来分，从高到低分成十个等级，中国排在第八等级，所以是较低流行的。从绝对数来看，全球3900万感染者，75%集中在15个国家，中国是15个国家之一。也就是说，从绝对数来说，中国是艾滋病感染人数比较严重的国家之一。AIDS——中国的感染现状

在地域上：中国呈现西南重点省份感染比较多，云南、广西、广东，四川占全国的50%左右。从人群来说：我们对全国八类人群每年监测80万人，包括吸毒、同性恋、暗娼、性病就诊者、孕产妇等八个人群，吸毒人群感染率呈下降趋势，从2005年的7.5%下降到今年平均3.3%，男男同性恋呈上升趋势，虽然我们采取了措施，但是疫情还是在上升，从2005年的1.4%上升到2014年的7.7%。AIDS——中国的感染现状据最新评估结果，中国现有HIV感染者约49万—？

联合国大会曾于2011年为防治艾滋病设立了明确可行的全球目标，包括2015年向1500万人提供抗逆转录病毒治疗

根除母婴传播

减少50%通过性传播的新发感染等截至2015年6月，估计1580万艾滋病病毒携带者接受了抗逆转录病毒治疗。这一数字在2005年和2010年分别仅为220万和750万。AIDS——全球防控目标

AIDS——全球防控目标2014年11月下旬，联合国艾滋病规划署明确提出到2030年结束艾滋病流行的“快速通道”目标，设定到2020年实现

90%的艾滋病病毒携带者自身知情90%知情携带者获得治疗90%接受治疗的人体内病毒受到抑制到2030年，各项具体目标的完成比例将提高至95%。

主题：行动起来，向“零”艾滋迈进(gettingtozero)“零”世界艾滋病日：12月1日，2017年是第30个一、生物学性状1.HIV的形态学特征

圆柱形核衣壳，含两条相同的正链RNA基因组和包裹在基因组外的核蛋白（p7）、衣壳蛋白（p24），并携带逆转录酶、整合酶和蛋白酶和RNA酶H，包膜和衣壳间有内膜蛋白p17。形态结构：球形、包膜表面有刺突

（含有gp120和gp41）。gp120gp41为跨膜蛋白介导病毒包膜与宿主细胞膜的融合。病毒的表面糖蛋白与病毒吸附有关有中和抗原表位能刺激机体产生中和抗体易发生变异利于病毒逃避免疫清除。2.基因组：双正链RNA，有3个结构基因以

及6个调节基因；两端有LTR。P11蛋白酶P15RNA酶HHIV基因及其编码蛋白提高HIV的复制能力和感染性

Nef

Nef

调节mRNA的剪接和促进mRNA转运至细胞质Rev

rev反式激活蛋白，激活HIV基因的转录Tat调节基因

tat使病毒吸附于细胞表面介导病毒包膜与宿主细胞膜融合gp120gp41

env有逆转录酶活性和DNA聚合酶活性水解RNA：DNA中间体中的RNA链切割前体蛋白使病毒DNA与细胞DNA整合逆转录酶RNA酶H蛋白酶整合酶

pol衣壳蛋白p24和核蛋白p7内膜蛋白p17p24和p7p17结构基因

gag蛋白质的功能编码蛋白基因3.病毒的复制Gp120与CD4结合HIV-1：M组11个亚型在全球流行，不同地区流行的亚型及重组亚型不同。HIV-2和HIV-1的O组和N组：

主要局限于西非等地。HIV-1：分M（main）、O（outlier）、N（new）3个组，进一步又分不同的亚型（根据env、gag等基因的不同分型和亚型）4.分型5.变

异

性*HIV的显著特点之一是它的高度变异性

HIV的逆转录酶无校正功能、错配性高是导致HIV基因频繁变异的重要因素。

env基因最易发生变异gp120变异逃避免疫

6.抵

抗

力

对理化因素的抵抗力较弱。*一般化学消毒剂处理10--30min，可灭活病毒。*高压灭菌121℃15min，或者煮沸100℃20

min均可灭活病毒。*病毒在20--22℃液体环境下可存活15天；在37℃可存活10--15天；在冷冻血制品中须68℃加热72h才能保证灭活病毒。二、致病性与免疫性

传染源和传播途径1.性传播：是HIV的主要传播方式，性活跃人群（包含同性恋和异性恋者）是高危人群。2.血液传播：输血、血制品、器官移植、注射等方式传播，静脉毒品成瘾者是高危人群。3.垂直传播：通过胎盘、产道或哺乳等方式传播，其中胎儿经胎盘感染最多见。传染源：HIV感染者和AIDS患者传播途径我国的传播特点

*

吸毒、性传播和采供血途径传播并存*

经性传播途径呈上升趋势

*

自高危人群向普通人群扩散

*易感细胞受体：

CD4分子（主要）辅助受体CXCR4与CCR5致病机制*主要感染细胞：

CD4＋

T淋巴细胞和单核-巨噬细胞。（前者含辅助受体CXCR4，后者含CCR5)致病机制CD4＋T细胞：表达大量CD4分子和CXCR4(感染HIV后细胞溶解）CD4＋单核-巨噬细胞：表达少量CD4分子和CCR5（感染HIV后细胞不溶解）

*作为HIV的体内储存库*引起机体免疫系统的进行性损伤。*HIV借助于gp120与上述细胞受体结合，gp41融合肽暴露，介导膜融合，使病毒侵入细胞。*受感染的CD4T细胞被溶解破坏，T细胞数量的进行性减少和功能丧失，导致免疫功能缺陷。致病机制（1）

CD4T细胞破坏增加①导致CD4T细胞融合，最终导致细胞的溶解；②CTL对CD4T细胞的直接杀伤作用，抗体介导的ADCC作用，NK细胞的杀伤作用；③诱导CD4T细胞细胞凋亡。（2）CD4T细胞产生减少（3）CD4T细胞功能受损记忆CD4+T细胞是HIV潜伏的主要储存库

HIV损伤CD4T细胞的机制：*单核-巨噬细胞（表达少量CD4分子，其辅助受体为CCR5趋化因子）

单核细胞和巨噬细胞感染后不被溶解，长期携带HIV，使病毒向其他组织播散并储存病毒。临床特点

*潜伏期长，大约10年左右。*临床感染过程分为4个时期：

1.急性感染期：约2～3周（P24+）

2.无症状潜伏期：10年左右（HIV-Ab+)

3.AIDS相关综合征：开始出现症状

4.免疫缺陷期：典型AIDS期——合并机会致病菌感染和AIDS相关恶性肿瘤。AIDS患者常发生的恶性肿瘤：

Kaposi'ssarcoma恶性淋巴瘤生殖道肿瘤Burkitt淋巴瘤AIDS患者常见的机会致病菌感染：

真菌细菌病毒原虫*细胞内病毒的清除主要依靠细胞免疫反应*细胞免疫可限制病毒感染，但不能完全清除病毒，并随疾病进展而下降*病毒抗原频繁变异逃避了免疫清除作用

免疫性三、微生物学检查法检测目的

①

AIDS的诊断；

②

指导抗病毒药物的治疗；

③

筛查和确认HIV感染者，阻断

HIV的传播途径。*检测病毒抗体：ELISA筛查，Westernblot确认*检测病毒抗原：检测HIVp24抗原早期

辅助诊断*检测病毒核酸：定量RT-PCR（监测）*病毒分离：特征性细胞病变为融合细胞

培养液中逆转录酶或P24抗原+

HIV感染抗体产生规律HIV初次感染人体后，同其他病毒一样，会出现短暂的病毒血症(3—6周）。几周后病人血清抗体阳性，最早出现的是对HIV衣壳蛋白p24的抗体，随后包膜蛋白gp120、gp41的抗体，以及多聚酶蛋白组的p66和p32的抗体也陆续出现。当病情发展到艾滋病出现时，血清中病毒再次出现，而抗衣壳蛋白p24的抗体滴度明显下降，最终消失，但其他抗体仍存在。HIV抗体检测

目前临床上广泛应用，也是卫生部推荐使用的诊断HIV感染的方法是测定特异性HIV抗体，包括初筛（ELISA)和确认实验(WB)。需在BSL2实验室进行，遵循“普遍防护”原则样本初筛检测一阴一阳均阳性反应阴性报告送确认重复检测阴性报告均阴性反应阳性反应原有试剂＋另一种原理初筛试剂选用初筛试剂阴性反应HIV抗体初筛检测流程图常用的HIV抗体确认实验方法是免疫印迹法（WB）。免疫印迹试剂有HIV-1/2混合型和单一型。一般先用HIV-1/2混合型试剂进行检测HIV确证试验

HIV三个结构基因及产物：gag基因产物：p24（衣壳蛋白之一，特异性高）、p17（内膜蛋白）pol基因产物：p66/p51(逆转录酶）、p32（整合酶）env基因产物：gp120（外膜蛋白）、gp41(跨膜蛋白）WB结果判定标准组织阳性阴性WHO2ENV+GAG+POL无条带或只有P17FDA（USA）1ENV+p24/p32无条带CHINA２ENV或１ENV+p24无HIV-1特异性条带“不确定”(±)：出现HIV-1特异性条带，但带型不足以 确认阳性，每三个月随访一次，共两次，仍属不确定，判为阴性。四、防治原则

1.治疗HIV感染的药物

*核苷类逆转录酶抑制剂（NRTIs）、非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTIs）、蛋白酶抑制剂（PIs），融合抑制剂（FI）。*高效抗逆转录病毒治疗（highly

activeanti-retrovial

therapy,

HAART），即“鸡尾酒”疗法。（联合用药）2.预防研制安全、有效的HIV疫苗，但目前尚无有效疫苗上市。

①普遍开展预防AIDS的宣传教育；

②建立全球和地区性HIV感染的监测网，及时掌握疫情；

③对献血、献器官、献精液者必须做HIV抗体检测；

④禁止共用注射器、注射针、牙刷和剃须刀等。

⑤提倡安全性生活；

⑥HIV抗体阳性妇女，应避免怀孕或用母乳喂养婴儿等。

思考题1.HIV的结构基因及其编码蛋白主要有哪些？2.HIV的复制周期有哪些特点？3.HIV的传染源、传播途径及致病机制？4.HIV的实验室检查主要包括哪些？其抗体检测主要检测哪些抗体？遵循什么原则？5.预防HIV感染的措施主要有哪些？

狂犬病病毒

（rabiesvirus)

生物学性状外观子弹状，属弹状病毒科狂犬病病毒属核酸为-ssRNA。衣壳呈螺旋对型有包膜。包膜有大量糖蛋白（G)突起，与病毒感染性、毒力、血凝性有关糖蛋白G和核蛋白N是狂犬病毒重要抗原

中和Ab和血凝抑制Ab、CMI

CMI、补体结合Ab和沉淀Ab病毒可在中枢神经细胞浆中增殖，形成嗜酸性的包涵体，称为内基小体，有诊断意义内基小体抵抗力不强，60

C30min或100C2min可灭活。可被强酸、强碱、乙醇、乙醚、肥皂水、去垢剂等灭活。抵抗力

蝙蝠犬、猫、牛、羊、猪等家畜和狼、狐狸、猴、野鼠、蝙蝠等野生动物主要是病犬，人被患病动物咬伤致病。其次是狼、猫、猪等传染源易感动物储存宿主人被咬伤发病率为30%－60%。一旦发病，死亡率高达100%致病性动物或人被咬伤后病毒随犬唾液经伤口进入在局部肌肉细胞中增殖侵入周围神经上行至神经节和CNS中迅速增殖沿传出神经下行至唾液腺、舌等处致病性犬狂犬病分狂暴型和麻痹型:

狂暴型：有前驱期、兴奋期和麻痹期。

麻痹型：以麻痹症状为主，兴奋期不明显。病程短，不超过5—6天致病性潜伏期:短的10天，长的可达数年，通常3－8周前驱期:表现不安、发热、头痛、乏力、伤口周围感觉异常，流泪等。兴奋期:兴奋、狂燥、吞咽或饮水时喉部肌肉痉挛，对水声和其他刺激异常敏感，即恐水症。麻痹期:3－5天后转入麻痹昏迷、最后呼吸困难、循环衰竭而死亡致病性临床表现免疫性病毒感染可诱导机体产生抗体，抗体可中和游离病毒。疫苗接种对预防该病有效。微生物学诊断临床表现加病史比较容易做出诊断。微生物学诊断实际意义不大，但检查动物是否患病对防治极重要观察咬人的动物7—10天，如动物不发病，可认为该动物未患病，或唾液中无病毒。被该犬咬伤的人无需做预防接种如观察期间动物发病，应取动物脑部海马回查病毒抗原（免疫荧光法）或内基小体捕捉野犬，加强家犬管理，普及家犬疫苗接种高危人群（兽医、饲养员）注意个人防护人被咬伤后：处理伤口：5%肥皂水、清水充分冲洗数分钟，5%碘酒烧灼伤口，深伤口应做清创术特异性防治：伤口周围浸润注射40IU/kg抗狂犬病病毒免疫球蛋白防治原则接种狂犬病病毒疫苗：由于狂犬病潜伏期长，故咬伤后仍应接种疫苗，即预防性治疗，伤后0、3、7、14、28天各肌肉注射狂犬病毒灭活疫苗。防治原则人乳头瘤病毒

（HumanPapillomavirus,HPV)人乳头瘤病毒（humanpapillomavirus,HPV）乳头瘤病毒科（Papovaviridae）乳头瘤病毒属（Papillomavirus）。生物学性状

核衣壳呈直径为52--55nm的球形，无包膜。核酸：超螺旋环状dsDNA，

早期区（earlyregion,ER）编码与病毒复制、转录调控、翻译和与细胞转化有关的蛋白；

晚期区（Lateregion,LR）编码病毒衣壳蛋白(L1和L2）

非编码区（NCR),也称长控制区（LCR)或上游调节区（URR）。衣壳：20面体立体对称，由72个壳微粒组成。无包膜生物学性状

HPV尚不能在培养细胞中增殖

病毒复制周期受表皮中上皮细胞分化状态限制（在表皮中增殖）在基底层细胞内HPVDNA呈静息状态，随着基底层细胞向表层分化，早期基因开始在棘细胞层内表达，而增殖的病毒只能在皮肤顶层的细胞核中查到。

HPV仅感染人的皮肤和粘膜上皮细胞病毒复制诱导上皮细胞增殖，使表皮增厚