思真新员工培训

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内部培训资料韩婷生长激素简介思真®产品知识简介生长激素的临床使用思真在®非适应症市场活动韩婷什么是生长激素？人生长激素（rGH）：脑垂体前叶分泌的一种肽类激素，是人类出生后促生长的最主要激素，有种属特异性。韩婷生长激素在血循环中与一种蛋白结合，这种蛋白被称为生长激素结合蛋白GHBP3生长激素结合蛋白起贮存池的作用,能减慢生长激素从血中清除的速度由191个氨基酸组成,含2对二硫键，22kd的单个多肽链韩婷生长激素的生理作用一、促进组织生长骨骼生长：GH及其介导IGF-1促进软骨细胞增殖和代谢，促进线性增长。骨骺闭合后GH对维持骨矿物质及骨密度仍然有重要作用细胞生长：如骨骼肌细胞数量及其体积的增加，增加红细胞数量器官增长：增加内脏器官的体积和功能韩婷生长激素的生理作用二、GH促进蛋白质的合成

GH促进蛋白质合成，这体现在：细胞对氨基酸的摄取以及氮潴留的增加。

是体内促进蛋白质合成的重要激素。韩婷三、GH促进脂肪燃烧生长激素的生理作用

GH对脂肪细胞溶脂速率有重要调节作用；体外研究表明，GH可提高脂解速率，抑制游离脂肪酸重新酯化。临床上GH缺乏病人皮下脂肪增多，尤其在腹部。而GH治疗后腹脂明显减少。韩婷四、减少对葡萄糖的利用

GH可减少外周组织对葡萄糖利用，亦可降低细胞对胰岛素的敏感性，可致血糖上升。使能量来源由糖代谢向脂肪代谢转移，有利于机体生长与修复过程。生长激素的生理作用韩婷五、促进水、矿物质代谢GH促进生长及合成代谢，使体内钠、钾、磷酸盐正平衡。GH参与对体液的调节，尤其对细胞外液，可促进肾小管钠回吸收，激活肾上腺素、血管紧张素、醛固酮系统，引起水、钠滞留增加。生长激素的生理作用韩婷六、其它：还有抗衰老、促进脑功能、增强心肌功能、提高免疫功能等作用生长激素的生理作用韩婷生长激素何时分泌？生长激素呈脉冲式分泌大部分生长激素在夜间分泌

分泌高峰发生在深睡眠后1小时在日间和夜间，尤其是在餐前，可以观察到生长激素较小的分泌峰韩婷

主要在夜间分泌

8am2pm8pm2am8am韩婷生长激素简介思真®产品知识简介生长激素的临床使用思真在®非适应症市场活动韩婷思真【药品名称】

通用名：注射用重组人生长激素商品名：思真（英文商品名:Saizen）英文名：RecombinantHumanSomatropinforInjection

赋形剂：甘露醇、磷酸钠、氯化钠等韩婷思真【性状】

无菌、无热原的白色冻干粉【包装】

4IU(1.33mg):

1支冻干粉＋1支生理盐水

10IU(3.33mg):1支冻干粉＋1支溶解剂（含苯甲醇）韩婷思真【化学结构】191个氨基酸残基的合成多肽。一条氨基酸序列，2对内二硫键——与人体垂体生长激素的主要结构一致。【制备】

哺乳动物（鼠）肿瘤细胞系制备

韩婷思真【药代动力学和药效学】

大鼠药代动力学实验表明：思真和垂体hGH间没有显著差异思真vs垂体hGH

肌肉注射：半衰期——3.2h

2.4h

皮下注射：半衰期——5.1h

4.7h二种方式同样有效，皮下注射需要相对长时间达到血清峰浓度，但更持久和均匀韩婷USFDA已批准的生长迟缓相关rhGH适应征生长激素缺乏症1993慢性肾功能不全作肾移植前1996Turner综合征宫内生长迟缓2002Prader-willin综合征2003特发性矮身材韩婷思真【适应症】

内源性生长激素分泌不足所致的生长障碍（GHD）性腺发育不全所致的生长障碍（特纳综合症，Turner’ssyndrome）【治疗目标】促进生长纠正代谢失衡改善生活质量

韩婷思真【推荐用法用量】GHD:0.6IU/kg/周;分6～7次单剂量晚上皮下注射Turner:0.9IU/kg/周;分7次单剂量晚上皮下注射【不良反应】儿童长期使用注意甲状腺功能减低的发生血糖升高严重不良反应很罕见；偶见颅内高压和股骨头骨骺滑脱韩婷思真【用药注意事项】糖尿病为相对禁忌症不得用于有任何进展迹象的潜在性脑肿瘤患者不宜于孕妇及哺乳期妇女与糖皮质激素为相对配伍禁忌（可能抑制生长激素促生长作用）韩婷思真【配液注射注意事项】每天更换部位注射，避免注射部位的营养不良溶解时不得振摇，应慢慢转动药瓶直至内容物完全溶解3岁以下儿童禁用含苯甲醇的溶解剂，应用无菌生理盐水【有效期】2年韩婷贮藏（禁忌冷冻）产品描述溶解前贮存条件溶解后贮存条件溶解后贮存时间思真8mg（24IU）clickeasy1支click.easy预混器抑菌溶解剂＋1支24IU冻干粉室温2–8oC28天思真3.33mg(10IU)1支10IU冻干粉＋5ml抑菌溶解剂2–8oC2–8oC14天思真1.33mg(4IU)1支4IU冻干粉＋1ml安培生理盐水(不含抑菌剂)2–8oC2–8oC24小时韩婷思真及主要竞争品牌信息－－中国大陆公司产品名描述法玛西亚Genotropin（健豪宁）1.3mg诺和诺德Norditropin（诺泽）

5mg注射液礼来Humatrope（优猛茁）1.3mg辉瑞健高宁12IULG－－－－－－－4IU默克雪兰诺Saizen(思真）4IU,10IU,24IU上海联合赛尔珍怡4IU深圳科兴赛高路4IU/6IU安徽安科安苏萌4IU，2IU长春金赛赛增2IU,4IU,4.5IU,10IU,15IU，30IU……韩婷思真竞争产品产品成份规格价格生产厂家思真注射用重组人生长激素4IU/10IU/24IU399元/4IU默克雪兰诺金磊赛增注射用重组人生长激素4.5IU/10IU198元/4.5IU长春金赛珍怡注射用重组人生长激素4IU170元/4IU上海联合赛尔安苏萌注射用重组人生长激素4IU/2IU148元/4IU安徽安科赛高路注射用重组人生长激素4IU/6IU168元/4IU深圳科兴诺泽注射用重组人生长激素诺和诺德健高宁注射用重组人生长激素12IU1600元/12IU辉瑞*LG公司及益普生公司计划在中国上市生长激素韩婷思真®是全球唯一的哺乳动物源性重组人生长激素。配有专属的思真注射器已在全球90多个国家销售；超过16万人受益。韩婷思真®重组DNA技术

韩婷基因重组人生长激素对生长迟缓的治疗人生长激素发展史—1953年从人尸体垂体轴提取的生长激素（Pit-hGH）用于治疗首例17岁GHD男孩—40年间creuzfeldt-Jakob综合征150例/3000例—1985年USFDA禁用Pit-hGH—同年rhGH批准用于临床1985年用大肠杆菌基因重组技术合成的GH上市。

1989年第一个用哺乳动物细胞基因重组技术合成的GH（Saizen）正式上市。

韩婷真核及原核细胞源性重组DNA技术重组DNA技术根据宿主细胞的不同可以分为两类：真核细胞源性重组DNA技术（eg.思真）技术难度高；宿主细胞成本较高难培养；产品质量优异、稳定性好原核细胞源性重组DNA技术（eg.大肠杆菌产品）技术难度低；宿主细胞廉价易培养；产品质量较差、不稳定韩婷细胞核高尔基体粗面内质网细胞膜细胞质核糖体真核生物（哺乳动物）细胞完整的细胞核；分工细致的细胞器；细胞膜为内外边界思真®——唯一真核细胞源性重组生长激素韩婷原核生物（大肠杆菌）细胞核区，无细胞核无细胞器核糖体无细胞核；无细胞器；细胞壁隔绝细胞内外大分子物质交换其它生长激素都是以原核细胞大肠杆菌为宿主生产韩婷

思真®的制取过程

——重组DNA技术的一般操作构建hGH基因序列基因导入载体载体转染宿主细胞hGH产物提取产物纯化细胞培养(hGH表达)成品配置韩婷重组载体载体——将目的基因(hGH基因）带入宿主细胞的运输工具通常为简单的单链环状DNA常用载体：质粒、噬菌体、病毒载体重组载体：将hGH目的基因接入载体原有DNA序列中成为重组DNA生产思真®使用的载体：质粒pBR322韩婷思真®pBR322质粒载体思真®重组载体pBR322包含以下部分：质粒本身的DNA序列hGH的编码基因金属硫蛋白编码片段：(促进载体整合到宿主基因组并启动转录开始)BP病毒基因片段非完整病毒基因，不能表达完整的病毒颗粒，没有致病性促进重组载体进入宿主细胞，提高载体对宿主细胞的转染率韩婷宿主细胞和hGH蛋白质表达思真®宿主细胞——中国仓鼠乳腺细胞C127

C127与人类细胞一样，为真核生物哺乳动物细胞可直接克隆产生有活性的hGH分子韩婷A.重组产物（hGH）的表达

——蛋白质的活性背景知识：活性：蛋白质分子必须具备准确的空间构象才能成为活性分子，与受体结合。三级结构hGH的空间构象由两对二硫键来实现，位于182和189、53和165位点。二硫键是通过氧化方法加载在两个半胱氨酸（还原性基团）上的韩婷真核细胞的蛋白质表达真核细胞能直接生产具有活性的hGH分子机制：粗面内质网为蛋白质加载正确的二硫键：粗面内质网特点：适宜的氧化环境二硫键异构酶确保正确加载产物具有天然活性，正确、稳定韩婷原核细胞的蛋白质表达细胞结构简单，无细胞器协助，无法给肽链加载二硫键。原核细胞生产的hGH是无空间构象的肽链，不具有生物活性！所有原核细胞大肠杆菌技术，都必须在产物提取后，进行蛋白质的人工复性韩婷B.重组产物(hGH)的提取真核细胞—通过细胞器配合下的外排作用，将hGH直接分泌到细胞外机制：——与人类细胞天然过程一致高尔基体接受来自粗面内质网的活性hGH分子，以分泌小泡的形式，将hGH直接分泌到细胞外培养基内。无细胞壁，便于物质的运输高尔基体韩婷真核细胞技术的蛋白质提取操作干预少、杂质少、产品纯净、安全成熟的hGH分子直接分泌到培养基内，只需提取培养基即可思真®经培养基提纯后，纯度已经达到90％，经过纯化车间后，能被提纯到99.99%。韩婷原核细胞技术的蛋白质提取 原核细胞无细胞器，同时肽聚糖构成的细胞壁阻隔了大分子物质的内外交换。原核细胞不能直接分泌hGH产物，必须人工提取，可分为两类：传统型方法—合成的hGH肽链位于细胞包涵体颗粒内*包涵体：大肠杆菌内不溶性的物质基团，成分以蛋白质、脂类等为主分泌型方法—合成的hGH肽链位于细胞周质内*细胞周质：指细胞壁与细胞膜间的间隙人工提取带来大量的杂质，影响产物纯度和稳定性。韩婷传统原核技术的产物提取

可能产生的杂质：细胞碎片、包涵体内的其它物质、被机械和化学操作破坏的hGH肽链。步骤繁多，影响因素多韩婷原核细胞“分泌型”技术给合成的hGH肽链多加了一段信号肽序列“分泌”指，借助信号肽将hGH分子牵引到细胞周质内（细胞壁与膜的间隙）。注意：并非细胞外。hGH分子合成！必需人工打破细胞壁，才能提取hGH韩婷分泌型原核技术的产物提取

可能产生的杂质包括：细胞壁碎片、游离的信号肽片段、被机械和化学操作破坏的hGH肽链需打破细壁，影响因素多韩婷C.重组技术的产物后加工真核细胞产生的hGH是具有完美结构和活性的分子，无需任何后加工原核细胞产生的是hGH肽链，无生物活性，必须人工复性。韩婷hGH的人工复性 方法：交替使用一定量的氧化剂和还原剂，在两个半胱氨酸残基(Cys)间氧化形成二硫键。人工加载2个二硫键韩婷人工复性存在的问题复性过程很难被人工控制，可能出现：hGH肽链中存在多个半胱氨酸残基，以及其它还原性基团（如蛋氨酸），容易发生错配二硫键将两个hGH分子上的半胱氨酸连接起来形成hGH二聚体；将半胱氨酸直接错误氧化成其它基团，如基丙氨酸和半胱氨酸亚砜。人工复性错误率高，无法控制，产物质量不稳定韩婷纯化成品配置提取培养基真核细胞重组技术原核细胞重组技术传统型方法提取细胞株破胞包涵体提取洗涤溶解层析复性纯化成品配置提取细胞株破壁酶切信号肽层析复性纯化成品配置分泌型方法比较两种重组技术的操作区别韩婷两种生长激素的区别宿主细胞进化高级产物自然分泌空间构象自然形成无需人工复性，步骤少，影响环节少产物杂质少活性损失小、效价高稳定性好、批间差异无宿主细胞进化低级产物人工提取空间构象无法自然形成需人工复性步骤多，影响因素多产物杂质多活性损失大、效价低稳定性差、批间差别大原核细胞重组技术真核细胞重组技术韩婷生长激素的电子镜像原核细胞源性

思真韩婷产品特点全球唯一哺乳动物细胞源性人生长激素。天然纯净，纯度达99.99％，极低的抗体产生率。默克雪兰诺公司是目前世界上唯一获准以哺乳动物细胞为宿主，生产人类蛋白激素的生产商。韩婷生长激素简介思真®产品知识简介生长激素的临床使用思真在®非适应症市场活动韩婷GH的生理作用GH促进组织的生长，刺激软骨细胞分裂，促进骨骼生长，改善身高GH促进蛋白质合成，增加体内氮储量，改善氮平衡GH促进脂肪分解，减少体内脂含量GH促进水和矿物质代谢GH减少糖的利用，升高血糖抗衰老、促进脑功能、增强心肌功能、提高免疫功能等作用韩婷rhGH适应症已批准的适应症国外国内研究中的适应症小儿生长激素缺乏症**子宫内的发育迟缓与慢性肾病相关的生长迟滞**手术及创伤后高代谢状态Turners综合症**复合性骨折成人生长激素缺乏症*

脓毒败血症短肠综合症(Zorbitive独占）*

GH组成代谢引起的疾病AIDS相关的瘦弱*

某些儿童哮喘AIDS相关脂肪重新分布综合症*

重度烧伤

*

资料来源：FDA；SFDA；Rxlist；各大公司年报韩婷国内rhGH的主要应用领域儿科：小儿GHD、Turner综合症烧伤科：烧伤外科：创伤、大手术、低蛋白血症、重症胰腺炎、短肠综合症、消化道瘘、肝硬化等呼吸科：呼吸机脱机（呼吸肌力不足）其它：成人GHD、抗衰老韩婷rhGH在外科领域的使用外科应激病人的治疗调节代谢纠正代蛋白血症（手术及外伤后严重负氮平衡，严重低蛋白血症）提高术后机体免疫功能腹部瘘的术前、术后治疗营养不良的切口或创面的愈合严重大面积烧伤促进创口、吻合口、瘘口愈合韩婷rhGH在手术及创伤后低蛋白血症韩婷手术及创伤后代谢的特点轻度创伤时，蛋白分解率变化不大，合成率下降；中重度创伤时，蛋白合成和分解速度均加快，但分解代谢占优势，导致净蛋白丢失，负氮平衡。大量由骨骼肌分解的氨基酸（主要是丙氨酸和Gln）转化成急性相蛋白，维持酸碱平衡，支持免疫和创伤修复肝糖异生加快，血糖升高。脂肪持续动员和利用成为主要供能物质分解代谢增加，氧及能量消耗增加肠粘膜屏障功能受损，肠通透性增加免疫功能抑制，抵抗力下降韩婷蛋白质代谢的特点成人每日蛋白质需要量为80g血浆蛋白质与全身蛋白质保持约1:30的恒定关系韩婷蛋白质代谢平衡的重要性体内不存在作为能量储备的蛋白质机体的蛋白质全部具有特定的功能蛋白质的消耗意味着相应器官功能的丧失蛋白质过度消耗对生存极为不利韩婷低白蛋白血症的发生率感染病人非感染病人低白蛋白血症92.4%低白蛋白血症7.6%南京军总李维勤，黎介寿韩婷急性低蛋白血症病因及预后

急性低蛋白血症发病原因：血液稀释：大量失血后补液创伤：烧伤颅脑外伤手术应激：中大型手术感染：败血症急性低蛋白血症是多种疾病的一个共同表现。血浆蛋白浓度既是病人营养指标，也是预后的重要指标，白蛋白水平越低，死亡率越高。韩婷

低白蛋白血症与病人的预后密切相关

Villota（1980）：214例危重病人血浆白蛋白浓度与病死率成负相关

（小于20g/L,死亡率96%）血浆白蛋白浓度与感染率成负相关Reinharde（1980）：2060例住院病人低蛋白血症(SAL<35g/L)与死亡率密切相关临床学者早就注意到：韩婷重要器官功能障碍伤面修复愈合延迟肌肉无力（骨骼肌）免疫功能降低（严重感染）低蛋白血症临床导致……韩婷急性低蛋白血症实验室指标

正常白蛋白：40-55g/L正常白蛋白/球蛋白比例：1.5-2.5低蛋白血症：＜35g/L严重低蛋白血症：＜28g/L韩婷临床表现术后卧床不起，肌肉无力，咳嗽无力伤口愈合减慢并发症（伤口感染，肺部感染）增加恢复减慢，住院时间延长预后不良，死亡率增加韩婷急性低蛋白血症的治疗

外源性白蛋白的作用

外源性白蛋白只能起到短暂维持胶体渗透压的作用外源性白蛋白的副作用

1、增加血管负荷

2、抑制内源性白蛋白的合成

3、增加血源性感染的可能

4、外源性白蛋白不能转化为自身蛋白，不参与组织愈合韩婷只有自身的白蛋白才能起到真正的生理作用：快速提高白蛋白浓度，恢复载体功能维持血浆胶体渗透压，维持循环血容量。减轻组织水肿

急性低蛋白血症的治疗

韩婷促进自身白蛋白合成减少蛋白质分解提高营养物质转换率对肠黏膜屏障的保护作用免疫调节作用改善患者精神状态rhGH的作用韩婷rhGH联合生长抑素治疗急性坏死性胰腺炎韩婷重症胰腺炎的发病学说酶异常激活学说过度炎症反应学说微循环障碍学说其他：感染等胰腺炎韩婷重症胰腺炎的发病机制全身炎症反应综合征（SIRS）多器官功能障碍综合征（MODS）促炎因子与抗炎性细胞因子失衡韩婷生长抑素的治疗作用抑制胰