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文档简介
、原核生物与真核生物的基因结构、原核生物基因结构一非编码区→1←——编码区—1←非编码区,启动子广1ATGTGCACGTAGTTA铁止ATACACGTGCATCAAT.I.编码区上游编码蛋白质编码区下游调控遗传信息的表达(调控程序)(1)编码区和非编码区能编码蛋白质的区段叫做编码区;不能编码蛋白质的区段叫做非编码区,在非编码区上有调控遗传信息表达的核苷酸序列、原核生物与真核生物的基因结构1非编码区→1编码区非编码区启动子cce【止子RNA聚合酵)AUGUGCACGUAGUUA(2)启动子、RNA聚合酶、终止子启动子:位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列。没有启动子,基因就不能转录。RNA聚合酶能够识别启动子上的结合位点并与其结合的一种蛋白质终止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断它能阻碍RNA聚合酶的移动,并使其从DNA模板链上脱离下来,使转录终止。非编码区→122、真核生物的基因结构一非编码区→1编码区←非编码区编码蛋白质启动子终止子外显子内含子(能编码蛋白质)(不能编码蛋白质)(1)外显子和内含子外显子能编码蛋白质,内含子不能编码蛋白质。(2)非编码区和非编码序列非编码序列包括非编码区和编码区的内含子2、真核生物的基因结构3非编码区编码区非编码废编码区上游编码区下游启动子终止子与RNA聚合酶结合位点原核细胞的基因结构真核细基因结构非编码区编码区启动子终止子转录nRNA前体外显子加工↓成熟mRNA内含子翻译肽0▲◆。◆①相同点:都是由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编码区构成。②不同点:原核细胞基因的编码区是连续的;真核细胞的编码区是间隔的,不连续的。非编码区4二、基因工程的基本操作程序阅读教材P8-12,回答下列相关问题:1、基因工程的基本操作流程图:生物材料专录限制窖包扦第二非植物组织培养等二、基因工程的基本操作程序5(一)目的基因的获取生物材料→分离DNA6NA片段基因组文库①从基因文库分离MRNA→cDNA、cDNA文库中获取②利用PcR技术扩增③化学方法人工合成1、从基因文库中直接获取:(1)基因文库的概念:见P(2)基因文库的分类:(按外源DNA片段的来源分类)基因组DNA文库:含有一种生物的全部基因部分基因文库:只包含了一种生物的部分基因,如:cDNA文库(3)建立基因文库的目的在未知基因序列的情况下,便于寻找并获得所需的大量的目的基因。(4)基因文库的构建方法:〔①直接分离法基因组文库②反转录法-cDNA(一)目的基因的获取6基因文库的构建方法之一:①直接分离法鸟枪法原核生物的基因组文库用喝制切成多村断提取某种生物的全部DNA用适当的限制酶切定大小的DMA片段将DNA片与载体连接导入受体菌中储存基因组文库馨基因文库的构建方法之一:7基因文库的构建方法之二:反转录法:一主要是真核生物的cDNA原核细胞的基因:真核细胞的基因在细胞质内转在细胞核内转录mRNA在细胞质中将mRNA分离并加入反转录酶DNA单链合成第二条DNA链CDNA基因文库的构建方法之二:8基因文库的构建方法基因组文库:一般针对原核生物的基因,因为基因少部分基因文库:一般针对真核生物的基因,如cDNA文库文库类型cDNA文库基因组文库文库大小基因中启动子基因中内含子小无无大有有基因多少某种生物的部分基因某种生物的全部基因物种之间的基可以部分基因可以因交流说明基因文库的组建过程就包含基因工程的基本操作步骤。从基因文库中获取目的基因的优点是操作简便,缺点是工作量大,具有一定的盲目性.基因文库的构建方法9基因组AJ含目的基DNAl的基因I提取构建文库」筛选国因的菌株分离母菌cDNA|CJ含目的基mRNAHcDNA提取构建文库」筛选因的菌株分离目的基因Ⅲ限制酶切割分离MRM录DNA片段→基因组文库}①从基因文库生物材料→分离DN→cDNA、cDNA文库中获取②利用PcR技术扩增③化学方法人工合成基因组AJ含目的基10原核生物与真核生物的基因结构课件11原核生物与真核生物的基因结构课件12原核生物与真核生物的基因结构课件13原核生物与真核生物的基因结构课件14原核生物与真核生物的基因结构课件15原核生物与真核生物的基因结构课件16原核生物与真核生物的基因结构课件17原核生物与真核生物的基因结构课件18原核生物与真核生物的基因结构课件19原核生物与真核生物的基因结构课件20原核生物与真核生物的基因结构课件21原核生物与真核生物的基因
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