杜仲提取物对三黄鸡生产性能和肠道微生物菌群的影响

杜仲提取物对三黄鸡生产性能和肠道微生物菌群的影响

杜仲是一种独特的雌性树种，形成一个属和一个属（杜仲科）。它既是名贵中药材,又是很好的保健品,传统取其皮入药。近年研究表明,杜仲叶与皮的化学成分基本相同,药效类似。杜仲叶中含有蛋白质、脂肪、维生素、矿物元素等营养成分以及绿原酸、桃叶珊瑚甙和松脂醇二葡萄糖甙等药用成分。近年来,日本已广泛采用杜仲叶粉作为饲料添加剂,并借此生产大量绿色及天然食品,取得了显著的经济效益。我国自20世纪90年代以来,对杜仲饲料添加剂也进行了较为深入的研究。研究结果表明,杜仲饲料添加剂具有增强动物免疫力,提高畜禽生产性能,改善肉、蛋、奶品质的功效。本试验通过研究杜仲提取物对三黄鸡生产性能和肠道微生物菌群的影响,初步探讨了杜仲提取物在肉鸡日粮中的适宜添加量。1材料和方法1.1提取物和萃取液的制备杜仲提取物由张家界恒兴生物科技有限公司提供(绿原酸含量8%);黄霉素由山东胜利股份有限公司生产(效价为8%)。杜仲提取物的制备:将新鲜杜仲叶(皮)切碎,碾成粉末,置于沸水中(料液比=1∶20),用直径为0.45μm微孔膜过滤,收集滤液,并将滤渣重复提取1次,合并2次所得滤液。此滤液主要含有绿原酸(0.67%),京尼平甙(0.26%),黄酮类化合物(1.83%),京尼平甙酸(0.18%)和桃叶珊瑚甙(0.33%)等。将此滤液减压浓缩,喷雾干燥,即得杜仲提取物。1.2玉米日粮中黄素的含量选用1日龄健康三黄鸡150羽(公母各1/2)随机分成5个处理组,各组体重差异均不显著(P>0.05),分别在试验1、2、3组中加入1500、2000、2500g/t杜仲提取物,试验4组添加黄霉素50mg/kg,对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,不添加任何药物(抗球虫药除外)。基础日粮组成及营养水平见表1。1.3日粮part动物试验于2004年6~8月在湖南农业大学动物营养代谢室进行。试验按试鸡日龄分为2个阶段,0~4和5~10周龄。试验前对鸡舍及其用具做好消毒工作,并按常规免疫程序进行预防接种。试鸡采用分栏网上平养和24h连续光照,第1~2周保持正常育雏温度(第1周33~34℃,第2周27~31℃),2周后脱温。鸡舍自然通风,相对湿度60%~75%,试鸡自由采食和饮水。日粮组成与营养水平均以干物质为基础。CompositionandnutrientlevelswerebasedonDM.*预混料可为每kg全价料提供Thepremixprovidesfollowingfor1kgoffeed:VA5000IU;VB11.5mg;VB26mg;VB61.5mg;VB120.01mg;VD3500IU;VE10IU;VK31mg;烟酸Nicotinicacid35mg;叶酸Folicacid0.8mg;生物素Biotin0.8mg;D-泛酸钙D-calciumpantothenate12mg;铜Cu20mg;铁Fe90mg;锌Zn50mg;锰Mn70mg;碘I0.38mg;硒Se0.16mg。1.4测量指标1.4.1体重试验开始时记录各重复试鸡的初生重及每个饲养阶段结束时早晨空腹称活重。1.4.2消耗准确记录各阶段各重复的耗料量,并计算各阶段的总耗料量和平均耗料量及饲料转化率。1.4.3盲肠道ph取盲、回肠肠道内容物1g左右,用蒸馏水稀释10倍,用PHBJ-290型便携式pH计测定。1.4.4分离菌株在肠内测定试验结束时,每组随机取3羽体重适中的健康肉鸡进行屠宰,立即剖腹取盲、回肠各1段,并结扎所取肠段,用酒精棉消毒结扎口,将所取肠段放入已灭菌的样品袋,带回实验室,检测各肠段内容物中乳酸杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌。参照文献测定以上微生物数量,每g样的含菌数用lg(cfu)/g表示。1.5数据的统计与分析采用SAS统计软件的单因素方差分析,并用Duncan氏法进行多重比较,结果以平均值±标准误表示。2结果2.1杜仲提取物对三黄鸡产量的影响2.1.1总日增重的比较由表2可见,在第1阶段,试验2组平均日增重最高,比试验4组提高0.59%,比对照组提高3.05%,但各组间差异不显著(P>0.05)。在第2阶段,平均日增重以试验3组和试验4组较高,与对照组相比差异显著(P<0.05),且添加杜仲提取物的3个试验组比对照组平均日增重分别提高3.34%、4.93%和13.42%。在整个阶段,平均日增重仍以试验3组和试验4组较高。添加杜仲提取物的3个试验组比对照组平均日增重分别提高2.68%、4.30%和8.22%。2.1.2差异不显著的原因由表2可见,在第1阶段,平均日采食量以试验4组最高,试验3组最低,各组间差异不显著(P>0.05)。在第2阶段,平均日采食量以试验3组最高,比对照组高4.83%,各组间差异不显著(P>0.05)。就整个阶段而言,平均日采食量以试验4组最高,试验3组次之,各组间差异不显著(P>0.05)。2.1.3差异不显著的原因由表2可见,在第1阶段,饲料转化率以试验4组最高,比试验2、3组和对照组分别高4.39%、4.39%和5.94%。但各组间差异不显著(P>0.05)。在第2阶段,饲料转化率以试验4组最低,比对照组降低9.81%(P<0.05),与其他各组相比,差异不显著(P>0.05)。在添加杜仲提取物的3个试验组中,试验3组饲料转化率最低,比对照组降低7.69%(P>0.05),与试验4组相比差异不显著(P>0.05)。就整个阶段而言,饲料转化率以试验4组最低,比对照组降低6.01%(P<0.05),与添加杜仲提取物的3个试验组相比,差异不显著(P>0.05)。在添加杜仲提取物的3个试验组中,饲料转化率分别为3.02%、3.06%和3.01%,与试验4组相比差异不显著(2.97%)(P>0.05)。同行数据肩注完全不同表示差异显著(P<0.05)。下表同。Valueswithdifferentletterssuperscriptsinthesamerowmeansignificantdifference(P<0.05).Thesameasbelow.2.2杜仲提取物对三黄鸡肠道内容物ph的影响由表3可知,对照组盲肠和回肠内容物pH为6.84和6.64,均高于其他各组,但各组间差异不显著(P>0.05)。2.3添加杜仲提取物的3个试验组中乳酸杆菌、回肠内容物和大肠杆菌浓度的变化,见表1本试验于肉鸡饲养试验结束时取其肠道内容物分别测定盲肠、回肠内的大肠杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌的浓度(见表4)。结果表明:日粮中添加杜仲提取物能显著降低肉鸡盲肠中大肠杆菌数量(P<0.05)。试鸡各组间盲肠、回肠内容物中乳酸杆菌差异不显著(P>0.05),在添加杜仲提取物的3个试验组中,盲肠、回肠内容物中乳酸杆菌以试验4组浓度最高,与试验3组差异不显著(P>0.05),比对照组增加1.86%和2.65%。盲肠内容物中双歧杆菌浓度以试验3组和试验4组最高,比对照组分别增加2.38%和3.01%,但各组间差异不显著(P>0.05)。回肠内容物中双歧杆菌浓度以试验2组最高,比对照组增加1.42%,比试验4组增加1.55%,但各组间差异不显著(P>0.05)。盲肠中大肠杆菌浓度以试验4组最低,与试验2组和试验3组差异不显著(P>0.05),比试验1组降低5.55%(P<0.05),在添加杜仲提取物的3个试验组中,随着添加量的递增,盲肠中大肠杆菌浓度依次递减,且试验2组与试验3组比对照组降低4.16%和4.79%。试验3组回肠中大肠杆菌浓度最低,各组间差异不显著(P>0.05)。3讨论3.1杜仲提取物的用量本试验研究结果表明,日粮中添加杜仲提取物后,在第1阶段,各组试鸡平均日增重无显著差异,且添加2500g/t组表现出降低趋势。这与国内外报道杜仲能促进动物生长的试验结果不一致。这可能是由于试验前期杜仲有效成分中的黄酮类化合物,对许多酶的活性都有抑制作用,从而抑制动物的生长,降低其饲料的利用率。但在第2阶段,添加2500g/t组平均日增重显著高于对照组(P<0.05),且在整个阶段也表现这一趋势,这可能与杜仲提取物添加使用的时间及剂量有关。随着添加时间的延长,杜仲提取物的作用才得以发挥,且随着剂量的增加,其效果越来越显著。Clayton报道指出,中草药中的有机酸和芳香油成分能促进动物消化液的分泌和采食,并促进生长,提高饲料利用率。本试验前期,肉鸡对添加杜仲提取物的饲料有一个适应过程,随着添加时间的延长,采食量有所提高,肉鸡饲料转化率也随之改变。3.2杜仲提取物的抑菌和生产性能本试验中,添加杜仲提取物具有提高盲肠、回肠乳酸杆菌和双歧杆菌数量的趋势,但趋势不明显。与对照组相比,添加杜仲提取物2000g/t、2500g/t和黄霉素组均显著降低了盲肠中大肠杆菌数量(P<0.05),且具有降低回肠中大肠杆菌数量的趋势,这表明在三黄鸡日粮中添加杜仲提取物,有利于乳酸杆菌和双歧杆菌的增殖,且能明显地抑制盲肠中大肠杆菌的增殖,这与何云等研究结果基本一致。此外,李平兰等试验指出,中草药能调节肉鸡肠道微生态平衡,显著增加有益乳杆菌的数量和降低有害菌肠杆菌的数量。杜仲提取物中含有绿原酸、桃叶珊瑚甙、杜仲多糖和黄酮类等多种有效成分,绿原酸是杜仲主要的有效药用成分之一,具有较广泛的抗菌、利胆、止血及提高白血球数量和抗病毒的作用;体外抑菌试验表明,杜仲对大肠杆菌、金色葡萄球菌、肺炎球菌和炭疽杆菌等均有不同程度的抑制作用。这些化合物可能通过对肠道中益生菌的增殖,从而在乳酸杆菌、双歧杆菌等益生菌的作用下实现对动物机体免疫力的增强和生产性能的提高。此外,这类益生菌在肠道内的增殖还可合成大量的B族维生素,产生乳酸、醋酸等有机酸及细菌素等抑菌物质等,这些均有助于动物对抗有害微生物,抵御病原微生物的侵袭,提高动物的免疫能力。在本次试验中,添加杜仲提取物降低了盲肠和回肠内容物的pH,提高了肠道内容物的酸度,再次证明了杜仲提取物对抑制有害微生物的生长繁殖有一定作用。从本次试验结果可知,杜仲提取物对肠道中有益菌乳酸杆菌和双歧杆菌均有不同程度的增殖作用,而对肠道中条件性致病菌大肠杆菌却有明显的抑制作用,与对照组相比差异显著(P<0.05)。在生产性能方面