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文档简介
高中生物选修1课题1果酒和果醋制作一、试验原理酶1.酵母菌细胞呼吸酶酶酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖,体现式为:C6H12O6+O2→CO2+H2O+能量酶酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳,体现式为:C6H12O6→C2H5OH+CO2+能量2.酵母菌发酵最佳环境酵母菌在有氧和无氧条件下都能生活:在有氧时,酵母菌大量繁殖,不过不起到发酵效果;在无氧时,繁殖速度减慢,不过此时可以进行发酵。在运用酵母菌发酵时最佳是先通入足够无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖,再隔绝氧气进行发酵。20℃左右最适合酵母菌繁殖,酒精发酵最佳温度是在18℃~25℃,pH最佳是弱酸性。酶3.醋酸菌好氧性细菌,当缺乏糖源时和有氧条件下,可将乙醇(酒精)氧化成醋酸。体现式为:C2H5OH→CH3COOH+H2O;当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中糖分解成醋酸。酶醋酸菌生长最佳温度是在30℃~35℃二、试验环节1.对发酵瓶、纱布、榨汁机、盛葡萄汁器皿等试验用品进行清洗并消毒。先用温水反复冲洗几次,再用体积分数为75%酒精擦拭消毒,晾干待用。2.取葡萄500g,清除枝梗和腐烂子粒。3.用清水冲洗葡萄1~2遍除去污物,注意不要反复多次冲洗。4.用榨汁机榨取葡萄汁后,将其装入发酵瓶中或将葡萄打成浆后,用洁净纱布过滤至发酵瓶中,盖好瓶盖。假如没有合适发酵装置,可以用500mL塑料瓶替代,但注入果汁量不要超过塑料瓶总体积2/3。5.将发酵瓶置于合适温度下发酵。6.由于发酵旺盛期CO2产量非常大,因而需要及时排气,防止发酵瓶爆裂。假如使用简易发酵装置,如瓶子(最佳选用塑料瓶),每天要拧松瓶盖2~4次,进行排气。7.10d后来,可以开始进行取样检查工作。例如,可以检查酒味、酒精含量、进行酵母菌镜检等工作。8.当果酒制成后来,可以在发酵液中加入醋酸菌或醋曲,然后将装置转移至30~35℃条件下发酵,适时向发酵液中充气。假如找不到醋酸菌菌种或醋曲,可尝试自然接种,但效果不是很好。假如没有充气装置,可以将瓶盖打开,在瓶口盖上纱布,以减少空气中尘土等污染。三、注意事项请分析此装置中充气口、排气口和出料口分别有哪些作用。为何排气口要通过一种长而弯曲胶管与瓶身连接?结合果酒、果醋制作原理,你认为应当怎样使用这个发酵装置?充气口排气口出料口答:充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用;排气口是在酒精发酵时用来排出CO2;出料口是用来取样。排气口要通过一种长而弯曲胶管与瓶身连接,其目是防止空气中微生物污染。使用该装置制酒时,应当关闭充气口;制醋时,应将充气口连接气泵,输入氧气。课题2腐乳制作试验原理1.参与豆腐发酵微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种,其中起重要作用是毛霉。2.毛霉是一种丝状真菌,常用于土壤、水果、蔬菜、谷物上,具有发达白色菌丝。3.毛酶等微生物产生蛋白酶能将豆腐中蛋白质分解成小分子肽和氨基酸;脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。二、试验环节1.将豆腐切成3cm×3cm×1cm若干块。所用豆腐含水量为70%左右,水分过多则腐乳不易成形。2.将豆腐块平放在铺有干粽叶盘内,粽叶可以提供菌种,并能起到保温作用。每块豆腐等距离排放,周围留有一定空隙。豆腐上面再铺上洁净粽叶。气候干燥时,将平盘用保鲜膜包裹,但不要封严,以免湿度太高,不利于毛霉生长。
3.将平盘放入温度保持在15~18
℃地方。毛霉逐渐生长,大概5
d后豆腐表面丛生着直立菌丝。
4.当毛霉生长旺盛,并呈淡黄色时,清除包裹平盘保鲜膜以及铺在上面粽叶,使豆腐块热量和水分可以迅速散失,同步散去霉味。这一过程一般持续36
h以上。
5.当豆腐凉透后,将豆腐间连接在一起菌丝拉断,并整洁排列在容器内,准备腌制。
6.长满毛霉豆腐块(如下称毛坯)与盐质量分数比为5∶1。将培养毛坯时靠近平盘没长直立菌丝一面统一朝向玻璃瓶边,将毛坯分层盘立摆放在容器中。分层加盐,并随层加高而增长盐量,在瓶口表面铺盐厚些,以防止杂菌从瓶口进入。约腌制8
d。〔注〕用盐腌制时,注意盐都用量。盐浓度过低,局限性以克制微生物生长,也许导致豆腐腐败变质;盐浓度过高,会影响腐乳口味。
7.将黄酒、米酒和糖,按口味不一样而配以多种香辛料(如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒等)混合制成卤汤。卤汤酒精含量控制在12%左右为宜。
〔注〕酒精含量高下与腐乳后期发酵时间长短有很大关系。酒精含量越高,对蛋白酶克制作用也越大,使腐乳成熟期延长;酒精含量过低,蛋白酶活性高,加紧蛋白质水解,杂菌繁殖快,豆腐易腐败,难以成块。
8.将广口玻璃瓶刷洁净后,用高压锅在100
℃蒸汽灭菌30
min。将腐乳咸坯摆入瓶中,加入卤汤和辅料后,将瓶口用酒精灯加热灭菌,用胶条密封。在常温状况下,一般六个月可以成熟。三、注意事项1.酿造腐乳重要生产工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵。前期发酵所发生重要变化是毛霉在豆腐(白坯)上生长。发酵温度为15~18
℃,此温度不适于细菌、酵母菌和曲霉生长,而适于毛霉慢慢生长。毛霉生长大概5
d后使白坯变成毛坯。前期发酵作用,一是使豆腐表面有一层菌膜包住,形成腐乳“体”;二是毛霉分泌以蛋白酶为主多种酶,有助于豆腐所具有蛋白质水解为多种氨基酸。后期发酵重要是酶与微生物协同参与生化反应过程。通过腌制并配入多种辅料(红曲、面曲、酒酿),使蛋白酶作用缓慢,增进其她生化反应,生成腐乳香气。2.毛霉是一种低等丝状真菌,有多种细胞核,进行无性繁殖。毛霉是食品加工业中重要微生物,它可以产生可以分解大豆蛋白蛋白酶,常用于制作腐乳和豆豉。课题3探讨加酶洗衣粉洗剂效果一、试验原理1.加酶洗衣粉是指具有酶制剂洗衣粉,目前常用酶制剂有四类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶,其中,应用最广泛、效果最明显是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。2.碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等具有大分子蛋白质水解成可溶性氨基酸或小分子肽,使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质,使洗衣粉具有更好去污能力。3.在本课题中,咱们重要探究有关加酶洗衣粉三个问题:一是一般洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍洗涤效果有什么不一样;二是在什么温度下使用加酶洗衣粉效果最佳,三是添加不一样种类酶洗衣粉,其洗剂效果有哪些区别。二、试验环节1探究用加酶洗衣粉与一般洗衣粉洗涤效果不一样①在2个编号烧杯里,分别注入500mL清水。
②取2块大小相等白棉布,用滴管在每块白布上分别滴上等量墨水,分别放入烧杯里,用玻璃棒搅拌。
③将2个烧杯分别放入同等温度温水中,保温5分钟。
④称取5克加酶洗衣粉和5克一般洗衣粉2份,分别放入2个烧杯中,用玻璃棒均匀搅拌。保温10分钟。
⑤观测并记录2个烧杯中洗涤效果2探究用加酶洗衣粉洗涤最佳温度条件①在3个编号烧杯里,分别注入500mL清水。
②取3块大小相等白棉布,用滴管在每块白布上分别滴上一滴食用油、鸡血、牛奶,分别放入烧杯里,用玻璃棒搅拌。
③将3个烧杯分别放入50摄氏度热水、沸水和冰块中,保温5分钟。
④称取5克加酶洗衣粉3份,分别放入3个烧杯中,用玻璃棒均匀搅拌。保温10分钟。
⑤观测并记录3个烧杯中洗涤效果。
3探究不一样种类加酶洗衣粉洗涤效果污染物蛋白酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉复合酶洗衣粉一般洗衣粉油渍汗渍血渍观测并记录四种洗衣粉分别洗涤三种污染洗涤效果。
三、注意事项1.变量分析和控制影响加酶洗衣粉洗涤效果原因有水温、水量、水质、洗衣粉用量,衣物质料、大小及浸泡时间和洗涤时间等。在这些原因中,水温是咱们要研究对象,而其她原因应在试验中保持不变。选用什么样水温进行试验需要试验者根据当地一年中实际气温变化来确定水温,一般状况下,冬季、春季、秋季和夏季可分别选用5℃、15℃、25℃和35℃水温,由于这4个水温是比较符合实际状况,对现实也有指导意义。2.洗涤方式和材料选用。在洗涤方式中有机洗和手洗两种方式,应考虑其中哪一种比较科学?哪一种更有助于控制变量?再有,洗衣机又可以分为半自动和全自动两种,相比之下,采用全自动洗衣机比很好,并且应当尽量使用同一型号小容量洗衣机,其机械搅拌作用相似。有关洗涤材料选用也有某些讲究。用衣物作试验材料并不理想,这是由于作为试验材料衣物,其大小、颜色、洁净程度等应当完全一致,而这并不轻易做到;此外,人为地在衣物上增长污物,如血渍、油渍等,也令人难以接受。因而,选用布料作为试验材料比较可行。在作对照试验时,可以控制布料大小、颜色以及污物量,使其相似;同步,也便于洗涤效果比较。3.水量、水质和洗衣粉用量问题。水用量和布料大小是成正比。做试验用布料不易过大,水量不易过多,但应当让布料充足浸泡在水中。水量和洗衣粉用量可以参照下表。试验时可根据表中数据换算出实际用量。假如在试验中使用手洗措施,如书本中图4-4所示,使用1000mL烧杯作为容器,可以用500mL水,洗衣粉用量可以用1g或1.5g。洗涤方式机洗手洗水量0.5L0.5L洗衣粉量0.5g1g或1.5g其她有关问题简述如下。试验中可以用滴管控制污物量,待污物干燥后再进行试验;布料应放在洗衣粉溶液中浸泡相似时间;采用玻璃棒或筷子搅拌方式模仿洗衣过程;模仿搅拌时间、次数和力量应基本相似。课题4酵母细胞固定化一、试验原理1.使用固定化酶技术,将这种酶固定在一种颗粒状载体上,再将这些酶颗粒装到一种反应柱内,柱子底端装上分布着许多小孔筛板。酶颗粒无法通过筛板小孔,而反应溶液却可以自由出入。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱上端注入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成果糖,从反应柱下端流出。反应柱能持续使用六个月,大大减少了生产成本,提高了果糖产量和质量。2.固定化酶和固定化细胞是运用物理或化学措施将酶或细胞固定在一定空间内技术,波及包埋法、化学结合法和物理吸附法。一般来说,酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定,而细胞多采用包埋法固定化。这是由于细胞个大,而酶分子很小;个大难以被吸附或结合,而个小酶轻易从包埋材料中漏出。固定化酶长处:使酶既能与反应物接触,又能与产物分离,还可以被反复运用。固定化细胞长处:成本更低,操作更轻易,可以催化一系列化学反应。二、试验环节1。细胞活化称取lg干酵母,放入50mL小烧杯中,加人蒸馏水10mL,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀,成糊状,放置1h左右,使其活化。【注】活化:让处在休眠状态微生物重新恢复正常生活状态2。配制物质量浓度为0.05mo1/LCaCl2溶液
称取无水CaCl20.83g。放人200mL烧杯中,加入150mL蒸馏水,使其充足溶解,待用。
3。配制海藻酸钠溶液
称取0.7g海藻酸钠,放入50mL小烧杯中。加人10mL水,用酒精灯加热,边加热边搅拌,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化,用蒸馏水定容至10mL。注意,加热时要用小火,或者间断加热,反复几次,直到海藻酸钠溶化为止。
4。海藻酸钠溶液与酵母细胞混合
将溶化好海藻酸钠溶液冷却至室温,加人已活化醉母细胞,进行充足搅拌,使其混合均匀,再转移至注射器中。【注】冷却至室温目:防止杀死酵母菌5。固定化酵母细胞以恒定速度缓慢地将注射器中溶液滴加到配制好CaCl2溶液中,观测液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠情形。将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右。【注】CaCl2溶液作用:使胶体聚沉6使用固定化酵母细胞发酵将固定好酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。b)将150mL质量分数为10%葡萄糖溶液转移到200mL锥形瓶中,再加入固定好酵母细胞,置于25℃下发酵24h。
三、注意事项1.配制海藻酸钠溶液:小火、间断加热、定容,假如加热太快,海藻酸钠会发生焦糊。2.海藻酸钠溶液与酶母细胞混合:冷却后再混合,注意混合均匀,不要进入气泡3.制备固定化酵母细胞:高度合适,并匀速滴入4.刚形成凝胶珠应在CaCL2溶液中浸泡一段时间,以便Ca2+与Na+充足互换,形成凝胶珠稳定。检查凝胶珠与否形成,可用下列措施:用镊子夹起一种凝胶珠放在试验桌上用手挤压,假如不轻易破裂,没有液体流出就表明成功地制成了凝胶珠,还可以用手将凝胶珠在试验桌上用力摔打,假如凝胶珠很轻易弹起,也表明制备凝胶珠是成功。5.凝胶珠颜色和形状假如制作凝胶珠颜色过浅、呈白色,阐明海藻酸钠浓度偏低,固定酵母细胞数目较少;假如形成凝胶珠不是圆形或椭圆形,则阐明海藻酸钠浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。课题5DNA粗提取与鉴定一、试验原理提取生物大分子基本思绪是选用一定物理或化学措施分离具有不一样物理或化学性质生物大分子。对于DNA粗提取而言,就是要运用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面差异,提取DNA,清除其她成分。1.DNA溶解性DNA和蛋白质等其她成分在不一样浓度NaCl溶液中溶解度不一样,运用这一特点,选用恰当盐浓度就能使DNA充足溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以到达分离目。此外,DNA不溶于酒精溶液,不过细胞中某些蛋白质则溶于酒精。运用这一原理,可以将DNA与蛋白质深入分离。2.DNA对酶、高温和洗涤剂耐受性蛋白酶能水解蛋白质,不过对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80oC高温,而DNA在80oC以上才会变性。洗涤剂可以瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。3.DNA鉴定在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,因而二苯胺可以作为鉴定DNA试剂。二、试验设计试验材料选用但凡具有DNA生物材料都可以考虑,不过使用DNA含量相对较高生物组织,成功也许性更大。破碎细胞,获取含DNA滤液动物细胞破碎比较轻易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水,同步用玻璃棒搅拌,过滤后搜集滤液即可。假如试验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如,提取洋葱DNA时,在切碎洋葱中加入一定洗涤剂和食盐,进行充足搅拌和研磨,过滤后搜集研磨液。注意:①为何加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅拌机械作用,就加速了鸡血细胞破裂(细胞膜和核膜破裂),从而释放出DNA。②加入洗涤剂和食盐作用分别是什么?洗涤剂是某些离子去污剂,能溶解细胞膜,有助于DNA释放;食盐重要成分是NaCl,有助于DNA溶解。③假如研磨不充足,会对试验成果产生怎样影响?研磨不充足会使细胞核内DNA释放不完全,提取DNA量变少,影响试验成果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。④此环节获得滤液中也许具有哪些细胞成分?也许具有核蛋白、多糖和RNA等杂质。清除滤液中杂质方案一原理是DNA在不一样浓度NaCl溶液中溶解度不一样;方案二原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三原理是蛋白质和DNA变性温度不一样。注意:①为何反复地溶解与析出DNA,可以清除杂质?用高盐浓度溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中杂质。因而,通过反复溶解与析出DNA,就可以除去与DNA溶解度不一样多种杂质。②方案二与方案三原理有什么不一样?方案二是运用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取DNA与蛋白质分开;方案三运用是DNA和蛋白质对高温耐受性不一样,从而使蛋白质变性,与DNA分离。DNA析出与鉴定将处理后溶液过滤,加入与滤液体积相等、冷却酒精溶液,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取DNA。用玻璃棒沿一种方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面水分。取两支20ml试管,各加入物质量浓度为2mol/LNaCl溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色变化,看看溶解有DNA溶液与否变蓝。三、试验环节—以洋葱为试验材料1.称取30克已切碎洋葱,放入研钵中,加入少许石英砂助研,倒入10mL2mol/L氯化钠溶液,充足研磨。洋葱具有挥发性刺激物,有效减少刺激,才能使试验顺利进行。上课前,教师可先将洋葱放入冰箱冷冻一会儿,使其凉透但又不能结冰;或将洋葱切成几大块,放入清水泡一会儿,让其挥发性刺激物溶于水,可以减轻刺激。然后将洋葱切碎备用。研磨目重要是使洋葱细胞破裂,使DNA溶于2mol/L氯化钠溶液,没必要将洋葱研成粥糊状,后者既挥霍时间又影响试验效果。研磨时,切忌使用搅拌器(榨汁机)。使用搅拌器虽可以提高研磨效率,但搅拌器将洋葱切成极细小颗粒,无法通过过滤将洋葱颗粒剔除。只能将酒精直接倒入滤液中,许多洋葱小颗粒由于轻会漂浮起来,DNA藏在其中,无法辨别。学生看不到白色纤维状粘稠物DNA。2.研磨后,用漏斗和纱布将汁液过滤到小烧杯中,得到滤液。3.向滤液中加入95%酒精溶液20mL,沿烧杯壁缓缓倒入,不要震动或搅拌。此时,烧杯中液体分为上、下两层,下层较浑浊,上层澄清,很快上层溶液中就会有白色纤维状粘稠物析出,用玻璃棒可将其轻轻卷起。这就是记录生命遗传信息重要物质——DNA。DNA析出过程中,切忌震动和搅拌(不震动易于分层,咱们就能很轻易观测到上清液中丝状物;搅拌会使非常柔软DNA断裂成小段,不易取出)。假如用玻璃棒DNA不易卷起,可改用表面打毛牙签,DNA提取物就缠绕在牙签上了。4.鉴定:取两支试管,编为1、2号,各加入2mol/L氯化钠溶液2mL,向1号试管中加入某些白色纤维状物,振荡使其溶解,然后向两支试管中各加入2mL二苯胺试剂,沸水浴加热5分钟。四、注意事项1.以血液为试验材料时,每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠防止血液凝固。2.加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则轻易产生大量泡沫,不利于后续环节地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免DNA分子断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。3.二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定效果。4.DNA溶解度与NaCl溶液浓度关系:当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时,随浓度升高,DNA溶解度减少;当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时,随浓度升高,DNA溶解度升高。5.盛放鸡血细胞液容器,最佳是塑料容器。鸡血细胞破碎后来释放出DNA,轻易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一某些,提取到DNA就会更少。因而,试验过程中最佳使用塑料烧杯和试管,这样可以减少提取过程DNA损失。课题6血红蛋白提取和分离一、试验原理蛋白质物化理性质:形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别,由此提取和分离多种蛋白质。1.凝胶色谱法(分派色谱法):(1)原理:分子量大分子通过多孔凝胶颗粒间隙,旅程短,流动快;分子量小分子穿过多孔凝胶颗粒内部,旅程长,流动慢。(2)凝胶材料:多孔性,多糖类化合物,如葡聚糖、琼脂糖。(3)分离过程:混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→搜集大分子→搜集小分子洗脱:从色谱柱上端不停注入缓冲液,促使蛋白质分子差速流动。(4)作用:分离蛋白质,测定生物大分子分子量,蛋白质脱盐等。2.缓冲溶液(1)原理:由弱酸和对应强碱弱酸盐构成(如H2CO3-NaHCO3,NaH2PO4/Na2HPO4等),调整酸和盐用量,可配制不一样pH缓冲液。(2)缓冲液作用:抵制外界酸、碱对溶液pH干扰而保持pH稳定。3.凝胶电泳法:(1)原理:不一样蛋白质带电性质、电量、形状和大小不一样,在电场中受到作用力大小、方向、阻力不一样,导致不一样蛋白质在电场中运动方向和运动速度不一样。(2)分离措施:琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。(3)分离过程:在一定pH下,使蛋白质基团带上正电或负电;加入带负电荷多SDS,形成“蛋白质-SDS复合物”,使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。二、试验环节1.样品处理红细胞洗涤洗涤红细胞目是清除杂蛋白,采集血样要及时采用低速短时间离心分离红细胞,然后用胶头吸管吸出上层透明黄色血浆,将下层暗红色红细胞液体倒入烧杯,再加入五倍体积生理盐水,缓慢搅拌10min,低速短时间离心,如此反复洗涤三次,直至上清液中没有黄色,表明红细胞已洗涤洁净。②血红蛋白释放在蒸馏水和甲苯作用下,红细胞破裂释放出血红蛋白。注:加入蒸馏水后红细胞液体积与原血液体积要相似。加入甲苯目是溶解细胞膜,有助于血红蛋白释放和分离。2.粗分离①分离血红蛋白溶液将搅拌好混合溶液离心后,试管中溶液分为4层。第一层为无色透明甲苯层,第2层为白色薄层固体,是脂溶性物质沉淀层,第3层是红色透明液体,这是血红蛋白水溶液,第4层是其她杂质暗红色沉淀物。将试管中液体用滤纸过滤,除去之溶性沉淀层,于分液漏斗中静置半晌后,分出下层红色透明液体。②透析取1mL血红蛋白溶液装入透析袋中,将透析袋放入盛有300mL物质量浓度为20mmol/L磷酸缓冲液中,透析12h。透析可以清除样品中分子量较小杂质,或用于更换样品缓冲液。3.纯化调整缓冲液面:打开色谱柱下端流出口,使柱内凝胶面上缓冲液缓慢下降到与凝↓胶面平齐,关闭出口。加入蛋白质样品:用吸管将透析后样品沿管壁围绕移动加到色谱柱顶端。加样后,∣打开下端出口,使样品渗透凝胶床内,等样品完全渗透凝胶层后,↓关闭出口。调整缓冲液面:加入20mmol/L磷酸缓冲液到恰当高度↓洗脱:连接缓冲液洗脱瓶,打开下端出口,进行洗脱。↓搜集分装蛋白质:待红色蛋白质靠近色谱柱底端时,用试管搜集。4.纯度鉴定------SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(选做)三、注意事项电泳技术电泳技术就是在电场作用下,运用待分离样品中多种分子带电性质以及分子自身大小、形状等性质差异,使带电分子产生不一样迁移速度,从而到达对样品进行分离、鉴定或提纯目。2.红细胞洗涤假如分层不明显,也许是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白原因。此外,离心速度过高和时间过长,会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀,也得不到纯净红细胞,影响后续血红蛋白提取纯度。3.怎样检测凝胶色谱柱装填与否成功由于凝胶是一种半透明介质,因而可以在凝胶柱旁放一支与凝胶柱垂直日光灯,检查凝胶与否装填得均匀。此外,还可以加入大分子有色物质,观测色带移动状况。假如色带均匀、狭窄、平整,阐明凝胶色谱柱性能良好。假如色谱柱出现纹路或是气泡,轻轻敲打柱体以消除气泡,消除不了时要重新装柱。4.为何凝胶装填要紧密、均匀?假如凝胶装填得不够紧密、均匀,就会在色谱柱内形成无效空隙,使本该进入凝胶内部样品分子从这些空隙中通过,搅乱洗脱液流动次序,影响分离效果。5.沸水浴处理加入洗脱液湿凝胶目不仅节省时间,还能除去凝胶中也许带有微生物和排除凝胶内空气。6.G-75“G”代表凝胶交联程度,膨胀程度及分离范围,75体现凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水7.5g。7.装填完后,及时用洗脱液洗脱目:使凝胶装填紧密8.加入柠檬酸钠有何目?为何要低速、短时离心?为何要缓慢搅拌?防止血液凝固;防止白细胞沉淀;防止红细胞破裂释放出血红蛋白。9.与其她真核细胞相比,红细胞特点及这一特点对进行蛋白质分离意义哺乳动物及人成熟红细胞是双面凹圆饼状,没有细胞核和细胞器。其具有血红蛋白是有色蛋白,因而在凝胶色谱分离时可以通过观测颜色来判断什么时候应当搜集脱液。这使血红蛋白分离过程非常直观,大大简化了试验操作。10.怎样检测血红蛋白分离与否成功假如凝胶色谱柱装填得很成功、分离操作也对旳话,能清晰地看到血红蛋白红色区带均匀、狭窄、平整,伴随洗脱液缓慢流出;假如红色区带歪曲、散乱、变宽,阐明分离效果不好,这与凝胶色谱柱装填有关。高中生物选修3一、
基因工程1、(a)基因工程诞生(一)基因工程概念基因工程是指按照人们愿望,进行严格设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新遗传特性,发明出更符合人们需要新生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工,又叫做DNA重组技术。2、(a)基因工程原理及技术原理:基因重组技术:(一)基因工程基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:重要是从原核生物中分离纯化出来。(2)功能:可以识别双链DNA分子某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位两个核苷酸之间磷酸二酯键断开,因而具有专一性。(3)成果:经限制酶切割产生DNA片段末端一般有两种形式:黏性末端和平末端。2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)比较:①相似点:都缝合磷酸二酯键。②区别:E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链DNA片段互补黏性末端之间磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端之间效率较低。(2)与DNA聚合酶作用异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已经有核苷酸片段末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运送车”——载体(1)载体具有条件:①能在受体细胞中复制并稳定保留。②具有一至多种限制酶切点,供外源DNA片段插入。③具有标识基因,供重组DNA鉴定和选用。(2)最常用载体是质粒,它是一种裸露、构造简朴、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力双链环状DNA分子。(3)其他载体:噬菌体衍生物、动植物病毒(二)基因工程基本操作程序第一步:目基因获取1.目基因是指:编码蛋白质构造基因。2.原核基因采用直接分离获得,真核基因是人工合成。人工合成目基因常用措施有反转录法_和化学合成法_。3.PCR技术扩增目基因(1)原理:DNA双链复制(2)过程:第一步:加热至90~95℃DNA解链;第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链合成。第二步:基因体现载体构建1.目:使目基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目基因可以体现和发挥作用。2.构成:目基因+启动子+终止子+标识基因(1)启动子:是一段有特殊构造DNA片段,位于基因首端,是RNA聚合酶识别和结合部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需蛋白质。(2)终止子:也是一段有特殊构造DNA片段,位于基因尾端。(3)标识基因作用:是为了鉴定受体细胞中与否具有目基因,从而将具有目基因细胞筛选出来。常用标识基因是抗生素基因。第三步:将目基因导入受体细胞_1.转化概念:是目基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和体现过程。2.常用转化措施:将目基因导入植物细胞:采用最多措施是农杆菌转化法,另首先尚有基因枪法和花粉管通道法等。将目基因导入动物细胞:最常用措施是显微注射技术。此措施受体细胞多是受精卵。将目基因导入微生物细胞:3.重组细胞导入受体细胞后,筛选具有基因体现载体受体细胞根据是标识基因与否体现。第四步:目基因检测和体现1.首先要检测转基因生物染色体DNA上与否插入了目基因,措施是采用DNA分子杂交技术。2.另首先还要检测目基因与否转录出了mRNA,措施是采用用标识目基因作探针与mRNA杂交。3.最终检测目基因与否翻译成蛋白质,措施是从转基因生物中提取蛋白质,用对应抗体进行抗原-抗体杂交。4.有时还需进行个体生物学水平鉴定。如转基因抗虫植物与否出现抗虫性状。(三)(b)基因工程应用1.植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,运用转基因改良植物品质。2.动物基因工程:提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。3.基因治疗:把正常外源基因导入病人体内,使该基因体现产物发挥作用。(四)(a)蛋白质工程概念蛋白质工程是指以蛋白质分子构造规律及其生物功能关系作为基本,通过基因修饰或基因合成,对既有蛋白质进行改造,或制造一种新蛋白质,以满足人类生产和生活需求。(基因工程在原则上只能生产自然界已存在蛋白质)(1)蛋白质工程崛起缘由:基因工程只能生产自然界已存在蛋白质(2)蛋白质工程基本原理:它可以根据人需求来设计蛋白质构造,又称为第二代基因工程。基本途径:从预期蛋白质功能出发,设计预期蛋白质构造,推测应有氨基酸序列,找到相对应脱氧核苷酸序列(基因)以上是蛋白质工程特有途径;如下按照基因工程一般环节进行。(注意:目基因只能用人工合成措施)设计中困难:怎样推测非编码区以及内含子脱氧核苷酸序列二、细胞工程(一)植物细胞工程1.理论基本(原理):细胞全能性2.植物组织培养技术(b)(1)过程:离体植物器官、组织或细胞―――→愈伤组织―――→试管苗――→植物体(2)用途:微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物工厂化生产。A植物繁殖微型繁殖:可以高效迅速地实现种苗大量繁殖作物脱毒:采用茎尖组织培养来除去病毒(由于植物分生区附近病毒很少或没有)人工种子:以植物组织培养得到胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,经人工薄膜包装得到种子。长处:完全保持优良品种遗传特性,不受季节限制;以便储备和运送B作物新品种培育单倍体育种:a过程:植株(AaBb)通过减数分裂得到花粉(AB、Ab、aB、ab四种类型);对花粉进行花药离体培养(技术是植物组织培养);得到单倍体植株;对其幼苗时期进行秋水仙素处理;得到了正常纯合二倍体植株(AABB、AAbb、aaBB、aabb四种类型)。b长处:明显缩短育种年限C突变体运用:在组织培养中会出现突变体,通过从有用突变体中选育出新品种(如筛选抗病、抗盐、含高蛋白突变体)D细胞产物生产:通过可以产生对人们有利产物细胞进行组织培养,从而让它们可以产生大量细胞产物。(3)地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种最终一道工序。②植物细胞A②植物细胞A植物细胞B杂种细胞愈伤组织杂种植株①③④⑤图(2)(1)过程:(2)诱导融合措施:物理法波及离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。(3)意义:克服了远缘杂交不亲和障碍。(二)动物细胞工程1.动物细胞培养(a)(1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出有关组织,将它分散成单个细胞,然后放在合适培养基中,让这些细胞生长和繁殖。(2)动物细胞培养流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。(3)细胞贴壁和接触克制:悬液中分散细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。细胞数目不停增多,当贴壁细胞分裂生长到表面互相克制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞接触克制。(4)动物细胞培养需要满足如下条件①无菌、无毒环境:培养液应进行无菌处理。一般还要在培养液中添加一定量抗生素,以防培养过程中污染。此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身导致危害。②营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。一般需加入血清、血浆等天然成分。③温度:合适温度:哺乳动物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4。④气体环境:95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必须,CO2重要作用是维持培养液pH。(5)动物细胞培养技术应用:制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究多种细胞。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植(比较轻易)和体细胞核移植(比较难)。(2)选用去核卵(母)细胞原因:卵(母)细胞比较大,轻易操作;卵(母)细胞细胞质多,营养丰富。(3)体细胞核移植大体过程是:高产奶牛(提供体细胞)进行细胞培养;同步采集卵母细胞,在体外培养到减二分裂中期卵母细胞,去核(显微操作)[注:为何要用卵细胞?它可以提供充足营养;操作简便;细胞质不会克制细胞核全能性体现];将供体细胞注入去核卵母细胞;通过电刺激使两细胞融合,供体核进入受体卵母细胞,构建重组胚胎;将胚胎移入受体(代孕)母牛体内;生出与供体奶牛遗传基因相似犊牛(4)体细胞核移植技术应用:①加速家畜遗传改良进程,增进良畜群繁育;②保护濒危物种,增大存活数量;③生产珍贵医用蛋白;④作为异种移植供体;⑤用于组织器官移植等。(5)体细胞核移植技术存在问题:克隆动物存在着健康问题、体现出遗传和生理缺陷等。3.动物细胞融合(1)动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多种动物细胞结合形成一种细胞过程。融合后形成具有本来两个或多种细胞遗传信息单核细胞,称为杂交细胞。(2)动物细胞融合与植物原生质体融合原理基本相似,诱导动物细胞融合措施与植物原生质体融合措施类似,常用诱导原因有聚乙二醇、灭活病毒、电刺激等。(3)动物细胞融合意义:克服了远缘杂交不亲和性,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育重要手段。(4)动物细胞融合与植物体细胞杂交比较:细胞工程植物体细胞杂交动物细胞融合理论基本细胞全能性、细胞膜流动性细胞增殖、细胞膜流动性融合前处理酶解法清除细胞壁(纤维素酶、果胶酶)注射特定抗原,免疫处理正常小鼠诱导手段物理法:离心、振动、电激化学法:聚乙二醇(PEG)物理法:离心、振动、电激化学法:聚乙二醇生物法:灭活病毒(灭活仙台病毒)诱导过程第一步:原生质体制备(酶解法)第二步:原生质体融合(物、化法)第三步:杂种细胞筛选和培养第四步:杂种植株诱导与鉴定正常小鼠免疫处理动物细胞融合(物、化、生法)杂交瘤细胞筛选与培养专一抗体检查阳性细胞培养单克隆抗体提纯用途和意义克服远缘杂交不亲和障碍,大大扩展杂交亲本组合范围应用:白菜-甘蓝等杂种植株制备单克隆抗体诊断、治疗、防止疾病,例如“生物导弹”治疗癌症4.单克隆抗体(1)抗体:一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出抗体产量低、纯度低、特异性差。(2)单克隆抗体制备过程:对免疫小鼠注射特定抗原蛋白(目使小鼠产生了效应B细胞);提取B淋巴细胞;同步用动物细胞培养措施培养骨髓瘤细胞并提取;促使它们细胞融合[注:融合成果是有诸多不符合规定;如有2个B淋巴细胞融合细胞等,因此要进行筛选];在特定选用培养基上筛选出融合杂种细胞[特点是能迅速大量增殖,又能产生专一抗体];然后对它进行克隆化培养和抗体检测[筛选出可以分泌所需抗体杂种细胞];最终将杂交瘤细胞在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖,从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量单克隆抗体。(3)杂交瘤细胞特点:既能大量繁殖,又能产生专一抗体。(4)单克隆抗体长处:特异性强,敏捷度高,并能大量制备。(5)单克隆抗体作用:作为诊断试剂:精确识别多种抗原物质细微差异,并跟一定抗原发生特异性结合,具有精确、高效、简易、迅速长处。用于治疗疾病和运载药物:重要用于治疗癌症治疗,可制成“生物导弹”,也有少许用于治疗其他疾病。三、胚胎工程(一)动物胚胎发育基本过程(1)精子发生:补充,精原细胞先进行有丝分裂后进行减数分裂;变形过程中,细胞核为精子头重要某些,高尔基体发育为顶体,中心体演变为精子尾,线粒体在尾基部形成线粒体鞘膜,其她物质浓缩为原生质滴直至脱落。[线粒体为精子运动提供能量](2)卵子发生:在胎儿时期,卵原细胞进行有丝分裂演变成初级卵母细胞[被卵泡细胞包围],减一分裂在排卵先后完毕,形成次级卵母细胞和第一极体进入输卵管准备受精;减二分裂是在受精过程中完毕。(3)受精:精子获能(在雌性动物生殖道内);卵子准备(排出卵子要在输卵管中深入成熟到减二中期才具有受精能力);受精阶段[卵子周围构造由外到内:放射冠、透明带、卵黄膜],a顶体反应:精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间物质,穿越放射冠。b透明带反应:顶体酶可将透明带溶出孔道,精子穿入,在精子触及卵黄膜瞬间制止后来精子进入透明带生理反应[它是防止多精子入卵受精第一道屏障];c卵黄膜封闭作用:精子外膜和卵黄膜融合,精子入卵后,卵黄膜会拒绝其她精子再进入卵内过程[它是防止多精子入卵受精第二道屏障];精子尾部脱落,原有核膜破裂形成雄原核,同步卵子完毕减二分裂,形成雌原核[注意:受精标志是第二极体形成;受精完毕标志是雌雄原核融合成合子]。(4)胚胎发育:a卵裂期:细胞进行有丝分裂,数量增长,胚胎总体积不增长;b桑椹胚:32个细胞左右胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎潜能属全能细胞];c囊胚:细胞开始分化,其中个体较大细胞叫内细胞团未来发育成胎儿多种组织;而滋养层细胞未来发育成胎膜和胎盘;胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注:囊胚扩大会导致透明带破裂,胚胎伸展出来,这一过程叫孵化];d原肠胚:内细胞团表层形成外胚层,下方细胞形成内胚层,由内胚层包围囊腔叫原肠腔。[细胞分化在胚胎期到达最大程度]9胚胎工程理论基本(识记)(1)胚胎工程概念及技术手段:对动物初期胚胎或配子所进行多种显微操作和处理技术,如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。(2)体外受精[属有性生殖过程]:a卵母细胞采集和培养对体型小动物用促性腺激素处理,从输卵管冲取卵子(可直接受精);对体型大动物从卵巢中采集卵母细胞(要在体外培养成熟)b精子采集假阴道法、手握法和电刺激法;获能对啮齿动物、兔、猪等精子用培养法(放入人工配制获能液中);对牛、羊等精子用化学法(放在肝素或钙离子载体溶液中)(3)胚胎初期培养:a培养液成分:无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等[注意与动物细胞培养液成分比较];b当胚胎发育到合适阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保留。(4)胚胎移植:a概念:将雌性动物初期胚胎移植到同种、生理状态相似其她雌性动物体内,使之继续发育为新个体技术。是生产胚胎供体和孕育胚胎受体共同繁殖后裔过程,通过转基因、核移植、体外受精获得胚胎必要移植给受体才能获得后裔。b优势:可以充足发挥雌性优良个体繁殖潜力,缩短供体自身繁殖周期。c胚胎移植生理学基本:同种动物供、受体生殖器官生理变化是相似[对供体和受体进行同期发情处理];初期胚胎形成后处在游离状态,为胚胎搜集提供也许;受体对移入子宫外来胚胎基本不发生免疫排斥反应;移入受体供体胚胎遗传特性在孕育过程中不受影响。d胚胎移植程序:对供、受体母牛进行选用,用激素进行同期发情处理;对供体母牛用激素做超数排卵处理;选用同种先进公牛配种[有性生殖过程];对胚胎进行搜集[此时胚胎处在游离状态];对胚胎进行质量检查[此时胚胎应发育到桑椹胚或囊胚];胚胎移植[或冷冻保留];检查受体母牛与否受孕;产下胚胎移植犊牛。(5)胚胎分割:a概念:用机械措施将初期胚胎切割成2、4、8等分等,经移植获得同卵双胎或多胎技术[可看作是动物无性繁殖或克隆]b基本过程:选用良好桑椹胚或囊胚移入培养皿中,用分割针或分割刀片将其切开,吸出其中半个胚胎注入透明带中或直接移植给受体。[注意:内细胞团要均等分割,否则会影响胚胎恢复和深入发育]10胚胎干细胞移植(识记)(1)胚胎干细胞含义:由初期胚胎[囊胚]或原始性腺[胎儿]中分离出来一类细胞,又叫ES或EK细胞。(2)特性:形态上体积小、细胞核大、核仁明显;功能上具有发育全能性,即可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。[体外培养下,ES细胞可以只增殖不分化](3)应用:用于治疗人类疾病,如运用ES细胞诱导其分化成新组织细胞特性,移植ES细胞可使坏死或退化部位得以修复。1、胚胎工程是指对动物初期胚胎或配子所进行多种显微操作和处理技术,如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。通过处理后获得胚胎,还需移植到雌性动物体内生产后裔,以满足人类多种需求。2、动物胚胎发育基本过程(1)受精场所是母体输卵管。(2)卵裂期:特点:细胞有丝分裂,细胞数量不停增长,但胚胎总体体积并不增长,或略有减小。(3)桑椹胚:特点:胚胎细胞数目到达32个左右时,胚胎形成致密细胞团,形似桑椹。是全能细胞。(4)囊胚:特点:细胞开始出现分化(该时期细胞全能性仍比较高)。汇集在胚胎一端个体较大细胞称为内细胞团,未来发育成胎儿多种组织。中间空腔称为囊胚腔。(5)原肠胚:特点:有了三胚层分化,具有囊胚腔和原肠腔。(二)胚胎干细胞1、哺乳动物胚胎干细胞简称ES或EK细胞,来源于初期胚胎或从原始性腺中分离出来。2、具有胚胎细胞特性,在形态上体现为体积小,细胞核大,核仁明显;在功能上,具有发育全能性,可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。此外,在体外培养条件下,可以增殖而不发生分化,可进行冷冻保留,也可进行遗传改造。3、胚胎干细胞重要用途是:①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律;②是在体外条件下研究细胞分化理想材料,在培养液中加入分化诱导因子,如牛黄酸等化学物质时,就可以诱导ES细胞向不一样类型组织细胞分化,这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效手段;③可以用于治疗人类某些顽疾,如帕金森综合症、少年糖尿病等;④运用可以被诱导分化形成新组织细胞特性,移植ES细胞可使坏死或退化部位得以修复并恢复正常功能;⑤伴随组织工程技术发展,通过ES细胞体外诱导分化,定向培育出人造组织器官,用于器官移植,处理供体器官局限性和器官移植后免疫排斥问题。(三)胚胎工程应用1.体外受精和胚胎初期培养(1)卵母细胞采集和培养:重要措施:用促性腺激素处理,使其排出更多卵子,然后,从输卵管中冲取卵子,直接与获能精子在体外受精。第二种措施:从刚屠宰母畜卵巢中采集卵母细胞;第三种措施是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物卵巢中吸取卵母细胞。采集卵母细胞,都要在体外经人工培养成熟后,才能与获能精子受精。(2)精子采集和获能:在体外受精前,要对精子进行获能处理。(3)受精:获能精子和培养成熟卵细胞在获能溶液或专用受精溶液中完毕受精过程。(4)胚胎初期培养:精子与卵子在体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养,以检查受精状况和受精卵发育能力。培养液成分较复杂,除某些无机盐和有机盐外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清等物质。当胚胎发育到合适阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保留。不一样动物胚胎移植时间不一样。(牛、羊一般要培育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行移植,小鼠、家兔等试验动物可在更早阶段移植,人体外受精胚胎可在4个细胞阶段移植。)2.胚胎移植(1)胚胎移植是指将雌性动物初期胚胎,或者通过体外受精及其他方式得到胚胎,移植到同种、生理状态相似其他雌性动物体内,使之继续发育为新个体技术。其中提供胚胎个体称为“供体”,接受胚胎个体称为“受体”。(供体为优良品种,作为受体雌性动物应为常用或存量大品种。)地位:如转基因、核移植,或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产胚胎,都必要通过胚胎移植技术才能获得后裔,是胚胎工程最终一道“工序”。(2)胚胎移植意义:大大缩短了供体自身繁殖周期,充足发挥雌性优良个体繁殖能力。(3)生理学基本:①动物发情排卵后,同种动物供、受体生殖器官生理变化是相似。这就为供体胚胎移入受体提供了相似生理环境。②初期胚胎在一定期间内处在游离状态。这就为胚胎搜集提供了也许。③受体对移入子宫外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体存活提供了也许。④供体胚胎可与受体子宫建立正常生理和组织联络,但供体胚胎遗传特性在孕育过程中不受影响。(4)基本程序重要波及:①对供、受体选用和处理。选用遗传特性和生产性能先进供体,有健康体质和正常繁殖能力受体,供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理,用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎搜集、检查、培养或保留。配种或输精后第7天,用特制冲卵装置,把供体母牛子宫内胚胎冲
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