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PolymerasechainreactionprinciplePCR原理微课名称：PCR技术课程名称：生物化学与生物制药技术主讲：肖怀秋所属单位：制药与生物工程系PCR步骤PolymerasechainreactionproceduresPCR应用与知识拓展Polymerasechainreactionapplicationsandexpendedknowledge第1页PCR应用背景案例第2页PCR定义PCR，其英文全称是polymerasechainreaction，即聚合酶链式反应，为DNA体外扩增技术，是模拟DNA在体内复制过程，用于放大扩增特定DNA片段。PCR原理第3页PCR步骤1变性：双链DNA在94℃变性为单链.2退火：反应体系温度降至50–65℃，维持20–40s。3延伸：DNA聚合酶基于模板DNA链碱基序列合成一条互补DNA链，延伸时间取决于DNA聚合酶和DNA所需扩增片段长度。第4页PCR示意图PCR扩增以2n级扩增。230=1.07×109（十亿）225=3.4×107（百万）220=1.05×107（百万）第5页3PCR应用（1)遗传病产前诊疗用胎儿羊膜细胞，羊水或怀孕母体血液样本可检验胎儿性别及诊疗与性染色体关联遗传病。一些高发性遗传病，如地中海贫血病、镰刀形细胞贫血病、凝血因子缺乏病等均可经过PCR技术进行确诊。糖尿病、高血脂症等老年性疾病以及部分肿瘤也能够经过PCR进行检验。第6页3PCR应用

(2)致病病原体检测当前包含细菌、病毒、原虫及寄生虫、霉菌、立克次体、衣原体和支原体等大部分致病病原体均可经过PCR进行检测。可做单元或多元致病病原体检测，且检测灵敏度和特异性远高于传统免疫法，对难于培养病毒（如乙肝病毒），细菌（如结核杆菌）和原虫（如梅毒螺旋体）等更为适合。第7页3PCR应用（3）癌基因检测和诊疗当前，临床上已将PCR技术应用于白血病残留细胞定量（包含慢粒和急粒），肺癌中P53及Rb等抗癌基因失活，神经质瘤N-myc基因激活和表示等方面。第8页3PCR应用（4）法医学检验如肌红蛋白小卫星基因，β-珠蛋白基因、ApoB基因等多肽性和重复次数差异都被应用于法医检验和案情分析与判定，其灵敏度已到达一根头发、一个细胞、一个精子取得个体DNA特征物理图谱。第9页3PCR应用（5）动植物检疫经过PCR技术可检验进出口岸人员、动、植物（种畜、种籽）等是否携带烈性传染病（如HIV、动物病毒、植物病毒等）等致病病原体以及检验食品或饲料等是否携带沙门氏菌等。第10页3PCR应用（6）基因工程中应用如在转基因动植物中检验植入基因是否存在。PCR还可应用于基因拼接、测序等领域。第11页4知识拓展维基百科:Polymerasechainreaction

/wiki/Polymerase_chain_reactionbaidu百科：聚合酶链式反应

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1.PCR操作技术视频

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