低剂量纳洛酮对氯胺酮抗罗哌卡因致惊厥作用的影响

低剂量纳洛酮对氯胺酮抗罗哌卡因致惊厥作用的影响

罗依卡因是一种新型的长期酰胺引起的麻醉剂，具有麻醉和镇痛作用。与kane相比，它具有低毒性。尽管如此,也无法避免临床上罗哌卡因中毒事件的意外发生。有文献报道氯胺酮和纳洛酮都有抗惊厥作用。我们课题组研究发现低剂量纳洛酮能增强氯胺酮的镇痛作用,但低剂量纳洛酮能否增强氯胺酮的抗惊厥作用尚鲜有报道。本实验旨在观察低剂量纳洛酮对氯胺酮抗罗哌卡因致惊厥作用的影响。1数据和方法1.1实验动物及环境昆明种小鼠150只(徐州医学院实验动物中心提供,雌雄均可,21～25g),在实验前一天让其熟悉环境,自由取食,第2天下午2:00开始试验。1.2盐酸纳洛酮注射液甲磺酸罗哌卡因注射液,规格:每支89.4mg/10mL,批号0706030,海南斯达制药有限公司生产。盐酸纳洛酮注射液,规格:每支0.4mg/mL,批号20071105,北京凯因生物技术有限公司生产。盐酸氯胺酮注射液,规格:每支0.1g/2mL,批号KH071001,江苏省恒瑞股份有限公司生产。将药品配成相应浓度,均按0.1mL/10g注射。1.3组和方法1.3.1罗哌卡因致惊厥的ed50组1小鼠30只随机分成NS组(生理盐水组)和氯胺酮组,每组15只,分别以序贯法测定预先皮下注射生理盐水或氯胺酮的各组罗哌卡因致惊厥的ED50。将浓度为89.4mg/10mL罗哌卡因按1:0.8比例配制成不同浓度的等比溶液,即等比剂量分别为89.4、71.52、57.22、45.77和36.62mg/kg。从最大剂量开始序贯给药,先皮下注射氯胺酮,5min后腹腔注射罗哌卡因,分别计算氯胺酮组和NS组的罗哌卡因致惊厥ED501.3.2量表1:不同四亚组亚组5.10和20.20g/l组2小鼠40只随机分为NS组及KT1、KT2和KT3组(氯胺酮剂量分别为5、10和20mg/kg)四亚组,每组各10只。先皮下注射生理盐水或氯胺酮,5min后腹腔注射罗哌卡因(85.9mg/kg),分别记录每只小鼠惊厥次数、惊厥持续时间以及死亡情况。1.3.3酮用量的确定组3小鼠40只随机分为NS组及NL1、NL2和NL3组(纳洛酮剂量分别为1、10和100ng/kg)四亚组,每组各10只。先皮下注射生理盐水或纳洛酮,5min后腹腔注射罗哌卡因(85.9mg/kg),观察纳洛酮对罗哌卡因致惊厥作用的影响。1.3.4纳洛酮和nl+kt组组4小鼠40只随机均分为NS组、NL组(纳洛酮10ng/kg)、KT组(氯胺酮10mg/kg)和NL+KT组(纳洛酮10ng/kg与氯胺酮10mg/kg合用)四亚组,每组各10只。前三组按方法1.3.2步骤操作。第四组先皮下注射纳洛酮,5min后皮下注射氯胺酮,再过5min腹腔注射罗哌卡因。罗哌卡因均为85.9mg/kg,观察纳洛酮与氯胺酮配伍对罗哌卡因致惊厥作用的影响。1.4肢体阵发性肌动学小鼠惊厥评价指标:动物兴奋性明显增高,活动增强,跳跃,奔跑,因肢体阵发性痉挛体位不能平衡而倒地。惊厥持续时间以惊厥开始致肌张力下降并能自主活动的时间计。1.5组患者治疗前后血压变异性检验采用SPSS13.0进行数据处理和分析。罗哌卡因致小鼠惊厥ED50的比较采用t检验;对惊厥持续时间和惊厥次数用表示;将计量数据进行秩变换后,组间比较采用单因素方差分析,多组之间比较采用q检验;死亡数和惊厥数用似然比X2检验,以P<0.05判断为有统计学意义。2结果2.1罗哌卡因致惊厥罗哌卡因致小鼠惊厥ED50及加用氯胺酮的ED50见表1。与NS组相比,氯胺酮组罗哌卡因致惊厥剂量明显提高,两组ED50差异有统计学意义(P<0.05),说明氯胺酮有抗罗哌卡因致小鼠惊厥的作用。2.2组小鼠ld-ns的ld-pcr检测氯胺酮对罗哌卡因致惊厥作用的影响试验结果见表2。KT3组惊厥持续时间、惊厥次数和惊厥数与NS组相比均差别显著(P<0.05),小鼠死亡数组间比较无差别(P=0.890)。20mg/kg氯胺酮不仅能减少惊厥的持续时间和惊厥次数,还能降低惊厥的发生率,抗惊厥效果明显。2.3纳洛酮对罗哌卡因致惊厥作用的影响纳洛酮对罗哌卡因致惊厥作用的影响研究结果见表3。各组间惊厥持续时间、惊厥次数、死亡数和惊厥数均未见显著差异(P>0.05),提示纳洛酮对罗哌卡因致惊厥作用无影响。2.4纳洛酮对氯胺酮致惊厥作用的影响试验结果见表4。将数据进行秩变换后进行检验,惊厥持续时间、惊厥次数、惊厥数和死亡数组间均未见显著差异(P>0.05),纳洛酮对氯胺酮抗罗哌卡因致惊厥作用无影响。3纳洛酮和氯胺酮联用对惊厥发生的影响本实验表明氯胺酮能提高罗哌卡因致惊厥的阈值,即氯胺酮有抗罗哌卡因致惊厥的作用。有文献报道,氯胺酮为非竞争性NMDA受体阻断剂,其抗惊厥作用与阻断NMDA受体浓度极度相近。还有试验证明这种抗惊厥作用可能与GABA-苯二氮受体有关,故推测氯胺酮的抗惊厥作用可能与NMDA和GABA系统有关。本研究表明,低剂量纳洛酮无抗罗哌卡因的致惊厥作用。但有文献报道,内阿片肽在调节惊厥发作中起致惊厥和抗惊厥的双重作用,而这种双重作用都可被预先给予阿片受体阻断剂纳洛酮所阻断。其可能机制为纳洛酮影响内阿片肽改变GABA能神经元活动,进而产生对惊厥发作的调节。无论是氯胺酮的抗惊厥作用还是纳洛酮对惊厥发作的调节,其可能的机制都与GABA系统有关。卓九五等已证实低剂量纳洛酮能增强氯胺酮的镇痛作用,纳洛酮和氯胺酮配伍对惊厥发生的影响值得关注。如果两者伍用能增强氯胺酮的抗惊厥作用,一则进一步证明了GABA系统对惊厥发生起作用,二则可以指导临床的麻醉用药,从而减少惊厥的发生。如果两者合用能降低氯胺酮的抗惊厥作用,那么临床增强镇痛作用时,纳洛酮和氯胺酮的合用就要谨慎了。再者就是两者合用对惊厥的发作无影响。本研究中NL+KT组与NS组和KT组比较,惊厥持续时间、惊厥次数、死亡数和惊厥数均无显著差异(P>0.05),说明低剂量纳洛酮对氯胺酮抗罗哌卡因致小鼠惊厥无影响。笔者认为本试验结果可能与下面几点原因有关:(1)氯胺酮的抗惊厥作用与GABA系统有关以及纳洛酮对惊厥发生的双重调节通过GABA系统完成这两个结论可能至少有一个是错误的;(2)纳洛酮的剂量偏低。纳洛酮阻断阿片肽对惊厥发作的双重作用所需剂量为10～40mg/kg,要想达到一个既能增强氯胺酮的镇痛作用,又能增强其抗惊厥作用的剂量需要继续摸索;(3)罗哌卡因的致惊厥作用既与NMDA受体无关,也与GABA系统无关,而恰恰氯胺酮能通过某种途径抑制这种机制的发生。遗憾的是这种机制目前还没有被发现和证实。虽然本实验得到阴性结果,但至少证明了一点:低剂量纳洛酮在氯胺酮抗罗哌卡因致惊厥方面是无效的。继续探索如何增强氯胺酮抗惊厥作用,可能还应从纳洛酮的剂量或罗哌卡因致惊厥的发生机制上着手。本试验考虑到小鼠的个体差异和氯胺酮令人满意的抗惊厥效果(方法1.3.2中KT3组有8只小鼠未出现惊厥),故各组之