药用植物组培快繁操作技术-无菌操作技术

知识目标：●掌握培养基的组成成分●掌握常用基本培养基的特点●掌握培养基的使用原则技能目标：

●掌握培养基配制技术●掌握培养基灭菌条件学习任务1培养基

人工配制的用于植物组织、细胞生长、繁殖和代谢产物生成所需的各种营养物质的混合物。培养基的概念一、培养基的成分培养基组成无机营养物有机营养物植物生长调节剂碳水化合物附加物水培养体的支持材料在培养基的各成分中，植物生长调节剂是培养基的关键物质，对植物组织培养起着决定性作用。常用的植物生长调节剂有细胞分裂素和生长素两大类。植物生长调节剂1.生长素类（1）种类：IAA，NAA，IBA，2,4－D（2）作用：①诱导愈伤组织形成②根的形成③低浓度下和细胞分裂素配合促进芽的形成和增殖2.赤霉素（GAn）

（1）种类：GA3（2）作用：促茎伸长，一般在器官形成后加入。

(3)稳定性和溶解性：不耐热，采用过滤灭菌法添加到培养基中。3.细胞分裂素类（1）种类：6-BA，Kt，Zt（2）作用：①抑制顶端优势，促进侧芽的生长；②诱导不定芽分化；③促进芽、苗增殖。1.活性炭作用：1.促进生根；2.吸附有害物质，减轻褐变和玻璃化苗的现象。用量：0.5～5g/L2.抗生素链霉素用量：5～20mg/L。作用：防污染，减少材料损失注意：抗生素对组织生长有抑制作用，使用要慎重。青霉素庆大霉素

抗氧化物2.用量：50～200mg/L3.作用：防止氧化褐变注意：可用抗氧化剂洗涤外植体伤口表面。1.常用抗氧化剂：半胱氨酸、PVP、VC二培养基的种类1.根据形态液体培养基固体培养基1.根据形态二培养基的种类生根培养基2.根据作用诱导培养基增殖培养基基本培养基三培养基的配方培养基的配方表达形式：MS+糖3%（30g/L）

+琼脂4%（4g/L）MS+6-BA2.0mg/L+糖3%+琼脂4%B5+6-BA2.0mg/L+糖3%+琼脂4%N6+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+糖3%MS+NAA0.5mg/L+糖3%+琼脂4%White+NAA0.5mg/L+糖2%+琼脂4%2023/9/129:4015培养条件环境条件化学条件渗透压pH气体光温度湿度培养条件（一）温度

温度是植物组织培养成功的重要因素，大多数植物组织培养都是在23～27℃之间进行。※温度的作用1、影响试管苗的生长速度2、影响器官形成和增殖2023/9/129:4016环境条件★百合鳞片在30℃时小鳞茎的发叶速度比在25℃以下的高●培养蝴蝶兰花梗时，30℃左右萌发出腋芽，22℃萌发出花芽，从营养生长转为生殖生长2023/9/129:4017环境条件（二）光照

主要表现在光强、光周期方面1、光照强度光照强度较强，幼苗生长粗壮；而光照强度较弱，幼苗生长细弱，容易徒长。光照强度一般为1000～5000Lx。2、光周期

一般是10～12h的光照，14～12h的黑暗。思考：光的作用是什么？促进器官的形成和生长2023/9/129:4018环境条件（三）湿度

湿度的影响包括培养容器内和环境的湿度条件。1、培养容器内的相对湿度通常在95%以上。2、环境的相对湿度一般要求70％～80％。2023/9/129:4019化学条件（一）渗透压培养基中由于有添加的盐类、蔗糖等化合物，影响到渗透压的变化。思考：影响培养基渗透压的主要因子是什么？※糖的作用：提供能量和维持培养基的渗透压。2023/9/129:4020化学条件（二）pH值植物对培养基最适pH值的要求不同，大多在5.8～6.0左右。pH值对培养基的影响：pH值＞6.4培养基变硬pH值＜5.6培养基变软※

灭菌后的培养基其pH值会下降0.2个单位2023/9/129:4021化学条件（三）气体解决