鸡球虫病的药物敏感性试验

鸡球虫病的药物敏感性试验

目前，主要的药物防治手段仍然是控制鸡球虫病。由于抗球虫药使用量大、使用面积广、应用期较长,至今为止,球虫对几乎所有的药物都能产生抗药性,且往往表现多重抗药和交叉抗药。为此,我们进行球虫病治疗药物的敏感性试验,以期为临床上合理选用治疗性抗球虫药提供依据。1材料和方法1.1试验卵囊从山东省临沂地区发生球虫病的鸡场采集带血鸡粪,从中分离、纯化出柔嫩艾美耳球虫卵囊,经鸡体繁殖、复壮、孢子化后4℃保存备用。1.2无球虫饲料的制备1日龄科宝50肉鸡200只,饲养于严格消毒的笼舍中,饲喂不添加任何抗生素的全价饲料,在无球虫环境下育雏至14日龄备用。试验前粪检无球虫方可试验。1.3复方酰胺氯吡嗪钠及酰胺羟基羟基类溶液5%妥曲珠利溶液、1.5%癸氧喹酯溶液、复方磺胺氯吡嗪钠溶液(含磺胺氯吡嗪钠15%及增效剂)、复方磺胺喹恶啉钠溶液(含磺胺喹恶啉钠10%及增效剂)均由康地恩药业研制。1.4供试卵囊的给药方案将养至14日龄无球虫公雏称重,淘汰偏重与偏轻鸡只,随机分成6组,每组30只鸡。除不感染不给药外,每只鸡经口感染上述供试卵囊10万个,具体给药方案见表1。感染后每天观察鸡只的采食健康情况,攻虫后第8天,鸡只称重、剖杀、取盲肠,观察盲肠病变,计算抗球虫指数(Anticoccidialindex,ACI)。1.5临床疗效判定标准参照美国默克公司发表的方法测定下列指标:存活率、相对增重率、病变值、血便记分、卵囊值及ACI。相对增重率=感染投药组平均增重/不感染不投药组平均增重×100%;病变记分:参照Johnson等标准剖检察盲肠病变,按4分制进行病变记分;病变值=病变记分×10;血便记分:感染后第5天,观察各组鸡24h内排出的粪便,按5级记分制进行血便记分;ACI=(相对增重率+存活率)-(病变值+卵囊值)。抗球虫药效力评价标准:ACI>180,为高效抗球虫药;ACI为160~180,为中效抗球虫药;ACI为120~160,为低效抗球虫药;ACI<120,高度耐药,为无效抗球虫药。2结果2.1胺喹恶啉钠溶液及不感染不给药组的比较由表3可见,试验结束时,感染不给药组平均增重显著低于其它各组(P<0.05);复方磺胺喹恶啉钠溶液组平均增重与其它各组差异显著(P<0.05);妥曲珠利溶液组、癸氧喹酯溶液、复方磺胺氯吡嗪钠与不感染不给药组差异不显著(P>0.05)。饲料报酬方面:与不感染不给药组相比,癸氧喹酯溶液差异不显著(P>0.05),其它各组差异显著(P<0.05)。2.2血便感染不给药组感染不给药组感染后第4天开始出现血便,用药组也不同程度地出现血便。感染后4~7d内,不感染不给药组没有出现血便;感染不给药组血便每天都在增加,每天的血便都多于用药组。癸氧喹酯溶液组未出现血便。盲肠病变感染不给药组、妥曲珠利溶液组病变严重,差异不显著(P<0.05);癸氧喹酯溶液组、复方磺胺氯吡嗪钠溶液组、复方磺胺喹恶啉钠组病变较轻,与不感染不给药组差异不显著(P>0.05)。结果见表3。2.3感染不给药组感染后第5天,部分组的部分鸡经剖检证实因球虫病死亡。其中,感染不给药组9只,妥曲珠利溶液组5只,复方磺胺氯吡嗪钠组2只,复方磺胺喹恶啉钠组死亡2只。癸氧喹酯溶液组没有鸡只死亡。2.4复方酰胺氯吡嗪钠检测由表3可知,癸氧喹酯溶液的抗球虫指数最高为201.1,其次复方磺胺氯吡嗪钠溶液ACI为181,均为高效抗球虫药;复方磺胺喹恶啉钠组ACI为170.8,为中效抗球虫药;妥曲珠利溶液组ACI仅为137,属低效抗球虫药。3治疗大鼠血便病所需资源中妥曲珠利为三嗪类抗球虫药,作用于所有艾美耳球虫在机体细胞内的各个发育阶段。据报道,妥曲珠利10mg/L、12.5mg/L、25mg/L饮水给药,抗球虫指数均高于180。但本次试验所采用的山东临沂株,妥曲珠利溶液抗球虫指数仅为137,对球虫感染鸡的保护效果不理想,已经产生耐药性。癸氧喹酯是一种非常有效的喹诺酮类抗球虫药,主要通过在初期阶段抑制子孢子发育,中期阶段杀灭早期裂殖体而发挥作用。索勋等用癸氧喹酯预混剂20mg/kg、30mg/kg、40mg/kg预防给药,ACI均大于180,鸡群粪便和盲肠内容物中均未检到卵囊,属高效抗球虫药。本试验用癸氧喹酯溶液15mg/L饮水给药,整个试验过程未观察到血便,剖检盲肠正常,内容物未检到虫卵,且增重效果明显,ACI高达201.3,抗球虫活性高。磺胺类抗球虫药作用机理主要是干扰球虫叶酸代谢而抑制其生长繁殖。磺胺喹恶啉钠主要作用于球虫活性峰期第二代裂殖体,对巨型、布氏和堆型艾美耳球虫有较强的抑制作用,对雏鸡有一定的毒性。磺胺氯吡嗪钠对家禽球虫的作用特点与磺胺喹恶啉相似,但抗菌作用更强,毒性较磺胺喹恶啉低。本试验中,复方磺胺氯吡嗪钠溶液在出现血便后给药,ACI为181,为高效抗球虫药,治疗效果显著;复方磺胺喹恶啉钠溶液对感染鸡的增重影响比较大,ACI为170.8,属中效抗球虫药。磺胺氯吡嗪钠主要作用于盲肠球虫,而磺胺喹恶啉钠主要作用于小肠球虫,因而结果有所差异。由本试验结果得知,妥曲珠利由于广泛应用,已产生一定耐药性,用于球虫病的治疗时应慎用。磺胺类抗球虫药治疗球虫病效果依然明显,但对感染