中药提取分离和纯化专家讲座

主要内容第一节中药化学成份提取方法第二节中药化学成份分离方法第三节中药化学成份结构研究介绍中药提取分离和纯化专家讲座第1页第一节中药化学成份提取方法提取前准备工作：基源、产地、药用部位、采集时间与方法考查及文件调研；提取前预处理：粉碎、脱脂、酶灭活；提取方法：溶剂提取法、水蒸汽蒸馏法及升华中药提取分离和纯化专家讲座第2页一、溶剂提取法

（一）基本原理（二）溶剂选择（三）溶剂提取方法中药提取分离和纯化专家讲座第3页（一）溶剂提取法原理渗透扩散中药提取分离和纯化专家讲座第4页（二）溶剂选择

溶剂提取法关键是选择适当溶剂，一个好溶剂应对所提取成份有较大溶解度，而对共存杂质溶解度很小。良好溶剂选择应遵照“相同相溶”原理。

普通说来，只要溶剂极性与化学成份极性相同，化学成份就易被溶解。溶剂极性与介电常数ε相关，溶剂ε值越大，极性越大。一些惯用溶剂

中药提取分离和纯化专家讲座第5页中药提取分离和纯化专家讲座第6页一些常见溶剂亲水性或亲脂性强弱次序中药提取分离和纯化专家讲座第7页中药提取分离和纯化专家讲座第8页中药提取分离和纯化专家讲座第9页溶剂分类

——按照极性大小和溶解性能

1、水2、亲水性有机溶剂

3、亲脂性有机溶剂中药提取分离和纯化专家讲座第10页1、水强极性溶剂，对药材细胞穿透力大，中药中亲水性成份，如无机盐、有机酸盐、生物碱盐、糖类、苷类、鞣质、氨基酸、蛋白质等都能被水提出。水作为提取溶剂有安全、经济、廉价易得等优点，缺点是水 提取液（有其是含糖或蛋白质）易霉变，难以保留，而且不易浓缩和过滤。

中药提取分离和纯化专家讲座第11页(2)亲水性有机溶剂

包含甲醇、乙醇和丙酮；

这类有机溶剂含有较大极性，与水可任意混溶；

乙醇对中药材细胞不但有较强穿透力，而且对许多成份溶解性能好，价廉，回收方便，所以是提取中药成份最惯用溶剂。中药提取分离和纯化专家讲座第12页(3)亲脂性有机溶剂

包含石油醚、苯、乙醚、氯仿、乙酸乙酯等。这是一类与水不能任意混溶有机溶剂，对非极性成份溶解选择性较强。天然药品中挥发油、油脂、叶绿素、树脂、游离生物碱及一些苷元均可被这类溶剂提出。这类溶剂沸点低、浓缩回收方便，但易燃、有毒、价高，对设备要求高，穿透药材组织能力较差，故应用这类提取溶剂有一定不足。中药提取分离和纯化专家讲座第13页中药提取分离和纯化专家讲座第14页2.提取方法

(１)浸渍法

(２)渗漉法

(３)煎煮法

(４)回流提取法

(５)连续回流提取法

(６)超声提取法中药提取分离和纯化专家讲座第15页（１）浸渍法

又称冷浸法，适合用于遇热易破坏成份以及含大量淀粉、树胶、果胶、黏液质等多糖成份药材，多用水、乙醇作溶剂。但本法提取时间长，效率不高，尤其是在用水作溶剂浸渍时，提取液易发霉变质，必要时可加适量防腐剂。中药提取分离和纯化专家讲座第16页

(2)渗漉法

该法适合用于以水、稀醇为溶剂。用低沸点易挥发溶剂提取，不宜用此法。因在室温下进行，故尤其适合用于遇热易破坏成份提取。本法在渗滤过程中，不停加人新溶剂，与渗滤液一直保持相当浓度差，故提取效率比浸渍法高。但存在溶剂用量大、费时较长缺点。中药提取分离和纯化专家讲座第17页(3)煎煮法

本法属热浸渍法，提取效率比冷浸法高。但含挥发性成份及遇热不稳定成份提取不宜用此法。含多糖类成份药材煎煮后，药液黏稠，过滤较困难。此法仅适合用于水作溶剂提取中药提取分离和纯化专家讲座第18页（４）回流提取法

本法适合用于有机溶剂提取，提取效率与煎煮法相同。

对热不稳成份提取不宜用此法中药提取分离和纯化专家讲座第19页

(5)连续回流提取法—索氏提取法

应用挥发性有机溶剂提取天然药品中有效成份较多采取该法。本法仅需少许溶剂就能使有效成份提取完全，提取效率高。但提取液受热时间长，普通需4～10小时。中药提取分离和纯化专家讲座第20页(6)超声提取法

利用超声波强烈振动能传递巨大能量给浸提药材和溶剂，从而破坏植物药材细胞，加强胞内物质释放、扩散和溶解，加速有效成份浸出。该方法含有提取时间短、提取效率高、无须加热等优点，但此法对容器壁厚薄及放置要求较高。当前尚为试验室小规模使用。中药提取分离和纯化专家讲座第21页中药提取分离和纯化专家讲座第22页3、影响溶剂提取效率原因

（1）药材粉碎度；

（2）湿度；

（3）浓度差；

（4）时间；

（5）溶剂；其中选择适当溶剂是提取关键，溶剂选择主要从溶解度方面考虑，同时要注意到溶剂易回收、安全低毒、价廉等原因。中药提取分离和纯化专家讲座第23页增溶与助溶

因为在中药提取液中，存在着复杂混合物，各成份相互影响，有时会产生增溶现象，增大了欲提取成份溶解度。但有时又可能相互生成难溶性化合物，改变了欲提取成份溶解性能而提取不出。中药提取分离和纯化专家讲座第24页增溶助溶现象举例

（1）已知含生物碱中药与甘草配伍，生物碱与甘草酸产生沉淀，生物碱可能提取不出来。（2）黄连等中小檗碱与黄芩苷产生沉淀，生物碱与银花中绿原酸发生沉淀，大黄鞣质与栀子、茵陈之间也有沉淀产生。

（3）有成份因其它成份存在，溶解度有较大改变，如油脂类杂质存在能够使不溶于石油醚香豆素溶解，含麻黄方剂中如有葛根则麻黄碱含量增加等等。中药提取分离和纯化专家讲座第25页增溶助溶现象原因（1）中药中含有一些能表面活性物质，如皂苷、树胶、蛋白质等。（2）中药汤剂属于胶体溶液，由许多难溶物质分子组成微粒混悬于介质中成为溶胶或粗分散体系，也是使物质在溶液中含量增加一个主要原因。中药提取分离和纯化专家讲座第26页

(二)水蒸气蒸馏法

水蒸气蒸馏法适合用于能随水蒸气馏出而不被破坏天然药品成份提取。中草药中挥发油、一些小分子生物碱、小分子酚性物质等都可采取本法提取。中药提取分离和纯化专家讲座第27页(三)升华法

有些固体物质在低于其熔点温度下加热，不经过中间液体阶段，直接转化为蒸气，蒸气遇冷又凝结为原来固体，这种现象称为升华。天然药品中含有升华性成份如咖啡碱、樟脑等，其提取可用升华法。中药提取分离和纯化专家讲座第28页二、有效成份分离和精制

用各种方法得到提取物是包含很多成份混合物，要想得到所需成份或单体化合物，须经重复分离精制。提取液普通体积较大，所含成份浓度较低，所以须对提取液经过蒸发或蒸馏进行浓缩，进行深入分离和精巧。

中药提取分离和纯化专家讲座第29页

(一)系统溶剂分离法

(二)两相溶剂萃取法

(三)沉淀法

(四)吸附法

(五)盐析法

(六)透析法

(七)分馏法

(八)超临界流体萃取技术

（八）结晶

（九）色谱法分离和精制方法中药提取分离和纯化专家讲座第30页(一)系统溶剂分离法

此法普通是选取3-7种不一样极性溶剂，由低极性至高极性分步对总提取物进行提取分离。使总提取物中各组分，依其在不一样极性溶剂中溶解度差异而得以分离。本法操作较为复杂，对微量成份、结构性质相同成份分离精制有很大不足，但仍是当前研究成份不明天然药品最惯用方法。中药提取分离和纯化专家讲座第31页中药成份及其适用提取溶剂中药成份极性中药成份类型适用提取溶剂强亲脂性（极性小）挥发油、脂肪油、蜡、脂溶性色素、甾醇类、一些苷元石油醚、己烷亲脂性苷元、生物碱、树脂、醛、酮、醇、醌、有机酸、一些苷类乙醚、氯仿中等极性小一些苷类（如强心苷等）氯仿：乙醇（2：1）中一些苷类（如黄酮苷等）乙酸乙酯大一些苷类（如皂苷、蒽醌苷等）正丁醇亲水性极性很大苷、糖类、氨基酸、一些生物碱盐丙酮、乙醇、甲醇强亲水性蛋白质、黏液质、果胶、糖类、无机盐类水中药提取分离和纯化专家讲座第32页（二）两相溶剂萃取法

1．简单萃取法两相溶剂萃取法是分离天然药品化学成份惯用方法。少许样品萃取用分液漏斗操作；萃取基本原理是利用混合物中各种成份在两相互不相溶溶剂中分配系数差异而到达分离目标。分配系数(Ｋ)能够下式表示：Ｋ＝Ｃu/ＣL

中药提取分离和纯化专家讲座第33页乳化现象

液--液萃取中常碰到乳化现象。产生原因有：溶剂组合、成份种类等。操作中出现乳化现象，可采取以下破乳方法：①久置；②用一金属丝在乳化层中搅动使之破坏；⑦将乳化层抽滤；④将乳化层热敷或冷冻；⑤分出乳化层，再用新溶剂萃取；⑥加少许氯化钠，处理两相比重相差较小及两相溶剂部分互溶问题；⑦滴加数滴醇类如乙醇或磺化蓖麻油等破乳类物质。中药提取分离和纯化专家讲座第34页2．逆流连续萃取法中药提取分离和纯化专家讲座第35页(三)沉淀法

沉淀法是在天然药品提取液中，加入一些试剂使产生沉淀，经过过滤将成份分离方法。依据加入沉淀剂不一样，沉淀法可分为以下几个：

1．酸碱沉淀法

２.铅盐３.试剂沉淀法中药提取分离和纯化专家讲座第36页1．酸碱沉淀法

在天然药品提取液中加入酸或碱试剂后产生沉淀从而到达分离方法称为酸碱沉淀法。该方法是依据酸(碱)成份与碱(酸)试剂反应成盐而溶于水，再加酸(碱)试剂反应重新生成游离酸(碱)从溶液中析出。一些含有内酯结构化合物遇热碱开环生成羧酸盐而溶于水，加酸后，又重新形成内酯环从溶液中析出。本分离法适合用于酸或碱性成份，以及内酯类成份分离。中药提取分离和纯化专家讲座第37页

2．铅盐沉淀法

在含天然药品成份水或稀醇溶液中加人中性醋酸铅或碱式醋酸铅试剂后，一些成份生成铅盐沉淀，过滤使之分离方法称为铅盐沉淀法。中性醋酸铅可与酸性或酚性物质结合成不溶性铅盐。如有机酸、蛋白质、氨基酸、黏液质、鞣质、树脂、酸性皂苷、部分黄酮等；碱性醋酸铅除与上述物质产生铅盐沉淀外，还可沉淀中性皂苷、异黄酮、糖类及一些生物碱等成份。得到铅盐沉淀悬浮于水或含水乙醇中，通入H２Ｓ气体进行复分解反应，即可得到纯化有效成份。本法也可用来沉淀杂质。中药提取分离和纯化专家讲座第38页

3．试剂沉淀法

（1）在天然药品提取液中，加入一些试剂，使之与有效成份结合生成水不溶物，滤集沉淀，经复原处理后，即可得到有效成份。如加入雷氏铵盐可沉淀分离水溶性季铵碱等。另外，还能够用明胶、蛋白质溶液沉淀鞣质；用胆甾醇沉淀甾体皂苷。（2）经浓缩提取液加入另一个难溶性溶剂，改变了原溶剂极性，使其中某种或一些成份析出，以到达纯化日。惯用方法有水-醇法、醇-水法、醇-丙酮法、醇-乙醚法等。中药提取分离和纯化专家讲座第39页（四）盐析法

在天然药品水提液中，加入无机盐，使其到达一定浓度或饱和，促使有效成份在水中溶解度降低而沉淀析出,与其它水溶性较大杂质分离。常作盐析无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。

如三七水提液中加硫酸镁至饱和状态，三七皂苷乙即可沉淀析出。有些成份如原白头翁素、麻黄碱、苦参碱等水溶性较大，在萃取分离时，也往往先在水提取液中加入一定量食盐，再用有机溶剂萃取。

中药提取分离和纯化专家讲座第40页（五）透析法

透析法是利用小分子物质在溶液中可经过半透膜，而大分子物质不能经过半透膜性质而到达分离方法。比如分离纯化皂苷、蛋白质、多肽、多糖等大分子成份时，可用透析法除去无机盐、单糖、双糖等小分子杂质。透析成功是否和透析膜规格关系很大。须依据欲分离成份分子量大小来选择。透析膜有动物膜、火棉胶膜、羊皮纸膜(硫酸纸膜)、蛋白胶膜及玻璃纸膜等。透析法分离速度较慢，为了加紧透析速，可用电透析法，电透析可使带电离子透析速度增加10倍以上。中药提取分离和纯化专家讲座第41页（六）分馏法

分馏法是利用各成份沸点差异进行提取分离方法，用于分离液体混合物。在天然药品有效成份研究中，挥发油及一些液体生物碱分离惯用此法。中药提取分离和纯化专家讲座第42页(七)超临界流体萃取技术

超临界流体萃取是一个利用超临界流体对天然药品中有效成份进行萃取分离新技术。有些物质在临界温度和压力下，可形成一个既非液体又非气体特殊相态称为超临界流体。该流体既含有与气体相同粘度，又含有与液体相同密度，其扩散力和渗透力均大大强于液体，因而对许多天然药品成份有很强溶解能力，且介电常（极性）数随压力增大而增加。可依据成份极性大小，改变压力进行选择性提取及析出。

中药提取分离和纯化专家讲座第43页临界流体萃取优点用二氧化碳作为超临界流体物质含有没有毒无味，不易燃易爆，无残留，安全、价廉，对大多数物质不反应，可循环使用优点,故最惯用于天然药品提取。中药提取分离和纯化专家讲座第44页中药提取分离和纯化专家讲座第45页（八）结晶和重结晶

结晶法是分离和精制固体成份主要方法之一，是利用混合物中各成份在溶剂中溶解度不一样到达分离方法。对天然药品成份纯化精制过程经常就是重复结晶与重结晶过程。通常情况下，结晶形成标志着化合物纯度到达了相当程度，故取得结晶并制备成单体纯品，就成为判定天然药品成份、研究其分子结构主要一步。中药提取分离和纯化专家讲座第46页

1、结晶条件

结晶关键是选择最正确结晶条件，包含样品纯度、溶剂类型、溶液浓度、结晶温度与速度等。（1）普通情况下，样品纯度越高，越轻易结晶；样品中存在杂质较多，会妨碍或延缓结晶形成。

（2）溶液浓度高有利于结晶形成，但若浓度过高，反而不易结晶；浓度较低溶液可放置使溶剂自然挥发至适宜浓度而析出结晶。（3）最适当结晶温度为5～l０℃。长时间放置使结晶迟缓析出，所得结晶往往大而纯。中药提取分离和纯化专家讲座第47页

2、结晶溶剂选择

理想结晶溶剂必须具备以下条件：①不与结晶物质发生化学反应；②对结晶物质溶解度热时大、冷时小，而对杂质溶解度很大或者很小；③沸点适中，轻易挥发；④能给出很好结晶；⑤无毒或毒性很小，便于操作。

中药提取分离和纯化专家讲座第48页

3、结晶纯度判断

一个纯化合物通常都含有一定晶形和均匀色泽，以及一定熔点和较小熔距。故可依据结晶色泽是否均匀、晶形是否一致、熔点是否一定及熔距是否较小，并结合纸色谱或薄层色谱技术，对结晶纯度加以判断。假如经数种不一样展开剂系统展开后均为一近乎圆形斑点，即可判断结晶纯度较高。中药提取分离和纯化专家讲座第49页（九）色谱分离法

色谱法是一个分离和判定复杂混合物有效方法。近年来已被广泛应用于天然药品有效成份分离、提纯及判定。对一些性质相近、结构类似化合物分离，采取经典溶剂法和结晶法不能到达分离目标，使用色谱法往往能够收到很好分离效果。依据色谱分离原理不一样，现将几个惯用色谱分离法介绍以下。中药提取分离和纯化专家讲座第50页按分离原理色谱分类一、吸附色谱二、分配色谱三、离子交换色谱四、大孔吸附树脂法五、凝胶色谱法

中药提取分离和纯化专家讲座第51页一、吸附色谱1、基本原理2、吸附剂3、洗脱剂4、被分离物质5、吸附剂、洗脱剂和被分离成份三者关系6、操作方式7、两种特殊吸附色谱中药提取分离和纯化专家讲座第52页1、基本原理

吸附剂、洗脱剂与待分成份称为吸附过程三要素。吸附色谱是利用吸附剂(固定相)对混合物中各成份吸附能力差异而抵达分离目标。当混合成份抵达吸附剂表面对．因为吸附剂表面分子对成份分子吸附作用，使成份分子在吸附剂表面浓度增大，这种现象称为吸附；当洗脱剂(移动相)连续经过吸附剂表面时，吸附剂吸附洗脱溶剂，混合物中各成份分子被洗脱溶解，这种现象称为解吸附。被分离混合物中各成份对同一固定相和移动相之间吸附—解吸附平衡不一样，就使各成份在两相迁移速度不一样而分离。此法尤其适合用于脂溶性中等分子量成份分离。中药提取分离和纯化专家讲座第53页

2、吸附剂

惯用极性吸附剂有:硅胶、氧化铝非极性吸附剂惯用：活性炭中药提取分离和纯化专家讲座第54页吸附剂活化

氧化铝吸附力大于硅胶，吸附剂活度级别(吸附力)与其含水量相关。吸附剂含水量愈高，吸附力愈低，如硅胶含水量＞12％，吸附力就很弱而不能作为吸附剂使用，但当加热到100～110℃记时即可除去绝大多数水分。吸附剂受热除去水分，提升其吸附力过程称为活化；加入一定量水，降低其吸附能力过程称为去活化。

中药提取分离和纯化专家讲座第55页适用范围

硅胶适合用于中性或酸性成份分离，但不适合用于碱性成份分离；氧化铝适合用于碱性成份分离，但不宜用于醛、酮、酯、内酯等类型化合物分离。

活性碳多孔结构造成接触面积大，吸附性强,能够除异味和一些液体颜色.还能够净化气体与液体,如防毒面具就是以活性炭来净化空气.中药提取分离和纯化专家讲座第56页3、洗脱剂

洗脱剂应具备以下条件：①纯度高，杂质含量少；②与样品、吸附剂不起化学反应；②对被分离成份有一定溶解度；④黏度小、沸点低、易挥发等。洗脱剂极性普通用介电常数ε表示。对极性吸附剂来说，洗脱剂介电常数愈大，极性愈强，其洗脱能力愈强；对非极性吸附剂而言则相反，洗脱剂介电常数愈小，其洗脱能力愈强。中药提取分离和纯化专家讲座第57页4、被分离物质

用硅胶、氧化铝等极性吸附剂作固定相吸附色谱，对极性小成份吸附力弱，洗脱时先流出；对极性大成份吸附力大，洗脱时后流出。化合物极性大小主要取决于其化学结构。中药提取分离和纯化专家讲座第58页5、吸附剂、洗脱剂和被分离成份三者关系

在吸附色谱中，各成份分离取决于它们迁移速。成份极性愈大，与固定相吸附力愈大，迁移速度愈慢；反之则迁移速度愈快。洗脱剂极性大，被吸附剂吸附力大，则对成份洗脱能力大；反之，洗脱力小。无论是吸附力还是洗脱力，过大或过小均不利于成份分离。详细应用时必须从吸附剂、被分离成份、洗脱剂三个方面综合考虑。中药提取分离和纯化专家讲座第59页6、操作方式

（1）

薄层色谱法

（2）

柱色谱法

中药提取分离和纯化专家讲座第60页（1）薄层色谱法

薄层色谱法是一个快速、简便、灵敏分离检识方法。薄层色谱将吸附剂均匀地铺在玻璃板上，把欲分析样品点加到薄层上，然后用适当溶剂展开而到达分离、判定和定量目标。薄层色谱操作过程主要包含制板、点样、展开和显色四个方面。

中药提取分离和纯化专家讲座第61页中药提取分离和纯化专家讲座第62页（2）柱色谱法

柱色谱法是天然药品成份研究中惯用色谱方法。其分离原理、吸附剂及洗脱剂选择均与薄层色谱法相同。在操作上能够分为装柱、上样和洗脱三大步骤。柱色谱法分离样品量大，故大多数情况下均为制备性分离，但应注意上柱样品一定要经过适当纯化处理，如过滤、萃取、脱色、沉淀等，不然将影响分离效果。中药提取分离和纯化专家讲座第63页吸附柱层析惯用混合溶剂

已烷—苯苯—乙醚苯—乙酸乙酯氯仿—乙醚氯仿—乙酸乙酯氯仿—甲醇丙酮—水甲醇—水极性递增中药提取分离和纯化专家讲座第64页7、两种特殊吸附色谱

（1）聚酰胺吸附色谱（2）大孔吸附树脂中药提取分离和纯化专家讲座第65页（1）聚酰胺吸附色谱

普通认为聚酰胺色谱是一个吸附色谱，因分子上酰胺基能与酚类羟基、酸类羧基及醌类醌基等形成氢键吸附。对黄酮类、酚类、醌类、有机酸、鞣质等成份分离效果极佳，可使性质极相同类似物得到分离。吸附性强弱取决于各种化合物与与之形成氢键缔合能力。通常在含水溶剂中大致有以下规律中药提取分离和纯化专家讲座第66页中药提取分离和纯化专家讲座第67页形成氢键基团数目越多，吸附力越强中药提取分离和纯化专家讲座第68页成键位置影响吸附力。易形成氢键者吸附力减弱中药提取分离和纯化专家讲座第69页分子中芳香化程度高，则吸附性增强，反之，则弱中药提取分离和纯化专家讲座第70页各种溶剂聚酰胺柱上洗脱能力有弱至强可大致排列以下

水甲醇丙酮氢氧化钠水溶液甲酰胺二甲基甲酰胺尿素水溶液中药提取分离和纯化专家讲座第71页（2）大孔吸附树脂法

大孔吸附树脂是一个含有大孔结构高分子吸附剂，含有选择性吸附与分子筛双重功效。依据聚合材料不一样，通常分为中等极性与非极性两类。它所含有吸附性是由范德华引力或产生氢键吸附结果，在水溶液中能选择性地吸附有效成份。分子筛性能是因为其本身多孔性网状结构决定。可依成份分子体积大小及极性强弱，在一定规格大孔吸附树脂上，以适当溶剂洗脱而分离。中药提取分离和纯化专家讲座第72页洗脱剂选择

惯用洗脱剂有水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等，普通先采取水洗除杂质后，再采取对化合物有较大溶解度溶剂将被吸附成份洗脱。也可采取不一样极性梯度洗脱剂分别洗下不一样组分。中药提取分离和纯化专家讲座第73页大孔吸附树脂应用

大孔吸附树脂因含有吸附容量大、选择性好、吸附速度快、吸附轻易及成本低、收率较高、易再生等优点，广泛用于天然化合物分离与富集工作如苷与糖分离、生物碱精巧。在多糖、黄酮、三萜类化合物分离方面有很好应用实例。中药提取分离和纯化专家讲座第74页二、分配色谱

(一)基本原理

（二）被分离成份与溶剂系统性质关系

(三)操作方式中药提取分离和纯化专家讲座第75页(一)基本原理

当硅胶含水量＞17％时，其吸附性消失，硅胶成为支持剂(载体)，其吸附水成为固定相，洗脱剂选择与水互不相溶有机溶剂

样品中成份就在固定相和移动相之间分配而到达分离。在洗脱过程中，成份极性愈大，在固定相中溶解度愈大，迁移速度愈慢，洗脱时后流出；相反，成份极性愈小，洗脱时先流出，以此进行分离。中药提取分离和纯化专家讲座第76页正相色谱和反相色谱

分离水溶性较大或极性较大成份如生物碱、苷类、糖类、有机酸等化合物。固定相多采取强极性溶剂，如水、缓冲溶液等，流动像则用氯仿、乙酸乙酯等弱极性有机溶剂，如这类色谱称为正相分配色谱。当分离脂溶性化合物，如高级脂肪酸、油脂、游离甾体时，固定相多采取石油蜡等亲脂性溶剂作固定相，水或甲醇等强极性溶剂为移动相，称为反相分配色谱。中药提取分离和纯化专家讲座第77页（二）被分离成份与溶剂系统性质关系中药提取分离和纯化专家讲座第78页(三)操作方式1、纸色2、分配薄层色谱3、分配柱色谱中药提取分离和纯化专家讲座第79页1．纸色谱

纸色谱是以滤纸作为载体(支持剂)，滤纸上吸附水作为固定相，与水不相混溶有机溶剂作为移动相分配色谱。混合物中各成份在两相间分配系数不一样，在层析纸上移动位置不一样，产生比移值差异，由此到达分离目标。某种物质在一定溶剂系统两相之间有固定分配系数，所以在纸色谱上也有固定比移值，借此能够到达分析判定目标。中药提取分离和纯化专家讲座第80页2．分配薄层色谱

分配薄层色谱原理和纸色谱相同。装置及操作与吸附薄层色谱相同，只是铺板用不是吸附剂而是支持剂。在分配色谱中流动对应先用固定相饱和，不然在展开过程中，流动相流过支持剂就把支持剂上固定相带走一部分或全部，最终只剩下支持剂，就不再是分配色谱了。中药提取分离和纯化专家讲座第81页3．分配柱色谱

装置同吸附柱色谱。将吸附固定相支持剂装于柱中，样品溶于少许固定相加入柱上端，以移动相进行洗脱，分别搜集。中药提取分离和纯化专家讲座第82页三、离子交换色谱法(一)基本原理(二)操作（三）离子交换色谱应用。中药提取分离和纯化专家讲座第83页(一)基本原理

离子交换树脂解离阳离子或阴离子和水溶液中离子发生交换作用，并被吸附到柱上；再用强离子浓度水溶液进行可逆交换，使被分离成份从柱上洗脱下来，即可实现分离。用于离子型成份精制