亲子鉴定与DNA专业知识讲座

亲子判定与DNA亲子判定历史亲子判定原理判定标准DNA指纹法比较第1页所罗门审判：

大家都据说过所罗门审判这样一件故事：两位妇人都声称自己是孩子母亲，于是所罗门就命令一名侍卫把那个孩子带来，要用剑将其辟成两半分给他们两，成果假母亲同意所罗门判决，而孩子真正母亲却恳求侍卫饶了孩子性命，她解释说：“把孩子给了假母亲，总比让孩子惨死好。”当然，真假母亲也就水落石出了。第2页《十二铜表法》：

公元前449年左右，相称于我国春秋战国时期，古罗马制定了成文法典《十二铜表法》，它记载有最早有关“亲子判定”法律条文。即根据妊娠月数推定父权。第3页鹬术察情:

在我国，有关亲权认定最常见办法有两种：一为“鹬术察情”，即先施诡计，后观其真情并作出判断。这种办法和千前面所说所罗门断案法如出一辙。第4页滴骨验亲法：另一种办法就是“滴骨验亲”法。即以生者血滴在尸骨上，观测血能否浸入骨内，浸入则被以为二者有血缘关系，在多种古籍中有多种统计。三国时代（公园220—280年）谢承著《会稽先贤传》中《以弟血滴兄骨》也许是统计此法最早史料：陈业哥哥因海难不幸殒命，当初一同遇难有五六十人，并且尸体都已严重腐败而无法识别死者身份。陈业就用刀刺破自己手臂将血分别滴在尸骨上，发觉其血液只能浸入一具尸骨，其他皆不能。陈业就这样确认其兄尸骨。第5页合血法：等到了明代，更是采取了“合血法”来识别亲权。明末清初检查书籍中都有相同记载：“亲子弟兄或自幼分离，欲相结识。难辨真伪。命各刺出血，滴一器内，真则共凝为一，不然不凝也。”第6页当代亲子判定法：ABO血型检查DNA指纹分析STR技术应用第7页ABO血型检查：

人ABO血型是受三个复等位基因控制，i为隐性基因，IA、IB为显性基因。决定ABO血型基因型有6种，体现型有4种：A型、B型、AB型和O型；根据孟德尔遗传规律，即可计算出孩子也许血型概率。第8页从表中可知：孩子血型不是惟一确定，而是一种大小差异很大概率事件。不过除了A型血与B型血人婚配外，其他血型组合都有概率为0不也许事件，即都有某些不也许出现血型。因此，用红细胞进行亲子判定，只能否认，不能肯定。也就是只能做亲权排除。第9页DNA指纹

大家懂得，每个人体细胞内都具有23对染色体，每条染色体中部具有一种DNA分子，DNA分子中核苷酸序列包括着遗传信息，在DNA分子中存在三种类型：单拷贝序列、中等程度反复序列、高度反复序。每个反复序列在300个核苷酸长度之内，由于高度反复，序列通过超离心后以卫星带出目前主要DNA带附近，因此也称卫星DNA，其中反复序列单元则称为“小卫星DNA”。“小卫星”具有高度可变性，但在“小卫星DNA“中有一小段序列则在所有个体中都同样，称为“关键序列”。假如把关键序列串联起来作为分子探针与不一样个体DNA进行分子杂交，就会出现各自特有杂交图谱。它们与人指纹同样具有专一性和特异性，因此称作“DNA指纹”。

通过对人类基因组解析，发觉人与人之间99．99％碱基序列都相同，而剩下0.01%碱基特性序列则来自于双亲。据此可用于“亲子判定”。第10页第11页第12页第13页长处：DNA指纹能够同步检测好些高度多态性位点，却只需要少许血样(不一定新鲜)．并对其他任何组织如被毛、皮屑等也同样有效．DNA指纹不需要专门试验室，程序相对简单．一种通过对应训练技术员，在任何能够进行DNA重组工作试验室里都能够完成，也不需要准备大量特殊试剂．若用非放射性标识DNA探针则使用一般商业性试剂即可进行DNA指纹判定．伴随探针和酶增多，DNA指纹辨别能力将会增强，足以处理父母未知个体亲子判定问题．这是典型血液和生化多态性办法无能为力．DNA指纹试验室费用低．第14页第15页PCR技术原理

第16页1953年，PCR技术开始被应用到法医判定中，它突破了“极微量”生物学检材制约DNA检测技术应用范围技术“瓶颈”，也是用于亲子判定检材几乎包括所有人体组织，尤其是那些陈旧检材。如1992年因国内务部法医服务中心主持和完成俄国末代沙皇尼古拉二世、皇后亚历山德拉及其3位公主遗骸身份判定工作，成为了当今亲子判定典型之作。第17页STR(ShortTandemRepeats)

短串联反复序列(STR)是由2—6bp反复单位组成关键序列，是一种广泛分布在人类基因组中DNA片段，主要由关键序列拷贝数目标变化产生长度多态性。。其最大特点是具有很高突变率，从而体现出广泛多态性，适合于统计短期进化事件，近年来已成为人类遗传学研究有效遗传标识。Y染色体是单倍体，呈父系遗传，除拟常染色体区域外，其他Y染色体特异区不会发生重组，因此通过对Y染色体上DNA(Y—DNA)系统分析可直接反应种族或人群父系演化历史。Y—STR位于Y染色体非编码区，属于Y染色体特异区，利用其多态性，可研究在父系进化历史中发生突变事件，探讨关系较近群体之间亲缘关系和他们之间存在微进化关系第18页STR(Shorttandemrepeats)如D5S818：5’GGGTGATTTTCCTTTTGGT(AGAT)7-14TGTGGCTATGATTGGAATCA3’.目前试验室判定常使用STR基因座有：TH01、VWFA31、TPOX、CSFIPO、FIBRA、DS1358、D7S820、D8S1179和D5S818。第19页第20页第21页第22页长处：

STR分型具有很高敏捷度和良好反复性，分型成果稳定可靠。因此，STR技术较前者有更高非父排除率和个人识别几率。STR位点总识别率为0。9999999999999935，合计非父排除为99．999％，在亲子判定中已达成很高水平，因此被称为“第二代DNA指纹”。STR位点在人类基因组中广泛分布，具有丰富多态位点资源，并且扩增STR基因座仅需要少许模板DNA。联合使用多种STR位点，可满足多种需要。基于以上长处，近几年做亲子判定多使用STR技术第23页应用范围：产前亲子判定此类判定主要针对遭遇性侵犯而怀孕妇女，目标是确定其所孕胎儿与性侵犯事实关联性，方便为当事人是否终止妊娠提供科学根据。其间才起源于羊水，由于羊水中具有胎儿脱落细胞，羊水抽取时间一般在怀孕12—20周内。第24页无名尸骸身份确定：以往在此类判定中所面临最大难题就是：无法找到死者生前合适检材进行检测比对，虽然死者遗有带毛囊头发或口腔上皮细胞等，但因传统ABO血型以及血清型、红细胞酶型和人白细胞抗原（HLA）型等检测项目其检测效果很差。同样，无名尸体检材条件往往也不适合作上述检测。假如再采取亲子判定办法确认死者与假设父母之间存在着亲生血缘关系，同样能够确定死者身份。不过当成果显示死者与假设父母都不存在亲生血缘关系时，是不是能够得出排除该寺这不起源于该家庭组员呢？答案是“不能确定，也不能排除”，由于从逻辑上将该检测成果不能排除该死者从其出生时就被换错也许，而其父母也并不知晓。第25页第26页亲权认定标准：从理论上讲，在判定中只要出现排除指标并且充足排除存在基因突变也许，就能够以此作出排除存在亲权结论。需要说明是：其中最主要一项参数就是总检测项目标累积非父排除率，既体现它排除假爸爸鉴别能力，通用